板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺的制作方法

文档序号:11124264阅读:469来源:国知局

本发明涉及一种板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺。



背景技术:

近年来,SARS、禽流感、以及甲型H1N1流感病毒在我国乃至世界范围频繁爆发,对人的生命安全和社会经济造成极大损害。

长期以来,人们通过疫苗来预防病毒,且取得了良好效果,但疫苗只有与病毒亚型相配时才会有效。病毒变异快且爆发具有不可预测性,而疫苗研究和生产相对滞后。

针对疫苗的这种弊端,人们开始广泛研究抗病毒药物,以此来对抗病毒。西药抗病毒药物具有见效快、疗效高、作用准确等特点,但每类药物均具有针对性,只针对某种特定的病毒起作用,因病毒抗原易变异性因素,导致一些制作抗病毒药物的化学药物的应用也有一定局限性。许多中药具有抑制病毒复制、阻止病毒致细胞病变等功效,中药通过调节免疫功能、改善肺循环、镇痛抗炎等综合作用,进而抑制或者杀灭病毒,具有良好的防治病毒的作用。

从传统中药中充分挖掘和寻找抗病毒活性物质也是近年研究的热点之一。板蓝根具有可靠的抗病毒作用,为家庭常备药物。板蓝根为十字花科植物菘蓝(Isatis indigotica)的干燥根,具有清热解毒、凉血利咽之功效,常用于治疗流感、腮腺炎、温病发热、流行性乙型脑炎、肝炎等病毒感染性疾病。板蓝根成分复杂,其物质基础和作用机制的不明确,生产工艺仍然比较落后。因此,需要对板蓝根中的具有抗病毒效用的植物蛋白的提取工艺进行进一步地研究,以扩大对板蓝根中的植物蛋白的应用。



技术实现要素:

针对上述技术问题,本发明设计开发了一种提取效率更高的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺。

本发明提供的技术方案为:

一种板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺,包括:

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为300~350μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10~15倍,在50~60℃下浸泡5~6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40~45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000~4000rpm下离心处理3~5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2~3倍,之后再置于4500~5500rpm下离心处理20~25分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为4~6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤一中,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤二中,向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5~6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40~45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000~4000rpm下离心处理3~5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500~5500rpm下离心处理20~25分钟。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤二中,向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000~4000rpm下离心处理3~5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500~5500rpm下离心处理20~25分钟。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤二中,向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤五中,用阳离子交换树脂对处理初级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,再用PH值为8~9的氨水对阳离子交换树脂进行洗脱,将水洗脱以及氨水洗脱的洗脱液都留存下来,进行冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

本发明所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺通过精确设计提取工艺,所提取的植物蛋白在提纯物的质量百分比在94%以上,提高了植物蛋白的提取效率,有助于扩大其在抗病毒方面的应用性。

具体实施方式

下面对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

本发明提供一种板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺,包括:

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为300~350μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10~15倍,浸泡5~6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40~45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000~4000rpm下离心处理3~5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2~3倍,之后再置于4500~5500rpm下离心处理20~25分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为4~6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

本发明所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺通过精确设计提取工艺,所提取的植物蛋白在提纯物的质量百分比在94%以上,提高了植物蛋白的提取效率,有助于扩大其在抗病毒方面的应用性。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤一中,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤二中,向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5~6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40~45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000~4000rpm下离心处理3~5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500~5500rpm下离心处理20~25分钟。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤二中,向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000~4000rpm下离心处理3~5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500~5500rpm下离心处理20~25分钟。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤二中,向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟。

优选的是,所述的板蓝根植物蛋白的高纯度制备工艺中,所述步骤五中,用阳离子交换树脂对处理初级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,再用PH值为8~9的氨水对阳离子交换树脂进行洗脱,将水洗脱以及氨水洗脱的洗脱液都留存下来,进行冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

实施例一

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为300~310μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.3%。

实施例二

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为300~320μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的15倍,浸泡6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在4000rpm下离心处理5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的3倍,之后再置于5500rpm下离心处理25分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为4,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.3%。

实施例三

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为340~350μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的15倍,浸泡6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在42℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在4000rpm下离心处理5分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的3倍,之后再置于5500rpm下离心处理25分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.8%。

实施例四

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.8%。

实施例五

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~325μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5.5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在40℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.8%。

实施例六

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3500rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理22分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为4,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.6%。

实施例七

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在45℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的3倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为4,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.8%。

实施例八

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在44℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4550rpm下离心处理24分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.7%。

实施例九

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为310~320μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡6小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在42℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的3倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为6,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.6%。

实施例十

步骤一、将板蓝根药材先用水浸泡24小时,之后将板蓝根药材晾干,将板蓝根药材粉碎成粒径为320~330μm的板蓝根颗粒;

步骤二、向板蓝根颗粒中加入水,水的加入量为板蓝根颗粒的10倍,浸泡5小时,在浸泡过程中,在前面的4小时之内,控制水温保持在43℃,在剩余时间内,控制水温保持在50℃,之后在3000rpm下离心处理3分钟,然后再补充水,补充的水量为板蓝根颗粒的2倍,之后再置于4500rpm下离心处理20分钟;

步骤三、取上清液,将上清液与所述步骤一得到浸泡板蓝根药材得到的浸渍水混合,超滤,取滤液,冷冻干燥,得到粗蛋白;

步骤四、将粗蛋白用温度为55℃的水溶解,调节至pH值为4,得到初级粗蛋白溶液,将初级粗蛋白溶液冷冻干燥,再用温度为60℃的水溶解,得到二级粗蛋白溶液;

步骤五、用阳离子交换树脂对处理二级粗蛋白溶液,用水反复洗脱,留取洗脱液冷冻干燥,得到精制的板蓝根植物蛋白。

最终,植物蛋白在提纯物中所占的质量百分比为95.9%。

对比例

采用现有工艺对板蓝根植物蛋白进行提取,植物蛋白在提纯物中的质量百分比仅占到87%。

尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节。

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