本发明涉及药物化学和药物治疗学领域。具体涉及新的硼酸类化合物及其制备方法和用途，尤其一种作为20s蛋白酶体抑制剂的硼酸类化合物及其制备方法。
背景技术：
研究报道了泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasomepathway，简称upp)是真核细胞中蛋白质降解的主要途径，能够调控参与细胞周期控制的蛋白质水平，维持不同细胞过程的生物体内平衡。研究显示，在大部分哺乳动物细胞中，该通路能够识别和降解错误折叠的蛋白质；大量实验证明，癌症、心脑血管疾病以及神经退行性疾病的发病都与泛素-蛋白酶体通路有重要的联系。
研究公开了在泛素-蛋白酶体通路中，多重催化的蛋白酶复合物26s蛋白酶体是水解蛋白的主要组分，由两个调节颗粒19s蛋白酶体和一个圆柱形的20s蛋白酶体组成，19s蛋白酶体位于20s蛋白酶体的两端，由18个亚基组成，控制蛋白底物进入20s蛋白酶体空腔中的识别、折叠和易位；20s蛋白酶体由28个亚基构成4个堆叠环，其中7个不同的α亚基(α1-α7)形成两个外部腔室，7个不同的β亚基(β1-β7)形成具有蛋白水解活性位点的中心腔室；有关中心腔室中的三个亚基蛋白水解活性已被研究确定，其包括：β1亚基具有谷氨酰转肽水解活性(pgph)，β2亚基具有胰蛋白酶样活性(t-l)，β5亚基具有糜蛋白酶样活性(ct-l)。
硼替佐米是共价型可逆的选择性蛋白酶体抑制剂，主要抑制糜蛋白酶样活性，其于2003年由千年制药公司在美国上市，目前已用于临床治疗多发性骨髓瘤。然而，临床数据显示，硼替佐米仍存在着较多的毒副作用，例如腹泻、呕吐、疼痛性外周神经病变以及血小板减少症等。迄今为止，这些毒副作用的机制尚不清楚，此外，硼替佐米的临床使用需要每周两次的静脉注射或皮下注射给药方案，给患者带来了极大的不便。因此，研制开发一种毒副作用低、给药灵活、能够口服的新型蛋白酶体抑制剂具有十分重要的现实意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种结构新颖且具有抑制蛋白酶体功能的硼酸类化合物。
本发明的另一目的在于提供上述硼酸类化合物的制备方法。
本发明进一步目的在于提供上述硼酸类化合物在用于制备治疗与蛋白酶体相关疾病药物中的用途。
具体的，
本发明提供了式i结构的硼酸类化合物，
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
在本发明的一些实施例中，式i化合物具有以下结构：
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
在本发明的一些实施例中，式i化合物具有以下结构：
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
在本发明的一些实施例中，式i-a化合物具有以下结构：
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
在本发明的一些实施例中，式i-a化合物具有以下结构：
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
在本发明的一些实施例中，式i-b化合物具有以下结构：
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
在在本发明的一些实施例中，式i-b化合物具有以下结构：
其中：
x为o或者nh；
r为芳基或者杂芳基；
n为0或者1。
本发明中，
术语“芳基”用于表示芳族碳环基，包括单环或者多环芳烃；
术语“杂芳基”用于表示取代的或未取代的芳族碳环基，其环结构包括1-4个杂原子；也用于表示具有两个或者多个环的芳族碳环基；
虚线和粗线用于表示一个或多个立体中心的化学结构，指示化学结构中立体中心的绝对立体化学结构；
本发明中，结构图式中所描述的键并非表示较优的立体结构，含有一个或多个立体中心的化学结构包含所有可能的立体异构体形式以及其混合物；
术语“抑制剂”用于表示能够阻断或减少酶、酶系统、受体或者其他药理学靶标活性的化合物。
术语“治疗”用于表示包括逆转、减轻或阻止临床病症及相关的病理状态，以改善或稳定患者的情况。
本发明进一步提供了所述的化合物的制备方法：
本发明的化合物可以通过多种合成方法来制备，用于制备本发明化合物的一部分原料可以来源于商业试剂公司，另一部分则可以使用本领域公知的简明转换方法制备。
具体的，所示的通式i化合物可根据下述通用合成路线制备，其中通式i化合物的取代基具有前文所述的意义。该合成方法仅为示例性的说明本发明，而并非将其限制于该发明。本发明中，按下述路线合成式i-a化合物：
式iii-1在n-buli作用下得到式iii-2，式iii-2与b(och3)3反应得到式iii-3，式iii-3与iii-4-a经酯交换反应得到式iii-5-a，式iii-5-a与金属试剂i-bumgbr反应，再经无水zncl2催化得到式iii-6-a，式iii-6-a与lin(sime3)2反应得到式iii-7-a，式iii-7-a在hcl作用下脱保护得到式iii-8-a，式iii-8-a与式iv-1经缩合反应得到式iv-2-a，式iv-2-a脱除与b连接的基团得到式i-a；
按下述路线合成式i-b化合物：
式iii-1在n-buli作用下得到式iii-2，式iii-2与b(och3)3反应得到式iii-3，式iii-3与iii-4-b经酯交换反应得到式iii-5-b，式iii-5-b与金属试剂i-bumgbr反应，再经无水zncl2催化得到式iii-6-b，式iii-6-b与lin(sime3)2反应得到式iii-7-b，式iii-7-b在hcl作用下脱保护得到式iii-8-b，式iii-8-b与式iv-1经缩合反应得到式iv-2-b，式iv-2-b脱除与b连接的基团得到式i-b。
更具体的，本发明按下述路线合成通式i化合物：
其中，通式i化合物的取代基具有前文所述的意义。
合成式i-a化合物：
1)式iii-1结构的化合物在-110℃条件下与n-buli反应得到式iii-2所示的有机锂中间体；2)式iii-2结构的化合物在-110℃条件下与b(och3)3反应得到iii-3所示的硼酸二甲酯结构；3)式iii-3结构的化合物与式iii-4-a所示的手性蒎烷二醇在室温条件下进行酯交换反应得到iii-5-a所示的硼酸酯结构；
4)式iii-5-a结构的化合物先在-78℃条件下与金属试剂i-bumgbr反应，后又在室温条件下经无水zncl2催化得到iii-6-a所示的硼酸酯结构；
5)式iii-6-a结构的化合物在-78℃条件下与lin(sime3)2反应得到式iii-7-a所示的双(三甲基硅)保护的氨基硼酸酯结构；
6)式iii-7-a结构的化合物在-78℃条件下与hcl作用脱除双(三甲基硅)保护得到式iii-8-a所示的无保护的氨基硼酸酯盐酸盐结构；
7)式iii-8-a结构的化合物与式iv-1结构的化合物在缩合剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(缩写为edc·hcl)和1-羟基苯并三氮唑(缩写为hobt)存在的条件下反应得到式iv-2-a所示的硼酸酯结构；
8)式iv-2-a结构的化合物在室温条件下与2-甲基丙基硼酸发生酯交换反应得到式i-a所示的目标硼酸化合物。
合成式i-b化合物：
1)式iii-1结构的化合物在-110℃条件下与n-buli反应得到式iii-2所示的有机锂中间体；
2)式iii-2结构的化合物在-110℃条件下与b(och3)3反应得到iii-3所示的硼酸二甲酯结构；
3)式iii-3结构的化合物与式iii-4-b所示的手性蒎烷二醇在室温条件下进行酯交换反应得到iii-5-b所示的硼酸酯结构；
4)式iii-5-b结构的化合物先在-78℃条件下与金属试剂i-bumgbr反应，后又在室温条件下经无水zncl2催化得到iii-6-b所示的硼酸酯结构；
5)式iii-6-b结构的化合物在-78℃条件下与lin(sime3)2反应得到式iii-7-b所示的双(三甲基硅)保护的氨基硼酸酯结构；
6.式iii-7-b结构的化合物在-78℃条件下与hcl作用脱除双(三甲基硅)保护得到式iii-8-b所示的无保护的氨基硼酸酯盐酸盐结构；
7)式iii-8-b结构的化合物与式iv-1结构的化合物在缩合剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(缩写为edc·hcl)和1-羟基苯并三氮唑(缩写为hobt)存在的条件下反应得到式iv-2-b所示的硼酸酯结构；
8)式iv-2-b结构的化合物在室温条件下与2-甲基丙基硼酸发生酯交换反应得到式i-b所示的目标硼酸化合物。
本发明进行了药理学研究实验，结果表明，所制得的通式i化合物具有良好的蛋白酶体抑制活性，部分化合物在纳摩尔水平下表现出良好的蛋白酶体抑制活性，可用于制备蛋白酶体抑制剂，用于治疗与蛋白酶体相关的疾病。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步的说明，但是这些实施例并不限制本发明的范围。
本发明实验方法中用于制备本发明化合物的一部分原料可以来源于商业试剂公司，另一部分则可以使用本领域公知的简明转换方法制备；化合物结构通过核磁共振(nmr)和液质联用(lcms)确定；nmr测定使用varian400mhz核磁共振仪，测定试剂为cdcl3、cd3od和dmso-d6，内标为tms，化学位移(δ)以ppm为单位；lcms测定使用agilenttechnologies6120液质联用仪；柱层析使用yamazenai-580s中压制备色谱仪进行产物纯化。
实施例1：制备二氯亚甲基锂(化合物iii-2)
lichcl2
(iii-2)
在氮气保护条件下，向200ml无水四氢呋喃中加入无水二氯甲烷(4.6ml，72mmol)，温度降至-110℃，逐滴滴加1.6m的正丁基锂正己烷溶液(38ml，60mmol)，滴加完毕后，继续在-110℃温度下搅拌1小时；反应溶液未经纯化直接用于下步反应。
实施例2：制备二氯亚甲基硼酸二甲酯(化合物iii-3)
在氮气保护条件下，温度继续控制在-110℃，向实施例1制备好的化合物iii-2溶液中加入硼酸三甲酯(8ml，72mmol)，继续在-110℃温度下搅拌1小时，然后加入5nhcl溶液12ml，反应慢慢升至室温，将反应液转入分液漏斗中，分出有机相，水相利用乙醚萃取(3×10ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得白色固体8.7g，产率92％；反应产物未经纯化直接用于下步反应。
实施例3：制备(+)-α-蒎烷二醇(化合物iii-4-a)
在氮气保护条件下，向100ml叔丁醇中加入me3no·2h2o(11g，102mmol)的水溶液，搅拌下依次加入(+)-α-蒎烯(15ml，97mmol)、吡啶(7ml)和四氧化锇(51mg，0.2mmol)，然后升温至回流，24小时后tlc检测显示反应完全，反应降至室温，加入nahso3(1.2g，12mmol)搅拌1小时，将反应液转入分液漏斗中，分出有机相，水相利用乙醚萃取(3×20ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)得白色固体15g，产率91％。
实施例4：制备二氯亚甲基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物iii-5-a)
向150ml无水四氢呋喃中加入实施例2化合物iii-3(10g，63mmol)和实施例3化合物iii-4-a(7.2g，42mmol)，室温搅拌，18小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得无色油状液体10g，产率91％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ5.39(s,1h),4.46(d,1h,j＝8.8hz),2.33(m,2h),2.12(t,1h,j＝5.2hz),1.94(m,2h),1.46(s,3h),1.30(s,3h),1.21(d,1h,j＝11.2hz),0.84(s,3h).。
实施例5：制备2-甲基-4-氯-丁基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯(化合物iii-6-a)
在氮气保护条件下，向100ml无水乙醚中加入实施例4化合物iii-5(10g，38mmol)，温度降至-78℃，逐滴滴加2m的异丁基溴化镁乙醚溶液(17ml，33mmol)，滴加完毕后，加入干燥的zncl2粉末，反应慢慢升至室温，20小时后tlc检测显示反应完全，过滤除去固体，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝200：1)得无色油状液体7.6g，产率81％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ4.36(d,1h,j＝9.1hz),3.52(m,1h),2.35(m,1h),2.24(m,1h),2.08(t,1h,j＝5.4hz),1.92(m,2h),1.87(d,1h,j＝1.6hz),1.79(m,1h),1.62(m,1h),1.41(s,3h),1.29(s,3h),1.18(d,1h,j＝11.0hz),0.92(d,3h,j＝6.6hz),0.90(d,3h,j＝6.6hz),0.84(s,3h).。
实施例6：2-甲基-4-氨基-丁基硼酸-(+)-α-蒎烷二醇酯盐酸盐(化合物iii-8-a)的制备
在氮气保护条件下，向100ml无水四氢呋喃中加入实施例5化合物iii-6-a(4.5g，16mmol)，温度降至-78℃，逐滴滴加1m的lin(sime3)2四氢呋喃溶液(24ml，24mmol)，滴加完毕后，反应慢慢升至室温，24小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，加入50ml正己烷溶解，过滤除去固体，滤液温度降至-78℃，加入2m的hcl乙醚溶液(24ml，48mmol)，反应慢慢升至室温，出现大量白色固体，过滤并用乙醚洗涤，得到白色固体3.2g，产率66％。1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ7.84(s,3h),7.41(s,1h),7.29(s,1h),7.16(s,1h),4.44(m,1h),2.74(m,1h),2.32(m,1h),2.18(m,1h),1.99(t,1h,j＝5.5hz),1.88(m,1h),1.73(m,2h),1.47(m,2h),1.35(s,3h),1.24(s,3h),1.11(d,1h,j＝10.8hz),0.86(d,6h,j＝6.5hz),0.81(s,3h).。
实施例7：(-)-α-蒎烷二醇(化合物iii-4-b)的制备
在氮气保护条件下，向100ml叔丁醇中加入me3no·2h2o(11g，102mmol)的水溶液，搅拌下依次加入(-)-α-蒎烯(15ml，97mmol)、吡啶(7ml)和四氧化锇(51mg，0.2mmol)，然后升温至回流，20小时后tlc检测显示反应完全，反应降至室温，加入nahso3(1.2g，12mmol)搅拌1小时，将反应液转入分液漏斗中，分出有机相，水相利用乙醚萃取(3×20ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)得白色固体14g，产率85％。
实施例8：二氯亚甲基硼酸-(-)-α-蒎烷二醇酯(化合物iii-5-b)的制备
向150ml无水四氢呋喃中加入实施例2化合物iii-3(10g，63mmol)和实施例7化合物iii-4-b(7.2g，42mmol)，室温搅拌，23小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得无色油状液体9g，产率81％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ5.39(s,1h),4.46(d,1h,j＝8.7hz),2.33(m,2h),2.12(t,1h,j＝5.4hz),1.94(m,2h),1.46(s,3h),1.30(s,3h),1.20(d,1h,j＝11.2hz),0.84(s,3h).。
实施例9：2-甲基-4-氯-丁基硼酸-(-)-α-蒎烷二醇酯(化合物iii-6-b)的制备
在氮气保护条件下，向100ml无水乙醚中加入实施例8化合物iii-5-b(10g，38mmol)，温度降至-78℃，逐滴滴加2m的异丁基溴化镁乙醚溶液(17ml，33mmol)，滴加完毕后，加入干燥的zncl2粉末，反应慢慢升至室温，22小时后tlc检测显示反应完全，过滤除去固体，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝200：1)得无色油状液体5.8g，产率62％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ4.36(d,1h,j＝8.8hz),3.52(m,1h),2.35(m,1h),2.24(m,1h),2.08(t,1h,j＝5.4hz),1.91(s,2h),1.87(s,1h),1.79(m,1h),1.61(m,1h),1.41(s,3h),1.29(s,3h),1.18(d,1h,j＝11.1hz),0.92(d,3h,j＝6.6hz),0.90(d,3h,j＝6.6hz),0.84(s,3h).。
实施例10：2-甲基-4-氨基-丁基硼酸-(-)-α-蒎烷二醇酯盐酸盐(化合物iii-8-b)的制备
在氮气保护条件下，向100ml无水四氢呋喃中加入实施例9化合物iii-6-b(4.5g，16mmol)，温度降至-78℃，逐滴滴加1m的lin(sime3)2四氢呋喃溶液(24ml，24mmol)，滴加完毕后，反应慢慢升至室温，18小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，加入50ml正己烷溶解，过滤除去固体，滤液温度降至-78℃，加入2m的hcl乙醚溶液(24ml，48mmol)，反应慢慢升至室温，出现大量白色固体，过滤并用乙醚洗涤，得到白色固体4.1g，产率85％。1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ7.85(s,3h),7.42(s,1h),7.29(s,1h),7.16(s,1h),4.45(d,1h,j＝8.3hz),2.76(m,1h),2.32(m,1h),2.20(m,1h),2.00(t,1h,j＝5.3hz),1.88(s,1h),1.73(m,2h),1.48(t,2h,j＝7.3hz),1.36(s,3h),1.25(s,3h),1.11(dd,1h,j＝5.5hz,j＝10.6hz),0.86(d,6h,j＝4.8hz),0.82(s,3h).。
实施例11：(s)-2-苯氧基-3-苯基丙酸甲酯的制备
在氮气保护条件下，向50ml无水甲苯中依次加入(r)-2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(1.1g，6mmol)、苯酚(0.38g，4mmol)和三苯基膦(1.6g，6mmol)，温度降至0℃搅拌，逐滴滴加diad(1.2g，6mmol)的无水甲苯溶液，反应慢慢升至室温，24小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，向剩余物中加入10ml乙醚和10ml正己烷，过滤除去固体，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝50：1)得产物0.58g，产率57％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ7.30(d,4h,j＝4.4hz),7.23(m,3h),6.95(t,1h,j＝7.4hz),6.83(d,2h,j＝7.8hz),4.81(m,1h),3.72(s,3h),3.25(m,2h).ms(esi)m/z257.0[m+h]+,279.0[m+na]+.
(s)-2-苯氧基-3-苯基丙酸的制备
向5ml四氢呋喃中加入(s)-2-苯氧基-3-苯基丙酸甲酯(0.35g，1.4mmol)，室温搅拌，加入7ml的1m氢氧化钠溶液，6小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，向剩余物中加入6m的hcl溶液酸化，利用乙醚萃取(3×5ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得白色固体0.33g，产率97％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ9.94(s,1h),7.29(m,7h),6.98(t,1h,j＝7.4hz),6.85(d,2h,j＝8.2hz),4.85(m,1h),3.29(m,2h).ms(esi)m/z241.0[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-2-苯氧基-3-苯基丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-1)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-苯氧基-3-苯基丙酸(27mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，13小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，5小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝100：1)得白色固体17mg，产率44％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.26(m,7h),6.96(m,3h),5.11(m,1h),3.26(m,2h),2.66(t,1h,j＝7.3hz),1.48(m,1h),1.24(t,2h,j＝7.1hz),0.81(d,6h,j＝6.6hz).ms(esi)m/z354.0[m-h]-,368.0[m+ch2-h]-,382.0[m+2ch2-h]-.。
实施例12：(s)-2-(1-萘氧基)-3-苯基丙酸甲酯的制备
在氮气保护条件下，向50ml无水甲苯中依次加入(r)-2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(1.1g，6mmol)、1-萘酚(0.58g，4mmol)和三苯基膦(1.6g，6mmol)，温度降至0℃搅拌，逐滴滴加diad(1.2g，6mmol)的无水甲苯溶液，反应慢慢升至室温，24小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，向剩余物中加入10ml乙醚和10ml正己烷，过滤除去固体，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝60：1)得产物0.56g，产率46％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.31(m,1h),7.78(m,1h),7.40(m,8h),7.24(m,1h),6.64(d,1h,j＝7.6hz),5.03(m,1h),3.71(s,3h),3.41(m,2h).ms(esi)m/z307.0[m+h]+,329.0[m+na]+.
(s)-2-(1-萘氧基)-3-苯基丙酸的制备
向5ml四氢呋喃中加入(s)-2-(1-萘氧基)-3-苯基丙酸甲酯(0.56g，1.8mmol)，室温搅拌，加入9ml的1m氢氧化钠溶液，6小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，向剩余物中加入6m的hcl溶液酸化，利用乙醚萃取(3×5ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得白色固体0.52g，产率99％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ9.68(s,1h),8.27(m,1h),7.79(m,1h),7.39(m,9h),6.67(d,1h,j＝7.7hz),5.07(m,1h),3.44(m,2h).ms(esi)m/z291.0[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-2-(1-萘氧基)-3-苯基丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-2)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-(1-萘氧基)-3-苯基丙酸(32mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，16小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，5小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝80：1)得白色固体15mg，产率34％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ8.24(m,1h),7.80(m,1h),7.36(m,9h),6.84(t,1h,j＝7.9hz),5.29(m,1h),3.42(m,2h),2.70(t,1h,j＝7.1hz),1.43(m,1h),1.19(t,2h,j＝6.1hz),0.78(d,6h,j＝7.3hz).ms(esi)m/z404.0[m-h]-,418.0[m+ch2-h]-,432.0[m+2ch2-h]-.。
实施例13：(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氧基)丙酸甲酯的制备
在氮气保护条件下，向50ml无水甲苯中依次加入(r)-2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(1.1g，6mmol)、2-羟基吡嗪(0.38g，4mmol)和三苯基膦(1.6g，6mmol)，温度降至0℃搅拌，逐滴滴加diad(1.2g，6mmol)的无水甲苯溶液，反应慢慢升至室温，29小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，向剩余物中加入10ml乙醚和10ml正己烷，过滤除去固体，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)得产物0.47g，产率45％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.30(d,1h,j＝1.1hz),8.12(d,1h,j＝2.8hz),7.98(m,1h),7.30(m,5h),5.42(m,1h),3.71(s,3h),3.28(m,2h).ms(esi)m/z259.0[m+h]+,281.0[m+na]+.
(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氧基)丙酸的制备
向5ml四氢呋喃中加入(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氧基)丙酸甲酯(0.47g，1.8mmol)，室温搅拌，加入9ml的1m氢氧化钠溶液，5小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，向剩余物中加入6m的hcl溶液酸化，利用乙醚萃取(3×5ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得白色固体0.39g，产率89％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.29(s,1h),8.12(s,1h),8.06(s,1h),7.31(m,5h),5.46(m,1h),3.32(m,2h).ms(esi)m/z245.0[m+h]+,266.9[m+na]+.
((r)-3-甲基-1-((s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氧基)丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-3)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氧基)丙酸(27mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，17小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，7小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝60：1)得黄色固体18mg，产率46％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ8.30(s,1h),8.17(t,1h,j＝2.6hz),8.10(m,1h),7.26(m,5h),5.72(m,1h),3.34(d,2h,j＝4.9hz),2.65(t,1h,j＝7.3hz),1.51(m,1h),1.24(t,2h,j＝7.1hz),0.83(d,6h,j＝6.7hz).ms(esi)m/z356.0[m-h]-,370.0[m+ch2-h]-,384.0[m+2ch2-h]-.。
实施例14：(s)-3-苯基-2-(苯氨基)丙酸的制备
在氮气保护条件下，向10ml无水n，n-二甲基乙酰胺中依次加入(s)-2-氨基-3-苯基丙酸(125mg，0.75mmol)、溴苯(80mg，0.5mmol)、碳酸钾(140mg，1mmol)和碘化亚铜(15mg，0.08mmol)，温度升至90℃搅拌，48小时后tlc检测显示反应完全，反应降至室温，加入5ml乙酸乙酯和1ml水，温度降至0℃，利用6m的hcl溶液调ph至3，分出有机相，水相利用乙酸乙酯萃取(3×10ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)得产物69mg，产率57％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ7.31(m,4h),7.20(t,3h,j＝6.3hz),6.84(t,1h,j＝7.2hz),6.65(d,2h,j＝5.2hz),4.30(m,1h),3.21(m,2h).ms(esi)m/z240.0[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-3-苯基-2-(苯氨基)丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-4)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-3-苯基-2-(苯氨基)丙酸(27mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，8小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，5小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝70：1)得白色固体14mg，产率36％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.28(m,7h),7.00(m,3h),4.43(m,1h),3.22(m,2h),2.69(t,1h,j＝6.6hz),1.24(m,1h),1.04(t,2h,j＝6.2hz),0.73(d,6h,j＝7.2hz).ms(esi)m/z353.0[m-h]-,367.0[m+ch2-h]-,380.9[m+2ch2-h]-.。
实施例15：(s)-2-(1-萘氨基)-3-苯基丙酸的制备
在氮气保护条件下，向50ml无水n，n-二甲基乙酰胺中依次加入(s)-2-氨基-3-苯基丙酸(1.2g，7.2mmol)、1-溴萘(1g，4.8mmol)、碳酸钾(1.3g，9.6mmol)和碘化亚铜(0.13g，0.7mmol)，温度升至90℃搅拌，48小时后tlc检测显示反应完全，反应降至室温，加入30ml乙酸乙酯和10ml水，温度降至0℃，利用6m的hcl溶液调ph至3，分出有机相，水相利用乙酸乙酯萃取(3×20ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)得产物0.7g，产率50％。1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ12.77(s,1h),8.25(m,1h),7.76(m,1h),7.29(m,8h),6.39(m,2h),4.26(d,1h,j＝0.7hz),3.26(m,2h).ms(esi)m/z289.8[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-2-(1-萘氨基)-3-苯基丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-5)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-(1-萘氨基)-3-苯基丙酸(32mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，16小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，7小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得白色固体12mg，产率27％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ8.10(d,1h,j＝7.9hz),7.92(m,1h),7.76(d,1h,j＝8.1hz),7.62(m,2h),7.35(m,6h),7.12(d,1h,j＝7.2hz),4.69(m,1h),3.55(m,2h),2.80(t,1h,j＝7.9hz),1.26(m,1h),0.98(t,2h,j＝7.2hz),0.66(d,6h,j＝7.4hz).ms(esi)m/z403.3[m-h]-,417.3[m+ch2-h]-,431.3[m+2ch2-h]-.。
实施例16：(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氨基)丙酸的制备
在氮气保护条件下，向50ml无水n，n-二甲基乙酰胺中依次加入(s)-2-氨基-3-苯基丙酸(1.6g，9.5mmol)、2-溴吡嗪(1g，6.3mmol)、碳酸钾(1.7g，12.6mmol)和碘化亚铜(0.2g，0.9mmol)，温度升至90℃搅拌，48小时后tlc检测显示反应完全，反应降至室温，加入30ml乙酸乙酯和10ml水，温度降至0℃，利用6m的hcl溶液调ph至3，分出有机相，水相利用乙酸乙酯萃取(3×20ml)，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)得产物0.7g，产率46％。1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ12.66(s,1h),7.99(d,1h,j＝1.4hz),7.87(m,1h),7.65(d,1h,j＝2.8hz),7.40(d,1h,j＝8.1hz),7.26(d,3h,j＝4.3hz),7.18(m,1h),4.55(m,1h),3.14(m,1h),2.96(m,1h).ms(esi)m/z242.0[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氨基)丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-6)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪氨基)丙酸(27mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，13小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，6小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得黄色固体12mg，产率31％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.99(s,1h),7.54(d,2h,j＝5.8hz),7.08(m,5h),3.98(m,1h),2.99(d,2h,j＝55.0hz),2.19(t,1h,j＝7.6hz),1.73(m,1h),1.62(t,2h,j＝5.7hz),0.94(d,6h,j＝6.1hz).ms(esi)m/z369.1[m+ch2-h]-,383.3[m+2ch2-h]-.。
实施例17：(s)-2-(苄氧基)-3-苯基丙酸甲酯的制备
向50ml二氯甲烷和50ml正己烷混合溶剂中加入(s)-2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(2.1g，11.5mmol)，室温搅拌，逐滴滴加2，2，2-三氯乙酰胺苄酯(3.5g，13.8mmol)，滴加完毕后，加入催化量的三氟甲磺酸，10小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝50：1)得产物1.3g，产率42％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ7.22(m,10h),4.67(d,1h,j＝11.9hz),4.37(d,1h,j＝11.9hz),4.14(m,1h),3.72(s,3h),3.06(m,2h).ms(esi)m/z271.2[m+h]+,293.2[m+na]+.
(s)-2-(苄氧基)-3-苯基丙酸的制备
向20ml二氧六环中加入(s)-2-(苄氧基)-3-苯基丙酸甲酯(1.3g，4.8mmol)，室温搅拌，加入24ml的2mhcl溶液，温度升至70℃，6小时后tlc检测显示反应完全，加入饱和食盐水，利用旋转蒸发仪除溶剂，水相利用乙酸乙酯萃取(3×10ml)，合并有机相，利用饱和碳酸氢钠溶液萃取(3×10ml)，合并水相，加入6m的hcl溶液调ph至1，利用乙酸乙酯萃取(3×20ml)，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得产物0.94g，产率76％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ7.23(m,10h),4.65(d,1h,j＝11.7hz),4.42(d,1h,j＝11.7hz),4.20(m,1h),3.12(m,2h).ms(esi)m/z255.1[m-h]-.
((r)-1-((s)-2-(苄氧基)-3-苯基丙酰胺基)-3-甲基丁基)硼酸(化合物i-7)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-(苄氧基)-3-苯基丙酸(28mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，14小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，5小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝80：1)得白色固体18mg，产率44％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.24(m,10h),4.57(m,1h),4.45(m,1h),4.32(d,1h,j＝1.3hz),3.06(m,2h),2.65(t,1h,j＝7.6hz),1.52(m,1h),1.39(t,2h,j＝7.7hz),0.86(d,6h,j＝5.5hz).ms(esi)m/z368.2[m-h]-,382.2[m+ch2-h]-,396.2[m+2ch2-h]-.。
实施例18：2，2，2-三氯乙酰胺(1-萘甲基)酯的制备
向50ml乙醚中加入1-萘甲醇(1.6g，10mmol)，室温搅拌，加入60％的氢化钠(0.8g，20mmol)，继续搅拌10分钟后，加入三氯乙腈(2.2g，15mmol)，2小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝100：1)得产物2g，产率66％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.50(s,1h),8.07(d,1h,j＝8.0hz),7.90(t,2h,j＝7.4hz),7.65(d,1h,j＝6.8hz),7.53(m,3h),5.79(s,2h).
(s)-2-(1-萘甲氧基)-3-苯基丙酸甲酯的制备
向50ml二氯甲烷和50ml正己烷混合溶剂中加入(s)-2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(1g，5.5mmol)，室温搅拌，逐滴滴加2，2，2-三氯乙酰胺(1-萘甲基)酯(2g，6.6mmol)，滴加完毕后，加入催化量的三氟甲磺酸，12小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂得产物0.7g，产率40％。反应产物未经纯化直接用于下步反应。
(s)-2-(1-萘甲氧基)-3-苯基丙酸的制备
向20ml二氧六环中加入(s)-2-(1-萘甲氧基)-3-苯基丙酸甲酯(0.7g，2.2mmol)，室温搅拌，加入26ml的2mhcl溶液，温度升至70℃，4小时后tlc检测显示反应完全，加入饱和食盐水，利用旋转蒸发仪除溶剂，水相利用乙酸乙酯萃取(3×10ml)，合并有机相，利用饱和碳酸氢钠溶液萃取(3×10ml)，合并水相，加入6m的hcl溶液调ph至1，利用乙酸乙酯萃取(3×20ml)，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得产物0.12g，产率18％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ7.45(m,12h),5.12(d,1h,j＝11.5hz),4.84(d,1h,j＝11.5hz),4.31(m,1h),3.12(m,2h).ms(esi)m/z305.1[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-2-(1-萘甲氧基)-3-苯基丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-8)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-(1-萘甲氧基)-3-苯基丙酸(34mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，14小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，5小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝100：1)得白色固体13mg，产率28％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.99(m,1h),7.85(t,2h,j＝8.8hz),7.35(m,9h),4.94(d,1h,j＝9.1hz),4.62(s,1h),4.42(m,1h),3.05(m,2h),2.59(t,1h,j＝5.6hz),1.60(m,1h),1.42(t,2h,j＝7.2hz),0.84(d,6h,j＝6.5hz).ms(esi)m/z418.2[m-h]-,432.2[m+ch2-h]-,446.2[m+2ch2-h]-.。
实施例19：2，2，2-三氯乙酰胺(2-吡嗪甲基)酯的制备
向5ml乙醚中加入2-羟甲基吡嗪(100mg，0.9mmol)，室温搅拌，加入60％的氢化钠(80mg，2mmol)，继续搅拌10分钟后，加入三氯乙腈(202mg，1.4mmol)，2小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)得产物160mg，产率70％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.79(s,1h),8.56(m,2h),5.51(s,2h).ms(esi)m/z255.0[m+h]+.
(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪甲氧基)丙酸甲酯的制备
向5ml二氯甲烷和5ml正己烷混合溶剂中加入(s)-2-羟基-3-苯基丙酸甲酯(180mg，1mmol)，室温搅拌，逐滴滴加2，2，2-三氯乙酰胺(2-吡嗪甲基)酯(316mg，1.2mmol)，滴加完毕后，加入催化量的三氟甲磺酸，12小时后tlc检测显示反应完全，利用旋转蒸发仪除溶剂得产物156mg，产率57％。反应产物未经纯化直接用于下步反应。
(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪甲氧基)丙酸的制备
向5ml二氧六环中加入(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪甲氧基)丙酸甲酯(156mg，0.57mmol)，室温搅拌，加入6ml的2mhcl溶液，温度升至70℃，3小时后tlc检测显示反应完全，加入饱和食盐水，利用旋转蒸发仪除溶剂，水相利用乙酸乙酯萃取(3×5ml)，合并有机相，利用饱和碳酸氢钠溶液萃取(3×5ml)，合并水相，加入6m的hcl溶液调ph至1，利用乙酸乙酯萃取(3×5ml)，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂得产物36mg，产率24％。1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.56(m,5h),7.85(s,1h),7.31(d,2h,j＝6.0hz),4.85(s,1h),4.25(d,1h,j＝14.1hz),4.07(d,1h,j＝14.1hz),3.24(m,2h).
((r)-3-甲基-1-((s)-3-苯基-2-(2-吡嗪甲氧基)丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-9)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-3-苯基-2-(2-吡嗪甲氧基)丙酸(28mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，20小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，7小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝30：1)得黄色固体12mg，产率29％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ8.60(t,2h,j＝34.3hz),8.02(d,1h,j＝7.9hz),7.61(m,6h),4.39(d,1h,j＝13.7hz),4.22(d,1h,j＝14.1hz),3.72(m,1h),3.20(m,2h),2.91(t,1h,j＝12.9hz),2.02(m,1h),1.56(t,2h,j＝7.2hz),0.94(d,6h,j＝24.5hz).ms(esi)m/z370.1[m-h]-,398.2[m+2ch2-h]-.。
实施例20：(s)-2-(苄氨基)-3-苯基丙酸的制备
向10ml水中加入(s)-2-氨基-3-苯基丙酸(165mg，1mmol)，室温搅拌，依次加入苄氯(158mg，1.3mmol)和碳酸钾(138mg，1mmol)，1小时后再加入苄氯(158mg，1.3mmol)和碳酸钾(138mg，1mmol)，24小时后tlc检测显示反应完全，过滤并用乙醚洗涤，滤饼利用6m的hcl溶液酸化，出现大量白色固体，过滤得到产物201mg，产率79％。1hnmr(d2o-naoh,400mhz)δ7.05(m,10h),3.48(d,1h,j＝12.7hz),3.30(d,1h,j＝12.8hz),3.07(t,1h,j＝6.8hz),2.63(m,2h).ms(esi)m/z254.1[m-h]-.
((r)-((s)-2-(苄氨基)-3-苯基丙酰胺基)-3-甲基丁基)硼酸(化合物i-10)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-(苄氨基)-3-苯基丙酸(28mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，10小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，3小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得白色固体11mg，产率27％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.23(m,10h),3.72(d,1h,j＝13.1hz),3.62(d,1h,j＝6.8hz),3.37(t,1h,j＝6.9hz),3.11(m,2h),2.90(t,1h,j＝9.9hz),2.03(m,1h),1.59(t,2h,j＝8.2hz),0.85(d,6h,j＝13.5hz).ms(esi)m/z367.1[m-h]-,395.3[m+2ch2-h]-.。
实施例21：(s)-2-((1-萘甲基)氨基)-3-苯基丙酸的制备
向50ml水中加入(s)-2-氨基-3-苯基丙酸(1g，6mmol)，室温搅拌，依次加入1-氯甲基萘(1.3g，7.5mmol)和碳酸钾(0.9g，6mmol)，1小时后再加入1-氯甲基萘(1.3g，7.5mmol)和碳酸钾(0.9g，6mmol)，30小时后tlc检测显示反应完全，过滤并用乙醚洗涤，滤饼利用6m的hcl溶液酸化，出现大量白色固体，过滤得到产物0.69g，产率38％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.60(m,12h),4.75(d,1h,j＝13.2hz),4.59(d,1h,j＝13.7hz),4.09(m,1h),3.24(m,2h).ms(esi)m/z306.2[m+h]+.
((r)-3-甲基-1-((s)-2-((1-萘甲基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-11)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-2-((1-萘甲基)氨基)-3-苯基丙酸(34mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，15小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，5小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得白色固体13mg，产率28％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ7.53(m,12h),4.15(m,2h),3.72(m,1h),3.02(d,2h,j＝7.2hz),2.61(t,1h,j＝7.4hz),1.48(m,1h),1.08(t,2h,j＝6.9hz),0.83(d,6h,j＝7.5hz).ms(esi)m/z417.2[m-h]-,431.2[m+ch2-h]-,445.3[m+2ch2-h]-.。
实施例22：(s)-3-苯基-2-((2-吡嗪甲基)氨基)丙酸的制备
向5ml水中加入(s)-2-氨基-3-苯基丙酸(83mg，0.5mmol)，室温搅拌，依次加入2-氯甲基吡嗪(75mg，0.6mmol)和碳酸钾(69mg，0.5mmol)，1小时后再加入2-氯甲基吡嗪(75mg，0.6mmol)和碳酸钾(69mg，0.5mmol)，26小时后tlc检测显示反应完全，过滤并用乙醚洗涤，滤饼利用6m的hcl溶液酸化，出现大量淡黄色固体，过滤得到产物103mg，产率80％。1hnmr(d2o–naoh,400mhz)δ8.08(m,3h),6.86(m,5h),3.49(d,1h,j＝14.4hz),3.33(d,1h,j＝14.6hz),2.90(m,1h),2.48(m,2h).ms(esi)m/z256.0[m-h]-.
((r)-3-甲基-1-((s)-3-苯基-2-((2-吡嗪甲基)氨基)丙酰胺基)丁基)硼酸(化合物i-12)的制备
在氮气保护条件下，向5ml无水二氯甲烷中加入(s)-3-苯基-2-((2-吡嗪甲基)氨基)丙酸(28mg，0.11mmol)，室温搅拌，加入hobt(18mg，0.13mmol)，继续搅拌10分钟后加入edc·hcl(25mg，0.13mmol)，然后加入实施例6化合物iii-8-a(50mg，0.17mmol)和dipea(0.04ml，0.22mmol)，17小时后tlc检测显示反应完全，反应液分别用5％nahco3溶液、10％柠檬酸溶液、5％nahco3溶液和饱和食盐水洗涤，向有机相中加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，所得产物直接加入到5ml甲醇中，室温搅拌，加入2-甲基丙基硼酸(22mg，0.22mmol)和5ml正己烷，然后加入1m的hcl溶液(0.33ml，0.33mmol)，6小时后tlc检测显示反应完全，静置反应液至分层，下层用正己烷洗涤，加入无水硫酸钠干燥，干燥完毕后过滤，利用旋转蒸发仪除溶剂，柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得黄色固体11mg，产率27％。1hnmr(cd3od,400mhz)δ8.09(s,1h),7.21(s,1h),6.95(s,1h),6.13(m,5h),4.04(d,1h,j＝13.4hz),3.81(d,1h,j＝3.2hz),3.54(m,1h),3.15(m,2h),2.80(t,1h,j＝8.9hz),2.02(m,1h),1.58(t,2h,j＝10.2hz),0.89(d,6h,j＝7.3hz).ms(esi)m/z369.0[m-h]-,397.0[m+2ch2-h]-.。
实施例23：本发明化合物蛋白酶体抑制活性的测定实验
本实施例中采用购自chemicon(chemicon,usa)的20s蛋白酶体试剂盒进行测试。该测试方法的基本原理为20s蛋白酶体水解荧光底物suc-llvy-amc(suc-leu-leu-val-tyr-amc，suc为琥珀酰基，amc为7-酰胺-4-甲基香豆素)，释放出具有荧光的amc，通过改变待测试化合物的浓度，利用spectramaxm5酶标仪(380nm/460nm)测得不同浓度下释放出amc的荧光值，从而判断化合物对20s蛋白酶体糜蛋白酶样活性位点(ct-l)的抑制程度，利用graphpadprism软件计算化合物对20s蛋白酶体糜蛋白酶样活性位点抑制的ic50值；表1现示了部分化合物对20s蛋白酶体糜蛋白酶样活性位点抑制的ic50值如。
表1.受试化合物对人类20s蛋白酶体糜蛋白酶样活性位点的抑制作用
·ic50值为至少两次独立试验的平均值。