衣物洗涤方法,DNA酶和洗涤剂组合物的用途与流程

文档序号:13426302

本申请含有计算机可读形式的序列表,将其通过引用结合在此。

发明领域

本发明涉及用于洗涤纺织品的方法,具有DNA酶活性的多肽和包含具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽的洗涤剂组合物的用途。

发明背景

漂白系统存在于某些洗涤剂中以漂白特殊污渍(如红酒、茶、咖啡、水果汁、草、胡萝卜、或番茄酱),无论是在衣服或餐饮具上。漂白系统还帮助保持衣服(特别是白色的)的白度和亮度。光学增亮剂覆盖纺织品并将UV转化为蓝色或黄色光谱中的可见光,并且结果是隐藏了例如纺织品的灰色和变色。

然而,在储存期间许多漂白化合物与其他洗涤剂成分(特别是与酶)的相容性差。避免这个问题的一种方法是在酶已经被允许起作用一段时间之后再添加漂白化合物,例如如在国际专利申请WO 2012/028482中描述的。

为了漂白化合物以真正漂白纺织品,重要的是该表面是均匀干净的,以便该漂白化合物暴露于纺织品的整个表面。

弄脏的纺织品能够以不同的效率不同地吸收光学增亮剂,并且从而也给纺织品带来斑驳的外观。

本发明解决了现有技术的问题。



技术实现要素:

本发明涉及一种用于洗涤纺织品的方法,该方法包括以下步骤:

a)将纺织品与洗液接触,该洗液包含具有DNA酶活性的多肽、阴离子表面活性剂、包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统、以及任选地光学增亮剂;并且

b)任选地冲洗该纺织品,

其中该洗液具有在10℃-60℃范围内的温度。

本发明进一步涉及具有DNA酶活性的多肽用于制备用于接受包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统的纺织品表面的用途。进一步要求保护的是一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包含具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽、阴离子表面活性剂、和包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统。

定义

细菌的:在本发明的上下文中,术语关于多肽(如酶,例如,DNA酶)的“细菌的”是指由细菌基因组编码并且因此可直接从细菌基因组衍生的多肽,其中这种细菌未经过遗传修饰来编码所述多肽,例如,通过重组DNA技术将编码序列引入基因组中。因此,在本发明的上下文中,术语“细菌DNA酶”或“获得自细菌来源的具有DNA酶活性的多肽”或“细菌来源的多肽”是指由细菌物种的基因组编码并且因此可直接从细菌物种的基因组衍生的DNA酶,其中该细菌物种未经受遗传修饰引入编码所述DNA酶的重组DNA。因此,编码具有DNA酶活性的细菌多肽的核苷酸序列是天然在细菌物种遗传背景中的序列。由此类序列编码的具有DNA酶活性的细菌多肽也可以是指野生型DNA酶(或亲本DNA酶)。在另一个方面,本发明提供了具有DNA酶活性的多肽,其中所述多肽与细菌DNA酶基本上同源。在本发明的上下文中,术语“基本上同源”表示具有DNA酶活性的多肽,该多肽与所选择的细菌DNA酶的氨基酸序列具有至少80%,优选地至少85%,更优选地至少90%,更优选地至少95%,甚至更优选地至少96%、97%、98%,以及最优选地至少99%的一致性。

生物膜:生物膜是其中细胞彼此粘附在一起或粘附至表面(如纺织品、餐具或硬表面)或另一种表面的任何群组的微生物。这些粘附细胞经常包埋在细胞外高聚物(EPS)的自身产生的基质内。生物膜EPS是一般由细胞外的DNA、蛋白、和多糖组成的聚合物团块。生物膜可以形成在活的或非活的表面上。在生物膜中生长的微生物细胞与同一有机体的浮游细胞(相比之下,浮游细胞是可以在液体培养基中漂浮或浮游的单个细胞)在生理上是不同的。

生活在生物膜中的细菌通常与同一物种的浮游细菌具有显著不同的特性,因为膜的密集并且受保护的环境允许它们以不同方式协作和相互作用。这一环境的一个益处是增加对洗涤剂和抗生素的抗性,因为,密集的细胞外基质和细胞的外层保护群落的内部。

在衣物上,会发现产生生物膜的细菌是在以下物种中:不动杆菌属物种、气微菌属物种、短波单胞菌属物种、微杆菌属物种、滕黄微球菌、假单胞菌属物种、表皮葡萄球菌、和寡养单胞菌属物种。

色差(L值):Lab色彩空间是针对明度具有尺寸L的色彩对立空间。L值,L*代表在L*=0下的最暗的黑色,并且为在L*=100下的最亮的白色。在本发明的上下文中,L值还称为色差。

编码序列:术语“编码序列”意指直接指定多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由开放阅读框架决定,该开放阅读框架以起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可以是基因组DNA、cDNA、合成DNA或其组合。

洗涤剂组分:在此将术语“洗涤剂组分”定义为意指可以用于洗涤剂组合物中的化学品的类型。洗涤剂组分的实例是碱、表面活性剂、助水溶剂、助洗剂、共助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调色剂、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂、香料、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、污物释放聚合物、抗再沉积剂、酶抑制剂或稳定剂、酶活化剂、抗氧化剂以及增溶剂。

洗涤剂组合物:术语“洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的物品(如纺织品)去除不希望的化合物的组合物。该洗涤剂组合物可以用于例如清洁纺织品,用于家用清洁和工业清洁二者。这些术语涵盖选择用于希望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如,液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物,并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如,液体和/或固体衣物洗涤剂和精细织物洗涤剂;织物清新剂;织物柔软剂;以及纺织品和衣物预去污剂/预处理)。除了含有本发明的酶之外,该洗涤剂配制品还可以含有一种或多种另外的酶(如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶以及甘露聚糖酶,或其任何混合物),和/或洗涤剂组分,如表面活性剂、助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶活化剂、转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂以及增溶剂。

DNA酶:术语“DNA酶”意指具有DNA酶活性的多肽,该多肽催化DNA主链中的磷酸二酯键的水解断裂,从而降解DNA。出于本发明的目的,根据测定I中所描述的程序确定DNA酶活性。在本发明的一个实施例中,参照SEQ ID NO:1的成熟多肽的DNA酶活性,多肽的DNA酶活性是至少105%,例如至少110%、至少120%、至少130%、至少140%、至少160%、至少170%、至少180%、或至少200%,该多肽具有包含SEQ ID NO:2中所阐明的序列或由其组成的多肽,包含SEQ ID NO:3中所阐明的序列或由其组成的多肽,包含SEQ ID NO:4的成熟多肽或由其组成的多肽,包含SEQ ID NO:5的成熟多肽或由其组成的多肽或包含SEQ ID NO:6的成熟多肽或由其组成的多肽。

酶洗涤益处:在此将术语“酶洗涤益处”定义为与不含酶的洗涤剂相比,该酶赋予相同洗涤剂的有利效果。可能由酶提供的重要洗涤益处是污渍去除伴随在洗涤和/或清洁之后无可见污物或污物非常少、阻止或减少在洗涤过程中释放的污物再沉积(又称作抗再沉积的作用)、完全或部分地恢复纺织品的白度(又称作增白的作用),其中所述纺织品最初是白色的,但是在反复使用和洗涤后获得淡灰或淡黄色外观。不直接与污物的催化污渍去除或其再沉积的阻止相关的纺织品护理益处对于酶洗涤益处而言也是重要的。这类纺织品护理益处的实例是阻止或减少染料从一种织物转移至另一种织物或相同织物的另一个部分(又称作染料转移抑制或抗回染的作用)、去除来自织物表面的突出或破损纤维以降低起球趋势或去除已经存在的毛球或绒毛(又称作抗起球的作用)、改进织物柔软度、织物的颜色澄清和去除在织物或衣服的纤维中夹带的颗粒状污物。酶漂白是一种另外的酶洗涤益处,其中通常将催化活性用于催化漂白组分(如过氧化氢或其他过氧化物)的形成。

真菌的:在本发明的上下文中,术语关于多肽(如酶,例如,DNA酶)的“真菌的”是指由真菌基因组编码并且因此可直接从真菌基因组衍生的多肽,其中这种真菌未经过遗传修饰来编码所述多肽,例如,通过重组DNA技术将编码序列引入基因组中。因此,在本发明的上下文中,术语“真菌DNA酶”或“获得自真菌来源的具有DNA酶活性的多肽”或“真菌来源的多肽”是指由真菌物种的基因组编码并且因此可直接从真菌物种的基因组衍生的DNA酶,其中该真菌物种未经受通过引入编码所述DNA酶的重组DNA进行的遗传修饰。因此,编码具有DNA酶活性的真菌多肽的核苷酸序列是天然在真菌物种遗传背景中的序列。由此类序列编码的具有DNA酶活性的真菌多肽也可以是指野生型DNA酶(或亲本DNA酶)。在另一个方面,本发明提供了具有DNA酶活性的多肽,其中所述多肽与真菌DNA酶基本上同源。在本发明的上下文中,术语“基本上同源”表示一种具有DNA酶活性的多肽,该多肽与所选择的真菌DNA酶的氨基酸序列具有至少80%,优选地至少85%,更优选地至少90%,更优选地至少95%,甚至更优选地至少96%、97%、98%,以及最优选地至少99%的一致性。

硬表面:在此将术语“硬表面”定义为硬表面,该硬表面包括地板、桌子、墙壁、屋顶等,连同硬物体的表面,如汽车(汽车洗涤)和餐具(餐具洗涤)。餐具包括但不限于,盘子、杯子、玻璃杯、碗、用餐工具(如匙、刀、叉)、上菜用具、陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯。

宿主细胞:术语“宿主细胞”意指易于用包含本发明的多核苷酸的核酸构建体或表达载体进行转化、转染、转导等的任何细胞类型。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间发生的突变而与亲本细胞不同的亲本细胞的任何后代。

分离的:术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质;(2)至少部分地从一个或多个或所有与它在自然界中相关的天然存在的成分中除去的任何物质,包括但不限于,任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子;(3)相对于在自然界中发现的物质经过人工修饰的任何物质;或(4)相对于与它天然相关联的其他组分通过增加该物质的量(例如,在宿主细胞中的重组生产;编码该物质的基因的多个拷贝;以及使用比与编码该物质的基因天然相关联的启动子更强的启动子)而修饰的任何物质。分离的物质可以存在于发酵液样品中,例如,可以将宿主细胞进行遗传修饰来表达本发明多肽。来自宿主细胞的发酵液将包含分离的多肽。

洗涤:术语“洗涤”涉及家用洗涤和工业洗涤两者并且意指用一种含有本发明的清洁或洗涤剂组合物的溶液处理纺织品的过程。洗涤过程可以例如使用例如家用或工业洗涤机进行或可以手动进行。

成熟多肽:术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N-末端加工、C-末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。在一个实施例中,成熟多肽是SEQ ID NO:1的氨基酸38至243,并且SEQ ID NO:1的氨基酸1至22是信号肽,并且SEQ ID NO:1的氨基酸23至37是前肽。本领域已知,宿主细胞可以产生由同一多核苷酸表达的两种或更多种不同成熟多肽(即,具有不同C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。本领域还已知,不同的宿主细胞不同地加工多肽,并且因此一个表达多核苷酸的宿主细胞当与另一个表达相同多核苷酸的宿主细胞相比时可以产生不同的成熟多肽(例如,具有不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)。在一个实施例中,成熟多肽含有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2(例如SEQ ID NO:1的氨基酸38至243或SEQ ID NO:2的氨基酸1至206或SEQ ID NO:3的氨基酸1至204)中所阐明的序列的高达206个(如204个)连续氨基酸残基,或高达204个氨基酸残基(例如,SEQ ID NO:1的氨基酸40至243)。在另一个实施例中,该成熟多肽由SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3中所阐明的氨基酸序列组成。在又另一个实施例中,该成熟多肽包含SEQ ID NO:4的连续氨基酸残基18至205或由其组成。在一个实施例中,该成熟多肽包含SEQ ID NO:5的连续氨基酸残基34至142或由其组成。在一个实施例中,该成熟多肽包含SEQ ID NO:6的连续氨基酸残基27至136或由其组成。

核酸构建体:术语“核酸构建体”意指单-链或双-链的核酸分子,该核酸分子是从天然存在的基因中分离的,或以本来不存在于自然界中的方式被修饰成含有核酸的区段,或是合成的,该核酸分子包含一个或多个控制序列。

纺织品:术语“纺织品”意指任何纺织品材料,这些任何纺织品材料包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织物材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料,这些材料制造的织物和由这些织物制成的产品(例如衣服和其他物品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是纤维素基的,如天然纤维素,包括棉布、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或者人造纤维素(例如,来源于木浆),包括纤维胶/人造丝、乙酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以不基于纤维素,如天然聚酰胺,包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及基于纤维素和不基于纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉布和/或人造丝/纤维胶与一种或多种伴随材料的共混物,该伴随材料如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如人造丝/纤维胶、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、乙酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物,例如玷污的家居衣物。当使用术语织物或衣服时,旨在也包括广义术语纺织品。在本发明的上下文中,术语“纺织品”还包括织物。

变体:术语“变体”意指在一个或多个(例如,若干个)位置处包含改变(即,取代、插入和/或缺失)的与亲本酶具有相同活性的多肽。取代意指占据一个位置的氨基酸由不同的氨基酸代替;缺失意指去除占据一个位置的氨基酸;以及插入意指在占据一个位置的氨基酸的毗邻处和紧邻处添加一个氨基酸。在本发明的上下文中,所鉴别的DNA酶的变体具有亲本的酶活性,即,催化DNA主链中的磷酸二酯键水解断裂的能力(脱氧核糖核酸酶活性)。在一个实施例中,参照亲本DNA酶,变体的脱氧核糖核酸酶活性是增加的,例如具有脱氧核糖核酸酶活性的多肽的成熟多肽选自下组,该组由以下各项组成:包含SEQ ID NO:1的成熟多肽或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:2中所阐明的序列或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:3中所阐明的序列或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:4的成熟多肽或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:5的成熟多肽或由其组成的多肽或包含SEQ ID NO:6的成熟多肽或由其组成的多肽。

洗涤周期:在此将术语“洗涤周期”定义为一个洗涤操作,其中将纺织品浸泡在洗液中,将某种机械作用施加至该纺织品,以释放污渍,并且协助洗液流进和流出该纺织品,并且最终去除多余的洗液。在一个或多个洗涤周期后,总体上对该纺织品进行冲洗和干燥。

洗液:术语“洗液”旨在意指任选地包括用于洗涤纺织品的酶的水和洗涤剂的溶液或混合物。

具体实施方式

诸位发明人令人惊讶的发现,在不使多肽受漂白系统的不利影响的情况下,用包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统洗涤的同时,用具有DNA酶活性的酶洗涤是可能的。本发明的一些方面涉及包含DNA酶和漂白系统(例如包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS))的洗涤剂组合物。

本发明的一些方面涉及包含光学增亮剂(荧光增白剂)的洗涤剂组合物。光学增亮剂、光学增亮试剂(OBA)、荧光增亮试剂(FBA)或荧光增白剂(FWA)吸收UV光和紫色区域的光并在蓝色区域再发光。术语“光学增亮剂”在衣物洗涤剂领域具有其一般意义,并包括光学增亮剂、光学增亮试剂(OBA)、荧光增亮剂(FBA)和荧光增白剂(FWA)。光学增亮剂以使织物看起来白的方式反射光,例如通过减少纺织品的淡黄色外观。用含有光学增亮剂的洗涤剂洗涤的纺织品在纺织品上沉积使其看起来更白的反光颗粒。使用光学增亮剂的一个问题是其优选均匀的表面以获得最佳性能。用本发明的DNA酶多肽洗涤的纺织品具有以下优势,与没有用DNA酶洗涤的纺织品比较具有更均匀的表面。因此,DNA酶和光学增亮剂的组合是特别有利的,因为DNA酶对光学增亮剂的性能具有积极的作用。在本发明的一些方面,这些DNA酶与光学增亮剂具有协同作用,例如与光学增亮剂在不包含DNA酶的组合物中的作用相比,光学增亮剂在包含至少一种DNA酶的组合物中的作用是协同的。使用DNA酶与光学增亮剂的组合的一个优势是DNA酶与光学增亮剂组合用于处理表面(如纺织品)的作用(例如协同作用)允许消费者使用较少的光学增亮剂并同时简单地通过增加光学增亮剂的作用保持纺织品白色。因此,本发明的一些方面涉及DNA酶用于制备用于应用光学增亮剂的表面的用途,其中该表面是纺织品。本发明的一些方面涉及洗涤的方法,该方法包括以下步骤:

a)将纺织品与洗涤剂组合物接触,该洗涤剂组合物包含具有DNA酶活性的多肽、任选地阴离子表面活性剂、任选地漂白系统(例如四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS))和光学增亮剂;并且

b)任选地冲洗该纺织品。

本发明的一些方面进一步涉及包含具有DNA酶活性的多肽和至少一种光学增亮剂的洗涤剂组合物,任选地该洗涤剂可以包含表面活性剂(如阴离子表面活性剂)和/或任选地漂白系统(例如四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS))。

优选地,洗涤剂中的光学增亮剂的浓度是在约0.01%至约0.5%的水平。适合在本发明洗涤剂组合物中使用的任何光学增亮剂和/或荧光增白剂可以被用于本发明的组合物中。一些优选的荧光增白剂是属于以下类别的那些:二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和双苯基-二苯乙烯衍生物。一些优选的二氨芪-磺酸衍生物型的荧光增白剂包括以下各项的钠盐:4,4'-双-(2-二乙醇氨基-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟基-乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(4-苯基-1,2,3-三唑-2-基)芪-2,2'-二磺酸盐以及5-(2H-萘并[1,2-d][1,2,3]三唑-2-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]苯磺酸钠。优选的荧光增白剂是可从汽巴-嘉基股份有限公司(Ciba-Geigy AG)(巴塞尔,瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝CBS。天来宝DMS是4,4'-双-(2-吗啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐的二钠盐。天来宝CBS是2,2'-双-(苯基-苯乙烯基)-二磺酸盐的二钠盐。还优选荧光增白剂,是可商购的Parawhite KX,由派拉蒙矿物与化学(Paramount Minerals and Chemicals),孟买,印度供应。适合在本发明中使用的其他荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉和7-烷氨基香豆素。适合的荧光增亮剂水平包括洗涤剂的总wt%的从约0.01wt%、从0.05wt%、从约0.1wt%或甚至从约0.2wt%的较低水平至0.5wt%或甚至0.75wt%的较高水平。

诸位发明人已经发现,在方法中,洗涤纺织品包括如下步骤:

a)将纺织品与洗液接触,该洗液包含具有DNA酶活性的多肽、阴离子表面活性剂和包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统;并且

b)任选地冲洗该纺织品,其中该洗液具有在10℃-60℃范围的温度。

该纺织品比没用多肽、表面活性剂和漂白系统的组合物洗涤时变得更干净。

可以将该纺织品用水或用包含调节剂的水进行冲洗。

在洗涤过程中洗液的温度是重要的。诸位发明人已经发现,当温度低于60℃时发现漂白作用。诸位发明人已经发现,当根据本发明的方法用具有DNA酶活性的多肽、阴离子表面活性剂和漂白系统的组合物洗涤纺织品时,然后该洗涤的纺织品比用传统洗涤方法洗涤的更干净。因此,诸位发明人已经发现,具有DNA酶活性的多肽的活性不受漂白系统(包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS))的存在影响,即使在高浓度的漂白系统下。

在本发明的一个实施例中,洗液的温度是在10℃-50℃的范围内、在10℃-45℃的范围内、在10℃-40℃的范围内、在10℃-35℃的范围内、在10℃-30℃的范围内、在10℃-25℃的范围内或在10℃-20℃的范围内。

当在传统的洗涤剂组合物中使用漂白系统时,纺织品的所有区域不是以相同的程度暴露于漂白系统。因此,一些纺织品区域可能比其他区域看起来没那么白,其中该漂白系统可以自由进入以作用于纺织品上。

诸位发明人惊讶地发现具有DNA酶活性的多肽可以被用于制备用于接受包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统的纺织品表面。当使用具有DNA酶活性的多肽时,该纺织品表面被均匀地清洁并准备好暴露于漂白剂。因此,将具有DNA酶活性的多肽与漂白系统一起使用,该纺织品更干净。在洗涤过程中,可以将该纺织品暴露于具有DNA酶活性的多肽和漂白系统。在本发明的一个实施例中,在第一洗涤过程中可以将该纺织品暴露于具有DNA酶活性的多肽,并在随后的洗涤过程中暴露于漂白系统,任选地与具有DNA酶活性的多肽一起。

本发明进一步涉及一种洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包含具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽、阴离子表面活性剂、和包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统。

在本发明的优选的实施例中,该漂白系统包含四乙酰乙二胺(TAED)和过碳酸盐。

在洗液或在洗涤剂组合物中的过碳酸盐的浓度是四乙酰乙二胺(TAED)的浓度的约五倍。

在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是重要的。在本发明的一个实施例中,该比例高于1:5。在一个实施例中,该比例是在从1:5.5至1:10、从1:6至1:10、从1:6.1至1:10、从1:6.2至1:10、从1:6.3至1:10、从1:6.3至1:8、从1:6.3至1:7或从1:6.3至1:6.8的范围内。在优选的实施例中,在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是1:6.3。

该洗涤剂组合物或该洗液进一步包含不是磷酸盐助洗剂的助洗剂,因为磷酸盐助洗剂对环境具有负面影响。该助洗剂选自碳酸钠、硅酸钠、沸石和柠檬酸钠。

在洗涤方法和在洗涤剂组合物中使用的阴离子表面活性剂选自下组,该组由以下各项组成:硫酸盐和磺酸盐,如直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。

在优选的实施例中,该洗涤剂组合物包含选自下组的表面活性剂,该组由以下各项组成:直链烷基苯磺酸盐(LAS)、α-烯烃磺酸盐(AOS)和烷基硫酸盐(AS)。

该洗涤剂组合物或该洗液可以进一步包含一种或多种选自下组的酶,该组由以下各项组成:半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

在洗液中具有DNA酶活性的多肽的浓度典型地是在0.00004ppm-100ppm酶蛋白的范围内,如在0.00008ppm-100ppm的范围内、在0.0001ppm-100ppm的范围内、在0.0002ppm-100ppm的范围内、在0.0004ppm-100ppm的范围内、在0.0008ppm-100ppm的范围内、在0.001ppm-100ppm酶蛋白的范围内、0.01ppm-100ppm酶蛋白、优选地0.01ppm-50ppm酶蛋白、优选地0.05ppm-50ppm酶蛋白、更优选地0.1ppm-50ppm酶蛋白、更优选地0.2ppm-50ppm酶蛋白、更优选地0.2ppm-30ppm酶蛋白、更优选地0.2ppm-10ppm酶蛋白、更优选地0.1ppm-30ppm酶蛋白、更优选地0.5ppm-20ppm酶蛋白、以及最优选地0.5ppm-10ppm酶蛋白。

在洗涤剂组合物,该具有DNA酶活性的多肽应该以相应于以下各项的量存在:每克洗涤剂组合物至少0.002mg的DNA酶蛋白,如至少0.004mg的DNA酶蛋白、至少0.006mg的DNA酶蛋白、至少0.008mg的DNA酶蛋白、至少0.01mg的DNA酶蛋白、至少0.1mg的蛋白、至少0.2mg的蛋白、至少1mg的蛋白、至少10mg的蛋白、至少20mg的蛋白、至少30mg的蛋白、至少40mg的蛋白、至少50mg的蛋白、至少60mg的蛋白、至少70mg的蛋白、至少80mg的蛋白、至少90mg的蛋白、至少100mg的蛋白,如在每克洗涤剂组合物80mg-100mg的蛋白的范围内。因此,该洗涤剂组合物可以包含至少0.00008%DNA酶蛋白,优选地至少0.002%、0.003%、0.004%、0.005%、0.006%、0.008%、0.01%、0.02%、0.03%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%或1.0%的DNA酶蛋白。

具有DNA酶活性的多肽可以是动物、植物或微生物来源的。在一个实施例中,该多肽具有细菌或真菌来源。

该具有DNA酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:与SEQ ID NO:1的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:2的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:4的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:5的多肽具有至少80%序列一致性的多肽以及与SEQ ID NO:6的多肽具有至少80%序列一致性的多肽。

在本发明的一个实施例中,该多肽与SEQ ID NO:1的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。在一个实施例中,一种或多种氨基酸序列已经被取代、缺失或插入,其条件是保持、基本上保持或增加脱氧核糖核酸酶活性。在另外的实施例中,高达10个氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)已经被取代、缺失或插入。

在本发明的一个实施例中,该多肽与SEQ ID NO:2的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。在一个实施例中,一种或多种氨基酸序列已经被取代、缺失或插入,其条件是保持、基本上保持或增加脱氧核糖核酸酶活性。在另外的实施例中,高达10个氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)已经被取代、缺失或插入。

在本发明的一个实施例中,该多肽与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。在一个实施例中,一种或多种氨基酸序列已经被取代、缺失或插入,其条件是保持、基本上保持或增加脱氧核糖核酸酶活性。在另外的实施例中,高达10个氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)已经被取代、缺失或插入。

在本发明的一个实施例中,该多肽与SEQ ID NO:4的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。在一个实施例中,一种或多种氨基酸序列已经被取代、缺失或插入,其条件是保持、基本上保持或增加脱氧核糖核酸酶活性。在另外的实施例中,高达10个氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)已经被取代、缺失或插入。

在本发明的一个实施例中,该多肽与SEQ ID NO:5的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。在一个实施例中,一种或多种氨基酸序列已经被取代、缺失或插入,其条件是保持、基本上保持或增加脱氧核糖核酸酶活性。在另外的实施例中,高达10个氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)已经被取代、缺失或插入。

在本发明的一个实施例中,该多肽与SEQ ID NO:6的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。在一个实施例中,一种或多种氨基酸序列已经被取代、缺失或插入,其条件是保持、基本上保持或增加脱氧核糖核酸酶活性。在另外的实施例中,高达10个氨基酸(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)已经被取代、缺失或插入。

在本发明的一个实施例中,该具有脱氧核糖核酸酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:包含SEQ ID NO:1的成熟多肽或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:2中的氨基酸系列或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:4的成熟多肽或由其组成的多肽、包含SEQ ID NO:5的成熟多肽或由其组成的多肽以及包含SEQ ID NO:6的成熟多肽或由其组成的多肽。在另外的实施例中,该洗涤剂组合物包含由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的多肽,以及由SEQ ID NO:3的氨基酸序列组成的多肽。

保守取代的实例是在下组的范围内:碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸)。一般不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且描述在例如H.Neurath和R.L.Hill,1979,在The Proteins[蛋白质],Academic Press,New York[纽约学术出版社]中。常见的取代为Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu、和Asp/Gly。

可替代地,这些氨基酸改变具有如下此种性质:改变多肽的物理化学特性。例如,氨基酸改变可以改进多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH等。

可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells,1989,Science[科学]244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中,在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变,并且对所得突变体分子的DNA酶活性进行测试以鉴定对于该分子的活性至关重要的氨基酸残基。还参见Hilton等人,1996,J.Biol.Chem.[生物化学杂志]271:4699-4708。酶或其他生物学相互作用的活性位点还可以通过对结构的物理分析来确定,如由下述技术确定:核磁共振、晶体学、电子衍射、或光亲和标记,连同对推定的接触位点氨基酸进行突变。参见,例de Vos等人,1992,Science[科学]255:306-312;Smith等人,1992,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]224:899-904;Wlodaver等人,1992,FEBS Lett.[欧洲生物化学学会联盟通讯]309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断必需氨基酸的身份。

可以做出单个或多个氨基酸取代、缺失和/或插入并且使用已知的诱变、重组和/或改组方法进行测试,随后进行有关筛选程序,如由Reidhaar-Olson和Sauer,1988,Science[科学]241:53-57;Bowie和Sauer,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国科学院院刊]86:2152-2156;WO 95/17413;或WO 95/22625所披露的那些。可以使用的其他方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如,Lowman等人,1991,Biochemistry[生物化学]30:10832-10837;美国专利号5,223,409;WO 92/06204)和区域定向诱变(Derbyshire等人,1986,Gene[基因]46:145;Ner等人,1988,DNA 7:127)。

诱变/改组方法可以与高通量自动化筛选方法组合以检测由宿主细胞表达的克隆的诱变多肽的活性(Ness等人,1999,Nature Biotechnology[自然生物技术]17:893-896)。可以从宿主细胞回收编码活性多肽的诱变的DNA分子,并且使用本领域的标准方法快速测序。这些方法允许迅速确定多肽中单个氨基酸残基的重要性。

该多肽可以是杂合多肽,其中一种多肽的区域在另一种多肽的区域的N-末端或C-末端处融合。

该多肽可以是融合多肽或可裂解的融合多肽,其中另一种多肽在本发明多肽的N-末端或C-末端处融合。通过将编码另一种多肽的多核苷酸与本发明多核苷酸融合而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术在本领域是已知的,并且包括连接编码多肽的编码序列,这样使得它们在框内并且使得融合多肽的表达处于相同启动子和终止子的控制下。融合多肽还可以使用内含肽技术来构建,其中融合多肽在翻译后产生(Cooper等人,1993,EMBO J.[欧洲分子生物学学会杂志]12:2575-2583;Dawson等人,1994,Science[科学]266:776-779)。

融合多肽可以在两种多肽之间进一步包含切割位点。在融合蛋白分泌之时,该位点被切割,从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于以下各项中披露的位点:Martin等人,2003,J.Ind.Microbiol.Biotechnol.[工业微生物学与生物技术杂志]3:568-576;Svetina等人,2000,J.Biotechnol.[生物技术杂志]76:245-251;Rasmussen-Wilson等人,1997,Appl.Environ.Microbiol.[应用环境微生物学]63:3488-3493;Ward等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:498-503;以及Contreras等人,1991,Biotechnology[生物技术]9:378-381;Eaton等人,1986,Biotechnology[生物技术]25:505-512;Collins-Racie等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:982-987;Carter等人,1989,Proteins:Structure,Function,and Genetics[蛋白:结构、功能和遗传学]6:240-248;以及Stevens,2003,Drug Discovery World[世界药物发现]4:35-48。

洗涤剂组合物

在一个实施例中,本发明涉及洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包含结合一种或多种另外的清洁组合物组分的本发明的酶。另外的组分的选择在普通技术人员技术内并且包括常规成分,包括以下列出的示例性、非限制性组分。

表面活性剂

该洗涤剂组合物包含一种或多种表面活性剂,其中至少一种表面活性剂是阴离子的。其他表面活性剂可以是阴离子的和/或非离子的和/或半极性的和/或兼性离子的、或其混合物。在具体实施例中,洗涤剂组合物包括一种或多种非离子型表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的混合物。这种或这些表面活性剂典型地以按重量计从约0.1%至60%的水平存在,如约1%至约40%、或约3%至约20%、或约3%至约10%。基于所希望的清洁应用来选择这种或这些表面活性剂,并且这种或这些表面活性剂包括本领域中已知的任何常规表面活性剂。

当包括在其中时,该洗涤剂通常将含有按重量计约1%至约40%的阴离子表面活性剂,如约5%至约30%,包括从约5%至约15%,或从约15%至约20%,或从约20%至约25%的阴离子型表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐,具体地说是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。

当被包括在其中时,该洗涤剂将通常含有按重量计从约0.2%至约40%的非离子表面活性剂,例如从约0.5%至约30%,特别是从约1%至约20%、从约3%至约10%,如从约3%至约5%、从约8%至约12%或从约10%至约12%。非离子型表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA),烷氧基化的脂肪酸烷基酯(例如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯),烷基酚乙氧基化物(APE),壬基酚乙氧基化物(NPE),烷基多糖苷(APG),烷氧基化胺,脂肪酸单乙醇酰胺(FAM),脂肪酸二乙醇酰胺(FADA),乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM),丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM),多羟基烷基脂肪酸酰胺,或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA),或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA)),连同在SPAN和TWEEN商品名下可获得的产品,及其组合。

当被包括在其中时,洗涤剂将通常含有按重量计从约0%至约40%的半极性表面活性剂。半极化表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO),如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物,及其组合。

当被包括在其中时,洗涤剂将通常含有按重量计从约0%至约40%的兼性离子表面活性剂。兼性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱,如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱及其组合。

助洗剂和共助洗剂

该洗涤剂组合物可以含有按重量计约0-65%,如约5%至约50%的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。助洗剂和/或共助洗剂可以具体是与Ca和Mg形成水溶性络合物的螯合试剂。可以使用本领域中已知用于在洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐例如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐例如碳酸钠、可溶性硅酸盐例如硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺例如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA,也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA,也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)、以及羧甲基菊粉(CMI)、及其组合。

该洗涤剂组合物还可以含有按重量计0-50%,如约5%至约30%的洗涤剂共助洗剂。该洗涤剂组合物可以单独地包括共助洗剂,或与助洗剂(例如沸石助洗剂)组合的共助洗剂。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物,如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐、螯合剂(如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和磷酸盐)、以及烷基-或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二丁二酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。其他示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中

沸石

优选的一类沸石被表征为“中间体”硅酸盐/铝酸盐沸石。通过小于约10的SiOx/A10z摩尔比来表征这些中间体沸石。优选地,Si02/A102的摩尔比范围从约2至约10。这些中间体沸石可以具有优于“高”沸石的优点。这些中间体沸石对胺类气味具有更高亲和力,它们对于气味吸收更有效,因为它们具有更大的表面积,并且它们比高沸石更耐水分并且在水中保持更多的它们的气味吸收能力。适用于在此使用的多种多样的中间体沸石是可商购的,如CP301-68、300-63、CP300-35、以及CP300-56可从PQ公司获得,并且沸石的系列可从Conteka公司获得。

以商品名和销售的,可从联合碳化物公司(Union Carbide Corporation)和UOP获得的沸石材料也是优选的。这些材料优于用于控制含硫气味(例如硫醇(thiol)、硫醇(mercaptan))的中间体沸石。当沸石用作待喷洒至表面上的组合物中的气味控制剂时,该沸石材料优选地具有小于约10微米的颗粒大小,并且以按所述组合物重量计小于约1%的水平存在于组合物中。

漂白系统

洗涤剂可以含有按重量计0-30%,如约1%至约20%的漂白系统。可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何漂白系统。适合的漂白系统组分包括漂白催化剂、光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢源如过碳酸钠、过硼酸钠和过氧化氢-尿素(1:1)、预成型过酸及其混合物。适合的预成型过酸包括但不限于过氧羧酸及盐、二过氧二羧酸、过亚氨酸(perimidic acid)及盐、过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾(Oxone(R))及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括基于过氧化物的漂白系统,这些系统可以包含例如与过酸形成漂白活化剂组合的无机盐,包括碱金属盐,如过硼酸盐(通常是单水合物或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐的钠盐。术语漂白活化剂在此意指与过氧化氢反应以经由过水解反应形成过酸的化合物。以此方式形成的过酸构成活化的漂白剂。在此待使用的适合漂白活化剂包括属于酯、酰胺、酰亚胺或酸酐类别的那些。适合的实例是四乙酰乙二胺(TAED)、4-[(3,5,5-三甲基己酰基)氧基]苯-1-磺酸钠(ISONOBS)、4-(十二酰基氧基)苯-1-磺酸盐(LOBS)、4-(癸酰基氧基)苯-1-磺酸盐、4-(癸酰基氧基)苯甲酸盐(DOBS或DOBA)、4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP 624154中并且在那个家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸酯(像三醋汀)具有以下优点,它是环境友好的。此外,乙酰柠檬酸三乙酯和三醋汀在存储时在产品中具有良好的水解稳定性,并且是一种有效的漂白活化剂。最后,ATC是多功能的,因为在过水解反应中释放的柠檬酸盐可以作为助洗剂起作用。可替代地,漂白系统可以包含例如酰胺、酰亚胺或砜型的过氧酸。漂白系统还可以包含过酸,如6-(苯二甲酰亚氨基)过己酸(PAP)。该漂白系统还可以包括漂白催化剂。在一些实施例中,漂白组分可以是选自下组的有机催化剂,该组由以下各项组成:具有下式的有机催化剂:

(iii)及其混合物;

其中每个R1独立地是含有从9至24个碳的支链烷基基团或含有从11至24个碳的直链烷基基团,优选地每个R1独立地是含有从9至18个碳的支链烷基基团或含有从11至18个碳的直链烷基基团,更优选地每个R1独立地选自下组,该组由以下各项组成:2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、异壬基、异癸基、异十三烷基以及异十五烷基。其他示例性漂白系统描述于例如WO 2007/087258、WO 2007/087244、WO 2007/087259、EP 1867708(维生素K)以及WO 2007/087242中。适合的光漂白剂可以例如是磺化的酞菁锌或酞菁铝。

优选地,除了漂白催化剂、特别是有机漂白催化剂以外,漂白组分还包含过酸源。过酸的来源可以选自(a)预形成的过酸;(b)过碳酸盐、过硼酸盐或过碳酸盐(过氧化氢源),优选与漂白活化剂组合;以及(c)过水解酶以及酯,用于在纺织品处理步骤中在水的存在下原位形成过酸。

聚合物

洗涤剂可以含有按重量计0-10%,如0.5%-5%、2%-5%、0.5%-2%或0.2%-1%的聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。该聚合物可以作为如上文提到的共助洗剂起作用,或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、油污清洁和/或抑泡特性。一些聚合物可以具有多于一种的以上提到的特性和/或多于一种的以下提到的基序。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧化物,如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物、疏水修饰的CMC(HM-CMC)和硅酮、对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基硫酸二季铵盐。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。也考虑了以上提到的聚合物的盐。

织物调色剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括织物调色剂,如染料或色素,当配制在洗涤剂组合物中时,当所述织物与一种洗液接触时织物调色剂可以沉积在织物上,该洗液包含所述洗涤剂组合物,并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白剂发射至少一些可见光。相比之下,因为它们吸收至少一部分可见光光谱,所以织物调色剂改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-粘土轭合物,并且还可以包括色素。适合的染料包括小分子染料和聚合物染料。适合的小分子染料包括选自下组的小分子染料,该组由落入颜色索引(Colour Index)(C.I.)分类的以下染料组成:直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物,例如描述于WO 2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和EP 1876226中(将其通过引用而特此结合)。洗涤剂组合物优选包含从约0.00003wt%至约0.2wt%、从约0.00008wt%至约0.05wt%、或甚至从约0.0001wt%至约0.04wt%的织物调色剂。该组合物可以包含从0.0001wt%至0.2wt%的织物调色剂,当该组合物处于单位剂量袋的形式时,这可以是特别优选的。适合的调色剂还披露于例如WO 2007/087257和WO 2007/087243中。

洗涤剂添加剂连同洗涤剂组合物可以包含一种或多种另外的酶,例如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶,例如漆酶、和/或过氧化物酶。一般而言,所选酶的特性应与选定的洗涤剂相容(即,最适pH,与其他酶和非酶成分的相容性,等),并且该酶应以有效量存在。

纤维素酶:

适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰刀菌属、梭孢壳菌属、支顶孢属的纤维素酶,例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757以及WO 89/09259中的由特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖孢镰刀菌产生的真菌纤维素酶。

特别适合的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。这类纤维素酶的实例是在EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中描述的纤维素酶。其他实例是例如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纤维素酶变体。

其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶,该序列与WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97%一致性,或家族44木葡聚糖酶,该木葡聚糖酶具有以下序列,该序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60%一致性。

可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM和CarezymeTM(诺维信公司)、Carezyme PremiumTM(诺维信公司)、CellucleanTM(诺维信公司)、Celluclean ClassicTM(诺维信公司)、CellusoftTM(诺维信公司)、WhitezymeTM(诺维信公司)、ClazinaseTM和Puradax HATM(杰能科国际公司(Genencor International Inc.))以及KAC-500(B)TM(花王株式会社(Kao Corporation))。

蛋白酶:

适合的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些,例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。它可以是碱性蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶可以例如是来自例如家族M4的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶,如来自M5、M7或M8家族的那些。

术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人,Protein Engng.[蛋白质工程学]4(1991)719-737和Siezen等人,Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的一个亚组。枯草杆菌酶可以被划分为6个亚类,即,枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

枯草杆菌酶的实例是获得自芽孢杆菌属的那些,例如描述于US 7262042和WO 09/021867中的迟缓芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌;和描述于WO 89/06279中的枯草杆菌蛋白酶迟缓(lentus)、枯草杆菌蛋白酶诺和(Novo)、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯(Carlsberg)、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 92/175177、WO 01/016285、WO 02/026024以及WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢菌蛋白酶(描述于WO 89/06270、WO 94/25583和WO 05/040372中),以及获得自纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。

进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在例如WO 95/23221中所述)、及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。

金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993(杰能科国际公司(Genencor Int.))中的中性金属蛋白酶,例如获得自解淀粉芽孢杆菌的那些。

有用的蛋白酶的实例是描述于以下各项中的蛋白酶变体:WO 92/19729、WO 96/034946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264,尤其是在以下位置的一个或多个中具有改变的蛋白酶变体:相应于BPN’(即BPN’编号)中的位置3、4、9、15、27、36、57、68、76、87、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、106、118、120、123、128、129、130、160、167、170、194、195、199、205、206、217、218、222、224、232、235、236、245、248、252以及274。更优选的这些蛋白酶变体是包含一个或多个突变的枯草杆菌酶变体的变体:S3T、V4I、S9R、A15T、K27R、*36D、V68A、N76D、N87S,R、*97E、A98S、S99G,D,A、S99AD、S101G,M,R S103A、V104I,Y,N、S106A、G118V,R、H120D,N、N123S、S128L、P129Q、S130A、G160D、Y167A、R170S、A194P、G195E、V199M、V205I、L217D、N218D、M222S、A232V、K235L、Q236H、Q245R、N252K、T274A(使用BPN'编号)。这些蛋白酶变体优选地是在WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中所示的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的变体、或者在WO 2016/001449的SEQ ID NO 2中所示的解淀粉芽孢杆菌蛋白酶(BPN’)的变体。这些蛋白酶变体与WO 2016/001449的SEQ ID NO 1或2优选地具有至少80%序列一致性。术语“BPN’编号”在蛋白酶领域具有其一般意义,并包括根据如在WO 1991/000345中所示的Savinase和BPN’的比对的编号。位置之前的氨基酸序列是存在于蛋白酶Savinase的序列(例如在WO2016/001449的SEQ ID NO 1中所示的)中的氨基酸序列,本领域技术人员将清楚待替代或缺失的氨基酸可以是任何氨基酸并取决于亲本蛋白酶。

本发明的组合物也可以优选地包含蛋白酶变体,该蛋白酶变体包含在与WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的位置171、173、175、179或180相应的一个或多个位置处的取代,其中所述蛋白酶变体与WO 2004/067737的SEQ ID NO:1具有至少75%但少于100%的序列一致性。

适合的可商购蛋白酶包括以下列商标名下出售的那些:DuralaseTm、DurazymTm、Ultra、Ultra、Ultra、Ultra、Blaze100T、Blaze125T、Blaze150T、和(诺维信公司(Novozymes A/S)),在以下商标名下出售的那些:PurafectPurafectExcellenz P1000TM、Excellenz P1250TM、Preferenz P100TM、PurafectPreferenz P110TM、Effectenz P1000TM、TM、Effectenz P1050TM、PurafectEffectenz P2000TM、和(丹斯尼克公司(Danisco)/杜邦公司(DuPont))、AxapemTM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocases N.V.))、BLAP(在US 5352604的图29中所示的序列)及其变体(汉高股份(Henkel AG))和来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。

脂肪酶和角质酶:

适合的脂肪酶和角质酶包括细菌来源或真菌来源的那些。包括化学修饰的或蛋白质工程化的突变酶。实例包括如在EP 258068和EP 305216中所述的来自嗜热丝孢菌属(Thermomyces)(例如来自疏绵状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)(以前命名为柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa))的脂肪酶、来自腐质霉属(例如特异腐质霉(H.insolens)(WO 96/13580))的角质酶、来自假单胞菌属(Pseudomonas)菌株(这些假单胞菌属菌株中的一些现在重命名为伯克氏菌属)(例如,产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligene)(EP 218272))、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP 331376)、假单胞菌属物种菌株SD705(WO 95/06720&WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012)的脂肪酶、GDSL型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)、来自稻瘟病菌(WO 10/107560)的角质酶、来自门多萨假多胞菌(US 5,389,536)的角质酶、来自嗜热裂孢菌(WO 11/084412)的脂肪酶、嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶(WO 11/084417)、来自枯草芽孢杆菌(WO 11/084599)的脂肪酶、以及来自灰色链霉菌(WO 11/150157)的脂肪酶和始旋链霉菌(WO 12/137147)。

其他实例是脂肪酶变体,例如描述于EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中的那些。

优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM;LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司),Lumafast(最初来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(最初来自吉斯特-博克德斯公司(Gist-Brocades))。

再其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶,例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。

淀粉酶:

可以与本发明的酶一起使用的适合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以具有细菌或真菌起源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。淀粉酶包括例如从芽孢杆菌属、例如地衣芽孢杆菌的特定菌株(更详细地描述于GB 1,296,839中)获得的α-淀粉酶。

适合的淀粉酶包括具有在WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ ID NO:3具有90%序列一致性的变体。优选变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424以及WO 99/019467的SEQ ID NO:4中,如在一个或多个以下位置中具有取代的变体:15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408以及444。

不同的适合的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQ ID NO:6具有90%序列一致性的其变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。

其他适合的淀粉酶是包含在WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中所示的获得自解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和在WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中所示的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90%序列一致性的变体。此杂合α-淀粉酶的优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些:G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209以及Q264。包含在WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中所示的获得自解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选变体是具有以下取代的那些:

M197T;

H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S;或

G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。

另外的适合的淀粉酶是具有在WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90%序列一致性的变体。SEQ ID NO:6的优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些:R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216以及K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182或位置H183和G184中具有缺失的那些。

能被使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7具有90%序列一致性的其变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些:140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304、以及476,使用WO 96/023873的SEQ ID 2用于编号。更优选的变体是在选自181、182、183和184的两个位置上具有缺失的那些,如181和182、182和183、或位置183和184。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选淀粉酶变体是在位置183和184具有缺失并在位置140、195、206、243、260、304和476中的一个或多个中具有取代的那些。

其他能被使用的淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712的SEQ ID NO:10的淀粉酶或与WO 08/153815的SEQ ID NO:2或WO 01/66712的SEQ ID NO:10具有90%序列一致性的其变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选变体是在一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些:176、177、178、179、190、201、207、211以及264。

另外的适合的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ ID NO:2具有90%序列一致性的其变体。SEQ ID NO:2的优选变体是在一个或多个以下位置中具有C-末端截短和/或取代、缺失或插入的那些:Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444以及G475。SEQ ID NO:2的更优选变体是在以下位置:Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K的一个或多个中具有取代,和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183中具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些:

N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;

N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K;

S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;或

S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K,其中这些变体是C-末端截短的并且任选地进一步在位置243处包含取代和/或在位置180和/或位置181处包含缺失。

其他适合的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ ID NO:12具有至少90%序列一致性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的一个或多个以下位置中具有取代、缺失或插入的那些:R28、R118、N174;R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314、R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K和R458K的变体,并且另外在一个或多个选自下组的位置处具有取代的变体:M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345以及A339,最优选的是另外在所有这些位置处具有取代的变体。

其他的实例是淀粉酶变体,如在WO 2011/098531、WO 2013/001078、和WO 2013/001087中描述的那些。

可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、Stainzyme TM、Stainzyme PlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X及BANTM(来自诺维信公司),以及RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase及Preferenz S100(来自杰能科国际有限公司/杜邦公司(Genencor International Inc./DuPont))。

过氧化物酵/氧化酶:

根据本发明的过氧化物酶是由如由国际生物化学与分子生物学联合会命名委员会(IUBMB)陈述的酶分类EC 1.11.1.7包含的过氧化物酶,或获得自其中的展示出过氧化物酶活性的任何片段。

适合的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属,例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486),及其变体,如在WO 93/24618、WO 95/10602以及WO 98/15257中描述的那些。

根据本发明的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶,例如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及展示出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。根据其对卤素离子的特异性将卤代过氧化物酶加以分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯根离子形成次氯酸盐。

在实施例中,本发明的卤代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地,该卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶,即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在本发明的优选方法中,将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯根离子来源组合。

已经从许多不同真菌,特别是从暗色丝孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌组中分离出了卤代过氧化物酶,比如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如煤卡尔黑霉(C.fumago))、链格孢属、弯孢属(例如疣枝弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))、内脐蠕孢属、细基格孢属以及葡萄孢属。

还已经从细菌,如假单胞菌属(例如,吡咯假单胞菌(P.pyrrocinia))和链霉菌属(例如,金色链霉菌(S.aureofaciens))中分离出了卤代过氧化物酶。

在一个优选实施例中,该卤代过氧化物酶可源自弯孢属,特别是疣枝弯孢(Curvularia verruculosa)或不等弯孢,如如描述于WO 95/27046中的不等弯孢CBS 102.42或描述于WO 97/04102中的疣枝弯孢CBS 147.63或疣枝弯孢CBS 444.70;或可源自如描述于WO 01/79459中的Drechslera hartlebii,如描述于WO 01/79458中的盐沼小树状霉(Dendryphiella salina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium物种。

根据本发明的氧化酶具体包括由酶分类EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或获得自其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物,例如儿茶酚氧化酶(EC 1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。

优选的漆酶是微生物来源的酶。这些酶可以获得自植物、细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)。

来自真菌的适合实例包括可源自以下项的菌株的漆酶:曲霉属,脉孢菌属(例如,粗糙脉孢菌),柄孢壳菌属,葡萄孢属,金钱菌属(Collybia),层孔菌属(Fomes),香菇属,侧耳属,栓菌属(例如,长绒毛栓菌和变色栓菌),丝核菌属(例如,立枯丝核菌(R.solani)),拟鬼伞属(例如,灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞(C.comatus)、弗瑞氏拟鬼伞(C.friesii)及C.plicatilis),小脆柄菇属(Psathyrella)(例如,白黄小脆柄菇(P.condelleana)),斑褶菇属(例如,蝶形斑褶菇(P.papilionaceus)),毁丝霉属(例如,嗜热毁丝霉),Schytalidium(例如,S.thermophilum),多孔菌属(例如,P.pinsitus),射脉菌属(例如,射脉侧菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革盖菌属(例如,毛革盖菌(C.hirsutus))(JP2238885)。

来自细菌的适合实例包括可源自芽孢杆菌属的菌株的漆酶。

优选的是获得自拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶;特别是获得自灰盖拟鬼伞的漆酶,如披露于WO 97/08325中;或来自嗜热毁丝霉,如披露于WO 95/33836中。

该洗涤剂酶可以通过添加含有一种或多种酶的单独的添加剂,或通过添加包含所有这些酶的组合添加剂而被包括在洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂,即单独的或组合的添加剂,可以配制成例如颗粒、液体、浆液等。优选的洗涤剂添加剂剂型为颗粒,特别是无粉尘颗粒;液体,特别是稳定化液体;或者浆液。

无尘颗粒例如可以如在US 4,106,991和4,661,452中所披露的那样产生并且可以任选地通过本领域已知的方法包衣。蜡质涂层材料的实例是平均摩尔重量1000至20000的聚(环氧乙烷)产物(聚乙二醇,PEG);具有16至50个环氧乙烷单位的乙氧基化壬基酚;其中醇含有12至20个碳原子并且其中存在15至80个环氧乙烷单位的乙氧基化脂肪醇;脂肪醇;脂肪酸;和脂肪酸的甘油单酯和甘油二酯和甘油三酯。适用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制剂可以例如通过根据已确立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护的酶可以根据EP 238,216中披露的方法来制备。

其他材料

还可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何洗涤剂组分。其他任选的洗涤剂组分包括防腐剂、防缩剂、抗污垢再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、腐蚀抑制剂、崩解剂(disintegrant)/崩解试剂(disintegration agent)、染料、酶稳定剂(包括硼酸、硼酸盐、CMC和/或多元醇如丙二醇)、织物整理剂(包括粘土)、填充剂/加工助剂、荧光增白剂/光学增亮剂、增泡剂、泡沫(泡)调节剂、香料、污垢助悬剂、软化剂、抑泡剂、晦暗抑制剂以及芯吸剂,单独或组合使用。可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何成分。此类成分的选择完全在普通技术人员的技术内。

分散剂

本发明的洗涤剂组合物还可以含有分散剂。具体而言,粉状洗涤剂可以包含分散剂。适合的水溶性有机材料包括均聚合或共聚合的酸或其盐,其中聚羧酸包含被不多于两个碳原子彼此分开的至少两个羧基。适合的分散剂例如描述于粉末洗涤剂,表面活性剂科学系列(Surfactant Science Series),第71卷中,马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc)。

污垢释放聚合物

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污垢释放聚合物,这些聚合物帮助从织物(如棉布和基于聚酯的织物)去除污垢,特别是从基于聚酯的织物去除疏水性污垢。污垢释放聚合物可以例如是基于非离子型或阴离子型对苯二甲酸的聚合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺,参见例如粉末洗涤剂(Powdered Detergents),表面活性剂科学系列(Surfactant science series)第71卷第7章,马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc.)。另一种类型的污垢释放聚合物是包含核心结构和连接至该核心结构的多个烷氧基化基团的两亲性烷氧基化油污清洁聚合物。核心结构可以包含聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构,如WO 2009/087523中详细描述的(将其通过引用而特此结合)。此外,随机接枝共聚物是适合的污垢释放聚合物。适合的接枝共聚物更详细地描述于WO 2007/138054、WO 2006/108856和WO 2006/113314中(将其通过引用而特此结合)。其他污垢释放聚合物是取代的多糖结构,尤其是取代的纤维素结构,如改性纤维素衍生物,如描述于EP 1867808或WO 2003/040279中的那些(将这二者都通过引用而特此结合)。适合的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤维素酯、纤维素酰胺和其混合物。适合的纤维素聚合物包括阴离子修饰的纤维素、非离子修饰的纤维素、阳离子修饰的纤维素、兼性离子修饰的纤维素及其混合物。适合的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素及其混合物。

抗再沉积剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂,例如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和马来酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙亚胺。以上在污垢释放聚合物下描述的纤维素基聚合物还可以用作抗再沉积剂。

流变改性剂

本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种流变改性剂、结构剂或增稠剂,不同于降粘剂。流变改性剂选自下组,该组由以下各项组成:非聚合物结晶、羟基功能材料、聚合物流变改性剂,它们为液体洗涤剂组合物的水性液相基质赋予剪切稀化特征。可以通过本领域已知的方法修饰和调整洗涤剂的流变学和粘度,例如如在EP 2169040中所示。

其他适合的辅料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔软剂、填充剂、泡沫调节剂、助水溶剂、香料、色素、抑泡剂、溶剂以及用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹性剂。

洗涤剂产品的配制

本发明的洗涤剂组合物可以处于任何合宜的形式,例如,条,均质片剂,具有两个或更多个层的片剂,具有一个或多个隔室的袋,常规或压型粉末,颗粒,糊剂,凝胶或常规、压型或浓缩液体。

袋可以被配置为单个或多个的室。它可以具有适合容持该组合物的任何形式、形状和材料,例如在与水接触之前,不允许该组合物从袋中释放出来。该袋由水溶性膜制成,它包含了一个内部体积。所述内部体积可以分成袋的室。优选的膜是高分子材料,优选被制成膜或薄片的形式的聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯,最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地,聚合物在膜例如PVA中的水平是至少约60%。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混组合物,该共混组合物包含可水解降解并且水可溶的聚合物共混物,如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考号M8630下,如由美国印第安纳州的MonoSol号有限责任公司出售)加增塑剂,像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。这些袋可以包含固体衣物清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在构成上可以与含有固体的室不同:US 2009/0011970 A1。

可以由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。因此,可以避免组分间的不良的存储相互作用。在洗涤溶液中,每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。

非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的,典型地含有按重量计至少20%并且高达95%的水,如高达约70%的水、高达约65%的水、高达约55%的水、高达约45%的水、高达约35%的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。水性液体或凝胶洗涤剂可以含有从0-30%的有机溶剂。

液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。

洗衣皂条

本发明的DNA酶可以被添加至洗衣皂条中并且用于手洗洗衣、织物和/或纺织品。术语洗衣皂条包括洗衣条、皂条、组合条(combo bar)、合成洗涤剂条以及洗涤剂条。条的类型通常区别在于它们含有的表面活性剂的类型,并且术语洗衣皂条包括含有来自脂肪酸的皂和/或合成皂的那些。洗衣皂条具有在室温下为固体而非液体、凝胶或粉末的物理形式。术语固体被定义为不随时间显著变化的物理形式,即如果固体物体(如衣物皂条)被放置在容器里,该固体物体不会为了填充其被放置的容器而发生改变。该条是固体时典型地是条的形式但也可能是其他的固体形状如圆形或椭圆。

该衣物皂条可以含有一个或多个另外的酶、蛋白酶抑制剂如肽醛类(或次硫酸盐加合物或半缩醛加合物)、硼酸、硼酸盐、硼砂和/或苯基硼酸衍生物如4-甲酸基本硼酸、一个或多个皂或合成的表面活性剂、多元醇如甘油、pH控制化合物如脂肪酸、柠檬酸、乙酸和/或甲酸、和/或一价阳离子和有机阴离子的盐,其中该一价阳离子可以是例如Na+、K+或NH4+并且该有机阴离子可以是例如甲酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐或乳酸盐,因此该一价阳离子和有机阴离子的盐可以是例如甲酸钠。

洗涤皂条还可以含有络合剂像EDTA和HEDP,香料和/或不同类型的填充剂,表面活性剂例如阴离子型合成表面活性剂,助洗剂,聚合的污垢释放剂,洗涤剂螯合剂,稳定剂,填充剂,染料,着色剂,染料转移抑制剂,烷氧基化的聚碳酸酯,抑泡剂,结构剂,粘合剂,浸出剂,漂白活化剂,粘土去污剂,抗再沉积剂,聚合分散剂,增白剂,织物柔软剂,香料和/或本领域已知的其他化合物。

洗涤皂条可以在常规的洗涤皂条制造设备中进行加工,如但不限制于:混合器、压条机例如双级真空压条机、挤出机、切割机、标识压模机(logo-stamper)、冷却隧道以及包装机。本发明不局限于通过任何单一方法制备洗涤皂条。可以在过程的不同阶段向皂中添加本发明的预混料。例如,可以制备含有皂、DNA酶、任选地一种或多种另外的酶、蛋白酶抑制剂以及一价阳离子和有机阴离子的盐的预混料并且然后将该混合物压条。可以同时添加作为例如处于液态的蛋白酶抑制剂的DNA酶以及任选的另外的酶。除了混合步骤和压条步骤以外,该工艺还可以进一步包括研磨、挤出、切割、压模、冷却和/或包装的步骤。

共颗粒中酶的配制品

该DNA酶可以被配制为颗粒,例如,配制为结合一种或多种酶的共颗粒。然后,每种酶将存在于多种颗粒中,这些颗粒确保酶在洗涤剂中的分布更均匀。这还减少了由于不同的粒度,不同酶的物理隔离。用于生产针对洗涤剂工业的

多酶共颗粒的方法披露于IP.com披露内容IPCOM000200739D中。

通过使用共颗粒配制酶的另一个实例披露于WO 2013/188331中,其涉及洗涤剂组合物,该洗涤剂组合物包含(a)多酶共颗粒;(b)少于10wt沸石(无水基底);和(c)少于10wt磷酸盐(无水基底),其中所述酶共颗粒包含从10wt%至98wt%水分汇组分,并且该组合物另外包含从20wt%至80wt%的洗涤剂水分汇组分。WO 2013/188331还涉及处理和/或清洁表面的方法,优选织物表面,该方法包括以下步骤:(i)将所述表面与在含水洗液中如在此要求保护的并且描述的洗涤剂组合物接触,(ii)冲洗和/或干燥该表面。

该多酶共颗粒可以包含DNA酶和(a)选自下组的一种或多种酶,该组由以下各项组成:首次洗涤脂肪酶、清洁纤维素酶、木葡聚糖酶、过水解酶、过氧化酶、脂氧合酶、漆酶及其混合物;和(b)选自下组的一种或多种酶,该组由以下各项组成:半纤维素酶、蛋白酶、护理纤维素酶、纤维二糖脱氢酶、木聚糖酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、木质酶、普鲁兰酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣聚糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、玻璃酸酶、软骨素酶、淀粉酶、及其混合物。

在以下各段中进一步概述本发明:

1.一种用于洗涤纺织品的方法,该方法包括以下步骤:

a)将纺织品与洗液接触,该洗液包含具有DNA酶活性的多肽、阴离子表面活性剂和包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统、以及任选地光学增亮剂;并且

b)任选地冲洗该纺织品,

其中该洗液具有在10℃-60℃范围内的温度。

2.根据段落1所述的方法,其中该温度是在10℃-50℃的范围内、在10℃-45℃的范围内、在10℃-40℃的范围内、在10℃-35℃的范围内、在10℃-30℃的范围内、在10℃-25℃的范围内或在10℃-20℃的范围内。

3.根据段落1-2中任一项所述的方法,其中该漂白系统包含四乙酰乙二胺(TAED)和过碳酸盐。

4.根据段落3所述的方法,其中在洗液中过碳酸盐的浓度是四乙酰乙二胺(TAED)的浓度的约五倍。

5.根据段落3或4中任一项所述的方法,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是约1:5。

6.根据段落5所述的方法,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是从1:5.5至1:10。

7.根据段落5或6中任一项所述的方法,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是1:6至1:10、从1:6.1至1:10、从1:6.2至1:10、从1:6.3至1:10、从1:6.3至1:8、从1:6.3至1:7或从1:6.3至1:6.8。

8.根据段落5-7中任一项所述的方法,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是1:6.3。

9.根据前述段落中任一项所述的方法,其中该组合物包含光学增亮剂。

10.根据前述段落中任一项所述的方法,其中该光学增亮剂选自下组,该组由以下各项组成:二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和双苯基-二苯乙烯衍生物。

11.根据前述段落中任一项所述的方法,其中该洗液进一步包含不是磷助洗剂的助洗剂。

12.根据前述段落中任一项所述的方法,其中该助洗剂选自碳酸钠、硅酸钠、沸石和柠檬酸钠。

13.根据前述段落中任一项所述的方法,其中该洗液进一步包含一种或多种选自下组的酶,该组由以下各项组成:半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

14.根据前述段落中任一项所述的方法,其中将该纺织品用水或包含调节剂的水冲洗。

15.根据前述段落中任一项所述的方法,其中具有DNA酶活性的多肽是动物、植物或微生物来源的。

16.根据段落15所述的方法,其中该多肽是细菌或真菌来源的。

17.根据段落13-16中任一项所述的方法,其中该具有DNA酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:与SEQ ID NO:1的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:2的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:4的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:5的多肽具有至少80%序列一致性的多肽和与SEQ ID NO:6的多肽具有至少80%序列一致性的多肽。

18.根据段落17所述的方法,其中该多肽与SEQ ID NO:1的多肽、SEQ ID NO:2的多肽、SEQ ID NO:3的多肽、SEQ ID NO:4的多肽、SEQ ID NO:5的多肽或SEQ ID NO:6的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。

19.根据前述段落中任一项所述的方法,其中在该洗液中多肽的浓度是在0.00004ppm-100ppm酶蛋白的浓度的范围内,如在0.00008ppm-100ppm的范围内、在0.0001ppm-100ppm的范围内、在0.0002ppm-100ppm的范围内、在0.0004ppm-100ppm的范围内、在0.0008ppm-100ppm的范围内、在0.001ppm-100ppm酶蛋白的范围内、在0.01ppm-100ppm酶蛋白的范围内、在0.05ppm-50ppm酶蛋白的范围内、在0.1ppm-50ppm酶蛋白的范围内、在0.1ppm-30ppm酶蛋白的范围内、在0.5ppm-20ppm酶蛋白的范围内或在0.5ppm-10ppm酶蛋白的范围内、优选地0.01ppm-50ppm酶蛋白、优选地0.05ppm-50ppm酶蛋白、更优选地0.1ppm-50ppm酶蛋白、更优选地0.2ppm-50ppm酶蛋白、更优选地0.2ppm-30ppm酶蛋白、更优选地0.2ppm-10ppm酶蛋白、更优选地0.1ppm-30ppm酶蛋白、更优选地0.5ppm-20ppm酶蛋白、并且更优选地0.5ppm-10ppm酶蛋白。

20.根据前述段落中任一项所述的方法,其中该洗液包含根据段落38-57所述的洗涤剂组合物。

21.具有DNA酶活性的多肽用于制备用于接受包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统的纺织品表面的用途。

22.具有DNA酶活性的多肽用于制备用于接受光学增亮剂的纺织品表面的用途,该光学增亮剂任选地选自下组,该组由以下各项组成:二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和双苯基-二苯乙烯衍生物。

23.根据段落21至22所述的用途,其中在洗涤过程中将该纺织品暴露于具有DNA酶活性的多肽。

24.根据段落23所述的用途,其中在洗涤过程中将该纺织品暴露于具有DNA酶活性的多肽,并在随后的洗涤过程中暴露于漂白系统。

25.根据段落21-24中任一项所述的用途,其中在洗涤过程中该洗液的温度是在10℃-60℃的范围内。

26.根据段落25所述所述的用途,其中该温度是在10℃-50℃的范围内、在10℃-45℃的范围内、在10℃-40℃的范围内、在10℃-35℃的范围内、在10℃-30℃的范围内、在10℃-25℃的范围内或在10℃-20℃的范围内。

27.根据前述用途段落中任一项所述的用途,其中该漂白系统包含四乙酰乙二胺(TAED)和过碳酸盐。

28.根据段落27所述的用途,其中在洗液中该过碳酸盐的量是四乙酰乙二胺(TAED)的量约五倍。

29.根据段落27或28中任一项所述的用途,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是约1:5。

30.根据段落29所述的用途,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是从1:5.5至1:10。

31.根据段落29或30中任一项所述的用途,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是从1:6至1:10、从1:6.1至1:10、从1:6.2至1:10、从1:6.3至1:10、从1:6.3至1:8、从1:6.3至1:7或从1:6.3至1:6.8。

32.根据段落29-31中任一项所述的用途,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是1:6.3。

33.根据段落21-32中任一项所述的用途,其中该具有DNA酶活性的多肽是动物、植物、微生物来源的。

34.根据段落33所述的用途,其中该多肽是细菌或真菌来源的。

35.根据段落34所述的方法,其中该具有DNA酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:与SEQ ID NO:1的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:2的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:4的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:5的多肽具有至少80%序列一致性的多肽和与SEQ ID NO:6的多肽具有至少80%序列一致性的多肽。

36.根据段落35所述的用途,其中该多肽与SEQ ID NO:1的多肽、SEQ ID NO:2的多肽、SEQ ID NO:3的多肽、SEQ ID NO:4的多肽、SEQ ID NO:5的多肽或SEQ ID NO:6的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。

37.根据段落21-35中任一项的用途,其中该洗液包含根据段落38-57所述的洗涤剂组合物。

38.一种洗涤剂组合物,其包含具有脱氧核糖核酸酶(DNA酶)活性的多肽、阴离子表面活性剂、包含四乙酰乙二胺(TAED)或4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)的漂白系统以及任选地光学增亮剂。

39.根据段落38所述的组合物,其中该漂白系统包含四乙酰乙二胺(TAED)和过碳酸盐。

40.根据段落39所述的组合物,其中在洗液中过碳酸盐的浓度是四乙酰乙二胺(TAED)的浓度的约五倍。

41.根据段落40所述的组合物,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是约1:5。

42.根据段落40-41中任一项所述的组合物,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是从1:5.5至1:10。

43.根据段落40-42中任一项所述的组合物,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是从1:6至1:10、从1:6.1至1:10、从1:6.2至1:10、从1:6.3至1:10、从1:6.3至1:8、从1:6.3至1:7或从1:6.3至1:6.8。

44.根据段落40-43中任一项所述的组合物,其中在四乙酰乙二胺(TAED)与过碳酸盐之间的比例是1:6.3。

45.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该阴离子表面活性剂选自下组,该组由以下各项组成:硫酸盐和磺酸盐,如直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或脂肪酸盐(皂)的二酯和单酯及其组合。

46.根据段落45所述的组合物,其中该组合物包含选自下组的阴离子表面活性剂,该组由以下各项组成:直连烷基苯磺酸盐(LAS)、α-烯烃磺酸盐(AOS)和烷基硫酸盐(AS)。

47.根据前述段落中任一项所述的组合物,其中该光学增亮剂选自下组,该组由以下各项组成:二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和双苯基-二苯乙烯衍生物。

48.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物进一步包含一种或多种选自下组的酶,该组由以下各项组成:半纤维素酶、过氧化物酶、蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶、脂肪酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂加氧酶、木质酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、聚戊糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、漆酶、叶绿素酶、淀粉酶、过水解酶、过氧化物酶和黄原胶酶。

49.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该具有DNA酶活性的多肽是动物、植物或微生物来源的。

50.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该多肽是细菌或真菌来源的。

51.根据段落50所述的组合物,其中该具有DNA酶活性的多肽选自下组,该组由以下各项组成:与SEQ ID NO:1的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:2的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:4的多肽具有至少80%序列一致性的多肽、与SEQ ID NO:5的多肽具有至少80%序列一致性的多肽和与SEQ ID NO:6的多肽具有至少80%序列一致性的多肽。

52.根据段落51所述的组合物,其中该多肽与SEQ ID NO:1的多肽、SEQ ID NO:2的多肽、SEQ ID NO:3的多肽、SEQ ID NO:4的多肽、SEQ ID NO:5的多肽或SEQ ID NO:6的多肽具有至少85%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%序列一致性。

53.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物进一步包含不是磷助洗剂的助洗剂。

54.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该助洗剂选自碳酸钠、硅酸钠、沸石和柠檬酸钠。

55.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物是条,均匀的片剂,具有两个或更多个层的片剂,具有一个或多个室的袋,规则的或压缩的粉末,颗粒,膏,凝胶,或规则的、压缩的或浓缩的液体。

56.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物是液体洗涤剂、粉末洗涤剂或颗粒洗涤剂。

57.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物包含每克洗涤剂组合物至少0.002mg的DNA酶蛋白、至少0.004mg的DNA酶蛋白、至少0.006mg的DNA酶蛋白、至少0.008mg的DNA酶蛋白、至少0.01mg的DNA酶蛋白、至少0.1mg的蛋白、至少1mg的蛋白、至少10mg的蛋白、至少20mg的蛋白、至少30mg的蛋白、至少40mg的蛋白、至少50mg的蛋白、至少60mg的蛋白、至少70mg的蛋白、至少80mg的蛋白、至少90mg的蛋白或至少100mg的蛋白。

58.根据前述组合物段落中任一项所述的组合物,其中该组合物包含每克洗涤剂组合物在80mg-100mg范围的蛋白。

测定和洗涤剂组合物

洗涤剂组合物

可以将以下提及的洗涤剂组合物结合本发明的酶一起使用。

Biotex黑(液体)

5%-15%的阴离子表面活性剂、<5%非离子表面活性剂、香料、酶、DMDM和乙内酰脲。

碧浪Actilift彩色&风格组合物(液体)

成分:5%-15%阴离子表面活性剂;<5%非离子型表面活性剂、磷酸盐、皂;酶、香料、苯并异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、α-异甲基紫罗兰酮、丁苯基甲基丙醛、香茅醇、香叶醇、芳樟醇。

宝莹2合1与舒适西番莲粉末

硫酸钠、碳酸钠、十二烷基苯磺酸钠、膨润土、碳酸钠过氧化物、硅酸钠、沸石、水、柠檬酸、TAED、C12-15 Pareth-7、硬脂酸、香精、丙烯酸钠/MA共聚物、纤维素胶、所修饰的玉米淀粉、氯化钠、羟乙磷酸四钠、EDTMP钙钠、苯胺吗啉三嗪基-氨基苯磺酸二钠、碳酸氢钠、苯丙基乙基聚甲基硅氧烷、丁苯基甲基丙醛、甘油硬脂酸酯、碳酸钙、聚丙烯酸钠、α-异甲基紫罗兰酮、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、纤维素、蛋白酶、柠檬烯、PEG-75、二氧化钛、糊精、蔗糖、聚芳基磺酸钠、CI 12490、CI 45100、CI 42090、硫代硫酸钠、CI 61585。

宝莹生物粉末

蔗糖、山梨醇、硅酸铝、聚甲醛三聚氰胺、聚芳基磺酸钠、CI 61585、CI 45100、脂肪酶、淀粉酶、黄胞胶、羟丙基甲基纤维素、CI 12490、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、硫代硫酸钠、CI 42090、甘露聚糖酶、CI 11680、羟乙磷酸、EDTA四钠。

宝莹生物片剂

碳酸钠、碳酸钠过氧化物、碳酸氢钠、沸石、水、硅酸钠、月桂基硫酸钠、纤维素、TAED、十二烷基苯磺酸钠、半纤维素、木质素、月桂基葡糖苷、丙烯酸钠/MA共聚物、膨润土、氯化钠、香精、羟乙磷酸四钠、硫酸钠、聚丙烯酸钠、二甲硅油、苯胺基吗啉代三嗪基氨基芪磺酸二钠盐、十二烷基苯磺酸、三甲基硅氧基硅酸盐、碳酸钙、纤维素、PEG-75、二氧化钛、糊精、蛋白酶、所修饰的玉米淀粉、蔗糖、CI 12490、聚芳基磺酸钠、硫代硫酸钠、淀粉酶、高岭土。

宝莹色彩护理生物粉末

枯草杆菌蛋白酶、咪唑啉酮、己基肉桂醛、蔗糖、山梨醇、硅酸铝、聚甲醛三聚氰胺、CI 61585、CI 45100、脂肪酶、淀粉酶、黄胞胶、羟丙基甲基纤维素、CI 12490、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、硫代硫酸钠、CI 42090、甘露聚糖酶、CI 11680、羟乙磷酸、EDTA四钠。

宝莹色彩护理生物片剂

碳酸氢钠、碳酸钠、沸石、水、硅酸钠、十二烷基硫酸钠、纤维素胶、十二烷基苯磺酸钠、月桂基葡糖苷、氯化钠、丙烯酸钠/MA共聚物、香精、硫代乙酸钠、PVP、硫酸钠、羟乙磷酸四钠、聚丙烯酸钠、二甲硅油、膨润土、十二烷基苯磺酸、三甲基硅氧基硅酸盐、碳酸钙、纤维素、PEG-75、二氧化钛、糊精、蛋白酶、所修饰的玉米淀粉、蔗糖、硫代硫酸钠、淀粉酶、CI 74160、高岭土。

宝莹双效胶囊生物制品

MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15 Pareth-7、二丙二醇、水、羟乙磷酸四钠、聚乙烯醇、甘油、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、丙二醇、香精、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、山梨醇、MEA-硫酸、乙醇胺、枯草杆菌蛋白酶、乙二醇、丁苯基甲基丙醛、硼酸、(4-甲酰苯基)、己基肉桂醛、柠檬烯、芳樟醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、淀粉酶、聚合的蓝色着色剂、聚合的黄色着色剂、滑石粉、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、甘露聚糖酶、苯酸苄铵酰胺。

宝莹2合1与舒适晴天粉末

硫酸钠、碳酸钠、十二烷基苯磺酸钠、膨润土、碳酸钠过氧化物、硅酸钠、沸石、水、柠檬酸、TAED、C12-15 Pareth-7、香精、硬脂酸、丙烯酸钠/MA共聚物、纤维素胶、所修饰的玉米淀粉、氯化钠、羟乙磷酸四钠、EDTMP钙钠、苯胺吗啉三嗪基-氨基苯磺酸二钠、碳酸氢钠、苯丙基乙基聚甲基硅氧烷、丁苯基甲基丙醛、甘油硬脂酸酯、碳酸钙、聚丙烯酸钠、香叶醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、纤维素、蛋白酶、PEG-75、二氧化钛、糊精、蔗糖、聚芳基磺酸钠、CI 12490、CI 45100、CI 42090、硫代硫酸钠、CI 61585。

宝莹小&强大2合1余舒适晴天

水、C12-15 Pareth-7、十二烷基苯磺酸钠、丙二醇、氢化椰油酸钠、三乙醇胺、甘油、TEA-氢化椰油酸酯、香精、氯化钠、聚季铵盐-10、PVP、聚合的粉色着色剂、硫酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、丁苯基甲基丙醛、苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、己基肉桂醛、香茅醇、丁子香酚、聚乙烯醇、乙酸钠、异丙醇、聚合的黄色着色剂、十二烷基硫酸钠。

宝莹小&强大生物制品

水、MEA-十二烷基苯磺酸、丙二醇、月桂醇醚硫酸钠、C12-15 Pareth-7、TEA-氢化椰油酸酯、MEA-柠檬酸、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、MEA-羟乙磷酸、三乙醇胺、香精、丙烯酸酯共聚物、山梨醇、MEA-硫酸、亚硫酸钠、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、丁苯基甲基丙醛、苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、香茅醇、硫酸钠、肽、盐、来自发酵(工艺)的糖、枯草杆菌蛋白酶、甘油、硼酸、(4-甲酰苯基)、香叶醇、果胶裂解酶、淀粉酶、十二烷基硫酸钠、甘露聚糖酶、CI 42051。

宝莹小&强大胶囊生物制品

MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15 Pareth-7、二丙二醇、水、甘油、聚乙烯醇、香精、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、丙二醇、山梨醇、MEA-硫酸、乙醇胺、枯草杆菌蛋白酶、乙二醇、丁苯基甲基丙醛、己基肉桂醛、淀粉、硼酸、(4-甲酰苯基)、柠檬烯、芳樟醇、二苯乙烯基联苯基二磺酸二钠、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、淀粉酶、滑石粉、聚合的蓝色着色剂、氯化钠、苯并异噻唑啉酮、苯酸苄铵酰胺、聚合的黄色着色剂、甘露聚糖酶。

宝莹小&强大胶囊色彩护理

MEA-十二烷基苯磺酸、MEA-氢化椰油酸、C12-15 Pareth-7、二丙二醇、水、甘油、聚乙烯醇、香精、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、二亚乙基三胺五亚甲基磷酸钠、丙二醇、MEA-硫酸、乙醇胺、PVP、山梨醇、丁苯基甲基丙醛、枯草杆菌蛋白酶、己基肉桂醛、淀粉、柠檬烯、芳樟醇、硼酸、(4-甲酰苯基)、α-异甲基紫罗兰酮、香叶醇、滑石粉、聚合的蓝色着色剂、苯酸苄铵酰胺、聚合的黄色着色剂。

宝莹小&强大色彩护理

水、MEA-十二烷基苯磺酸、丙二醇、月桂醇醚硫酸钠、C12-15 Pareth-7、TEA-氢化椰油酸酯、MEA-柠檬酸、氮丙啶、乙氧基化的均聚物、MEA-羟乙磷酸、三乙醇胺、香精、丙烯酸酯共聚物、山梨醇、MEA-硫酸、亚硫酸钠、甘油、丁苯基甲基丙醛、香茅醇、硫酸钠、肽、盐、来自发酵(工艺)的糖,苯乙烯/丙烯酸酯共聚物、枯草杆菌蛋白酶、硼酸、(4-甲酰苯基)、香叶醇、果胶裂解酶、淀粉酶、十二烷基硫酸钠、甘露聚糖酶、CI 61585、CI 45100。

碧浪Actilif组合物(粉末)

成分:5%-15%阴离子表面活性剂、基于氧的漂白剂、<5%非离子表面活性剂、磷酸盐、聚羧酸盐、沸石、光学增亮剂、酶、香料、丁苯基甲基丙醛、香豆素、己基肉桂醛

标准洗涤剂T组合物(粉末)

成分:11%LAS、2%AS/AEOS、2%皂、3%AEO、15.15%碳酸钠、3%硅酸钠、18.75%沸石、0.15%螯合剂、2%柠檬酸钠、1.65%AA/MA共聚物、2.5%CMC和0.5%SRP(所有的百分数都是w/w)。

洗涤测定

迷你Launder-O-Meter(迷你LOM)模式洗涤系统

迷你LOM是Launder-O-Meter(LOM)的修饰的迷你洗涤系统,其是中等规模标准洗涤系统,它可以应用于同时测试多达20种不同洗涤条件。LOM基本上是大型的具有20个封闭金属烧杯在其中旋转的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的洗涤机并且在一次实验过程中,每个试管将含有一种具有特定的有待测试的洗涤剂/酶系统连同在关于其进行测试的弄脏的和未弄脏的织物。机械压力由在水浴中旋转的烧杯并且由包括在烧杯中的金属球实现。

LOM标准洗涤系统主要用于洗涤剂和酶的中等规模测试,在例如欧洲洗涤条件下。在LOM实验中,如压载物与污垢的比率和织物与洗液的比率的因素可以变化。因此,LOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在前面加载型洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。

在迷你LOM中,洗涤是在置于斯图尔特(Stuart)旋转器中的50ml试管中进行的。

酶测定

测定I

DNA酶活性的测试

在具有甲基绿(BD公司,富兰克林湖,新泽西州,美国)的DNA酶测试琼脂上确定DNA酶活性。简言之,将21g琼脂溶于500ml水中,并且然后在121℃下高压灭菌15min。将高压蒸汽处理的琼脂在水浴中温和至48℃,并且将20ml的琼脂倒入培养皿并且允许在室温下通过孵育来固化。在固化的琼脂平板上,添加5μl的酶溶液,并且DNA酶活性被观察为斑点酶溶液周围的无色区域。

实例

实例1

分离衣物特定细菌菌株

在本实例中使用一种分离自衣物的短波单胞菌属物种的菌株。

在研究期间分离短波单胞菌属物种,其中调研分别在15℃、40℃和60℃下洗涤后衣物中的细菌多样性。在从丹麦家庭收集的衣物上进行该研究。对于每种洗涤,使用范围为4:3:2:2:1:1:1的20g的衣物(茶巾、毛巾、洗碗布、背带裤、打底T恤、T恤领、袜子)。在15℃、40℃或60℃下于Laundr-O-Meter(LOM)中进行洗涤。对于15℃和40℃下的洗涤,使用碧浪灵敏性白色与彩色衣物洗涤剂(Ariel Sensitive White&Color),而对于60℃下的洗涤,使用WFK IEC-A*标准洗涤剂。通过称出5.1g并添加自来水直到1000ml,随后搅拌5分钟来制备碧浪灵敏性白色与彩色衣物洗涤剂。通过称出5g并添加自来水直到1300ml,随后搅拌15min来制备WFK IEC-A*标准洗涤剂(其可从WFK Testgewebe GmbH有限公司获得)。洗涤分别在15℃、40℃和60℃下进行1小时,随后在15℃下用自来水冲洗2次持续20min。

分别在15℃、40℃和60℃下洗涤后立即对衣物进行取样。向二十克的衣物中添加0.9%(w/v)NaCl(1.06404;默克公司(Merck),达姆施塔特,德国)与0.5%(w/w)tween 80,以在匀质器(stomacher)袋中产生1:10稀释液。使用匀质器在中速下将混合物均质化2分钟。均质化后,在0.9%(w/v)NaCl中制备十倍稀释液。将细菌在30℃下于胰胨大豆琼脂(Tryptone Soya Agar)(TSA)(CM0129,Oxoid公司,贝辛斯托克,汉普郡,英国)上需氧地孵育5-7天并对其计数。为了抑制酵母和霉菌的生长T,添加0.2%山梨酸(359769,西格玛公司(Sigma))和0.1%放线酮(18079;西格玛公司)。从可计数的板中选择细菌菌落并且通过在TSA上再划线两次进行纯化。对于长期存储,将纯化的分离株于-80℃下存储在含有20%(w/v)甘油(49779;西格玛公司)的TSB中。

用生物膜制备供体小块布样

在30℃下,使短波单胞菌属物种在胰胨豆胨琼脂(TSA)(pH 7.3)(CM0131;Oxoid有限公司,贝辛斯托克,英国)上预生长2-5天。将来自一个单菌落的满环物转移至10mL的TSB中并且伴随振荡(240rpm)于30℃下孵育1天。繁殖后,通过离心(西格玛实验室离心机(Sigma Laboratory Centrifuge)6K15)(3000g,在21℃下,7min)沉淀短波单胞菌属物种并且将其重悬于10mL用水稀释两次的TSB中。使用分光计(POLARstar Omega(BMG莱伯泰科(BMG Labtech),奥滕贝格(Ortenberg),德国))测量600nm处的光密度(OD)。将用水稀释两次的新鲜TSB接种至0.03的OD600nm,并且将1.6mL添加到12孔的聚苯乙烯平底微板的各孔(3512;康宁公司(Corning Incorporated),康宁(Corning),纽约州(NY),美国),在该微板中放置无菌聚酯WFK30A的圆形小块布样(直径2cm)。伴随振荡(100rpm)在15℃下孵育24h后,将小块布样用0.9%(w/v)NaCl冲洗两次。

实例2

在漂白系统存在下,具有DNA酶活性的多肽的洗涤性能

材料与方法

生物膜小块布样的制备

如实例1中所描述的制备具有短波单胞菌属物种生物膜的无菌聚酯WFK30A的圆形小块布样(直径2cm)。

洗涤实验

通过溶解洗涤剂(5.33g/l)于硬度15°dH的水中来制备没有漂白剂的粉状标准洗涤剂T的洗液。分别添加标准洗涤剂T的AEO Biosoft N25-7(NI)(0.16g/l)组分。向洗液添加颜料污垢(Pigmentschmutz,09V,wfk,克雷费尔德(Krefeld),德国)(0.7g/L)。称出各种量的由TAED和过碳酸盐组成的漂白系统并通过在磁力搅拌器下搅拌5min溶解在洗液中。将10ml的洗液添加至50ml管中,在该管中有具有短波单胞菌属物种和五个无菌聚酯(WFK30A)小块布样的五个冲洗的小块布样。在包括米曲霉DNA酶的洗涤中,将DNA酶(0.5ppm)添加至洗液中。在斯图尔特(Stuart)旋转器中,在30℃下进行洗涤1小时(如在此描述的迷你LOM测定)。洗涤后,在自来水中冲洗具有短波单胞菌属物种的小块布样,并且在滤纸上干燥过夜。使用Color Eye(Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计)测量色差(L值)。在入射光中没有UV的情况下进行测量并且从CIE Lab色空间中提取L值。

表1.在漂白系统的存在下,DNA酶的洗涤性能。

表1中存在的数据证实了本发明的米曲霉DNA酶的洗涤性能不受漂白系统的存在影响。此外,该数据证实了米曲霉DNA酶对纺织品的白度的贡献超过了漂白系统。

实例3在漂白系统存在下,具有DNA酶活性的多肽的洗涤性能

DNA酶和漂白剂的作用,和例如协同作用可以显示在其中纺织品用DNA和典型的可漂白污垢蓝莓汁的组合物弄脏的设置中。该纺织品优选为聚酯棉布50/50平纹针织T-7422,但也可以是WFK20A棉聚酯或wfk 10A棉或wfk 30A聚酯的纺织品。

制备DNA/蓝莓小块布样:

在将具有添加的蓝莓汁的DNA或与蓝莓汁混合的DNA添加至纺织品之前,可以制备带有鲑鱼(Salmon)DNA或蓝莓汁的无菌聚酯WFK30A的圆形小块布样(直径2cm)。

DNA小块布样:小块布样,来自鲑鱼测试的1.5g脱氧核糖核酸钠;称出DNA(西格玛公司(Sigma)1626)并在蓝帽瓶(bluecap bottle)中添加至100ml milliQ水中。放入磁力搅拌器。在最大速度下搅拌60分钟直至其均匀。将纺织品浸入溶液中并浸泡2min,并在橡胶辊中滚动干燥。将其在35℃下干燥5小时并在室温下放置过夜。将小块布样打眼形成2cm圆形小块布样。

可以如以下描述的制备蓝莓汁小块布样:在蓝帽瓶中将11ml蓝莓汁添加至100ml milliQ水中。放入磁力搅拌器。在最大速度下搅拌60分钟直至其均匀。将纺织品浸入溶液中并浸泡2min,并在橡胶辊中滚动干燥。将其在35℃下干燥5小时并在室温下放置过夜。将小块布样打眼形成2cm圆形小块布样

DNA+蓝莓汁小块布样1:来自鲑鱼测试的1.5g脱氧核糖核酸钠;称出DNA(西格玛公司(Sigma)1626)并在蓝帽瓶中添加至100ml milliQ水中。放入磁力搅拌器。在最大速度下搅拌60分钟直至其均匀。添加11ml蓝莓汁并充分混合。将纺织品浸入溶液中并浸泡2min,并在橡胶辊中滚动干燥。将其在35℃下干燥5小时并在室温下放置过夜。将小块布样打眼形成2cm圆形小块布样。

DNA+蓝莓汁小块布样2:来自鲑鱼测试的1.5g脱氧核糖核酸钠;称出DNA(西格玛公司(Sigma)1626)并在蓝帽瓶中添加至11ml蓝莓汁中。放入磁力搅拌器。在最大速度下搅拌60分钟直至其均匀,必要时加热,添加100ml milliQ水并搅拌直至其均匀。将纺织品浸入溶液中并浸泡2min,并在橡胶辊中滚动干燥。将其在35℃下干燥5小时并在室温下放置过夜。将小块布样打眼形成2cm圆形小块布样

通过溶解洗涤剂(5.33g/l)于硬度15°dH的水中来制备没有漂白剂的粉状标准洗涤剂T的洗液。分别添加标准洗涤剂T的AEO Biosoft N25-7(NI)(0.16g/l)组分。向洗液中添加颜料污垢(Pigmentschmutz,09V,wfk,克雷费尔德,德国)(0.7g/L)。称出各种量的由TAED和过碳酸盐组成的漂白系统并通过在磁力搅拌器下搅拌5min溶解在洗液中。将10ml的洗液添加至50ml管中,在该管中五个冲洗的小块布样,其中DNA小块布样、蓝莓小块布样、DNA/蓝莓1小块布样或蓝莓2小块布样。

用DNA污渍+/-颜料污垢或碳黑的洗涤将证实DNA的粘合作用,并且此漂白剂不能去除来自颗粒的颜色外观。

相比于不用漂白剂洗涤时,用蓝莓小块布样+/-颗粒污垢和+/-DNA酶的洗涤将显示去除/减少颜色,并且当在洗涤中存在颗粒污垢时,来自单独添加DNA酶的效果相当与漂白剂一起使用的效果。

用DNA蓝莓污渍1的洗涤将显示,在没有颗粒污垢存在下漂白剂是否将去除蓝莓汁颜色。当污垢存在时,该污垢可以粘附并使织物变色。当DNA酶单独存在而没有颗粒污垢以及没有漂白剂时,蓝莓汁颜色不会被漂白。当颗粒污垢在溶液中与DNA酶和漂白剂两者一起存在时,将避免沉积,并且在干净的洗涤剂中洗涤后,小块布样将与原始小块布样一样白。当DNA酶和漂白剂的组合与颗粒污垢一起存在于洗涤时,由于粘性DNA也被去除,因此将显示从果汁/咖喱中除去着色以及抑制颗粒污垢的沉积。

用DNA蓝莓染色剂2洗涤将显示当不存在颗粒时漂白剂可以破坏颜色,但当存在颗粒时会沉积。当没有污垢存在时,DNA酶能够去除具有颜色的DNA的一些部分。不是全部去除。但是,由于蓝莓汁被漂白,并且纺织品上没有粘着的DNA以粘附颗粒,所以DNA酶和漂白剂的组合将在清洁洗涤剂中洗涤后与未弄脏的小块布样一样白色。

表2

序列表

<110> 诺维信公司

<120> 衣物洗涤方法,多肽和洗涤剂组合物的用途

<130> 13046-WO-PCT

<140> -

<141> 2015-04-09

<160> 6

<170> 专利版本 3.5

<210> 1

<211> 243

<212> PRT

<213> 米曲霉

<220>

<221> 信号

<222> (1)..(22)

<220>

<221> 前肽

<222> (23)..(37)

<220>

<221> 链

<222> (38)..(243)

<223> 成熟多肽

<400> 1

Met Gln Leu Thr Lys Ser Leu Leu Val Phe Ala Leu Tyr Met Phe Gly

1 5 10 15

Thr Gln His Val Leu Ala Val Pro Val Asn Pro Glu Pro Asp Ala Thr

20 25 30

Ser Val Glu Asn Val Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser

35 40 45

Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro

50 55 60

Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val

65 70 75 80

Leu Gln Arg Val Asn Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser

85 90 95

Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys

100 105 110

Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser

115 120 125

Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala

130 135 140

Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val

145 150 155 160

Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser

165 170 175

Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr

180 185 190

Gly Ala Ala Gly Pro Tyr Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser

195 200 205

Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro

210 215 220

Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr

225 230 235 240

Val Gly Lys

<210> 2

<211> 206

<212> PRT

<213> 米曲霉

<220>

<221> 链

<222> (1)..(206)

<223> 成熟多肽

<400> 2

Ala Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala

1 5 10 15

Asp Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys

20 25 30

Trp Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn

35 40 45

Glu Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly

50 55 60

Pro Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys

65 70 75 80

Asn Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala

85 90 95

Phe Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val

100 105 110

Asn Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr

115 120 125

Ser Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr

130 135 140

Lys Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro

145 150 155 160

Tyr Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn

165 170 175

Lys Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr

180 185 190

Gln Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys

195 200 205

<210> 3

<211> 204

<212> PRT

<213> 米曲霉

<220>

<221> 链

<222> (1)..(204)

<223> 成熟多肽

<400> 3

Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala Asp Leu

1 5 10 15

Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys Trp Ala

20 25 30

Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn Glu Lys

35 40 45

Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly Pro Phe

50 55 60

Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys Asn Pro

65 70 75 80

Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala Phe Ala

85 90 95

Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val Asn Leu

100 105 110

Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr Ser Ala

115 120 125

Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr Lys Gly

130 135 140

Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro Tyr Cys

145 150 155 160

Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn Lys Asn

165 170 175

Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr Gln Tyr

180 185 190

Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys

195 200

<210> 4

<211> 205

<212> PRT

<213> 哈茨木霉

<220>

<221> 信号

<222> (1)..(17)

<220>

<221> 链

<222> (18)..(205)

<223> 成熟多肽

<400> 4

Met Lys Leu Ser Ile Ser Val Ala Leu Thr Ser Ala Ile Ala Val Leu

1 5 10 15

Ala Ala Pro Ala Pro Met Pro Thr Pro Pro Gly Ile Pro Thr Glu Ser

20 25 30

Ser Ala Arg Thr Gln Leu Ala Gly Leu Thr Val Ala Val Ala Gly Ser

35 40 45

Gly Thr Gly Tyr Ser Arg Asp Leu Phe Pro Thr Trp Asp Ala Ile Ser

50 55 60

Gly Asn Cys Asn Ala Arg Glu Tyr Val Leu Lys Arg Asp Gly Glu Gly

65 70 75 80

Val Gln Val Asn Asn Ala Cys Glu Ser Gln Ser Gly Thr Trp Ile Ser

85 90 95

Pro Tyr Asp Asn Ala Ser Phe Thr Asn Ala Ser Ser Leu Asp Ile Asp

100 105 110

His Met Val Pro Leu Lys Asn Ala Trp Ile Ser Gly Ala Ser Ser Trp

115 120 125

Thr Thr Ala Gln Arg Glu Ala Leu Ala Asn Asp Val Ser Arg Pro Gln

130 135 140

Leu Trp Ala Val Ser Ala Ser Ala Asn Arg Ser Lys Gly Asp Arg Ser

145 150 155 160

Pro Asp Gln Trp Lys Pro Pro Leu Thr Ser Phe Tyr Cys Thr Tyr Ala

165 170 175

Lys Ser Trp Ile Asp Val Lys Ser Phe Tyr Lys Leu Thr Ile Thr Ser

180 185 190

Ala Glu Lys Thr Ala Leu Ser Ser Met Leu Asp Thr Cys

195 200 205

<210> 5

<211> 142

<212> PRT

<213> 地衣芽孢杆菌

<220>

<221> 信号

<222> (1)..(33)

<220>

<221> 链

<222> (34)..(142)

<223> 成熟多肽

<400> 5

Met Ile Lys Lys Trp Ala Val His Leu Leu Phe Ser Ala Leu Val Leu

1 5 10 15

Leu Gly Leu Ser Gly Gly Ala Ala Tyr Ser Pro Gln His Ala Glu Gly

20 25 30

Ala Ala Arg Tyr Asp Asp Ile Leu Tyr Phe Pro Ala Ser Arg Tyr Pro

35 40 45

Glu Thr Gly Ala His Ile Ser Asp Ala Ile Lys Ala Gly His Ser Asp

50 55 60

Val Cys Thr Ile Glu Arg Ser Gly Ala Asp Lys Arg Arg Gln Glu Ser

65 70 75 80

Leu Lys Gly Ile Pro Thr Lys Pro Gly Phe Asp Arg Asp Glu Trp Pro

85 90 95

Met Ala Met Cys Glu Glu Gly Gly Lys Gly Ala Ser Val Arg Tyr Val

100 105 110

Ser Ser Ser Asp Asn Arg Gly Ala Gly Ser Trp Val Gly Asn Arg Leu

115 120 125

Ser Gly Phe Ala Asp Gly Thr Arg Ile Leu Phe Ile Val Gln

130 135 140

<210> 6

<211> 136

<212> PRT

<213> 枯草芽孢杆菌

<220>

<221> 信号

<222> (1)..(26)

<220>

<221> 链

<222> (27)..(136)

<223> 成熟多肽

<400> 6

Met Lys Lys Trp Met Ala Gly Leu Phe Leu Ala Ala Ala Val Leu Leu

1 5 10 15

Cys Leu Met Val Pro Gln Gln Ile Gln Gly Ala Ser Ser Tyr Asp Lys

20 25 30

Val Leu Tyr Phe Pro Leu Ser Arg Tyr Pro Glu Thr Gly Ser His Ile

35 40 45

Arg Asp Ala Ile Ala Glu Gly His Pro Asp Ile Cys Thr Ile Asp Arg

50 55 60

Asp Gly Ala Asp Lys Arg Arg Glu Glu Ser Leu Lys Gly Ile Pro Thr

65 70 75 80

Lys Pro Gly Tyr Asp Arg Asp Glu Trp Pro Met Ala Val Cys Glu Glu

85 90 95

Gly Gly Ala Gly Ala Asp Val Arg Tyr Val Thr Pro Ser Asp Asn Arg

100 105 110

Gly Ala Gly Ser Trp Val Gly Asn Gln Met Ser Ser Tyr Pro Asp Gly

115 120 125

Thr Arg Val Leu Phe Ile Val Gln

130 135

再多了解一些
当前第1页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1