本发明涉及保健用品技术领域，尤其涉及一种鹿血蛋白多肽及应用。
背景技术：
鹿血是指鹿类动物如梅花鹿和马鹿的茸血及膛血，研究表明，鹿血具有增强免疫、补血、延缓衰老、抗疲劳、提高性功能、益精、安神、促进代谢和创伤愈合等功能。多年来，我国对于鹿血资源的利用仅限于对原血液的利用和加工，其中大部分都是以鹿血酒的形式存在。而在某些发达国家，已经开始有利用动物血液酶解开发肽类试剂和药物。因此，开发鹿血蛋白制品对鹿血资源开发具有重要的意义。
鹿血的化学成分复杂，理化测试表明，鲜鹿血水分含量为80％～81％，无机成分占2％～4％，灰分占3％～4％，有机成分16％～17％。其中主要是蛋白质及多种酶，蛋白质中富含19种氨基酸；另外还含多种脂类、游离脂肪酸、固醇、糖脂、磷脂、激素、嘌呤、维生素和多糖等，并含多种常量和有益微量元素。
鹿血蛋白肽是指在蛋白酶的作用下将鹿血中的蛋白质水解产生的多肽。多肽具有极强的活性和多样性，可全面调节人体生理功能，增强人体生理活性；多肽不仅能提供人体生长发育所需的营养物质，而且具有特殊的生物学功能，比蛋白质更易人体吸收。
目前市面上的鹿血酒大部分采用鲜鹿血分散于高浓度酒中，在保存和运输过程中，鹿血与酒体发生分离现象，对外观和品质上都产生了极大的影响，造成了不必要的损失。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于一种高寡肽比例的鹿血蛋白多肽。
本发明的目的之二在于提供该鹿血蛋白多肽的应用。
本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向新鲜鹿血中加入抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样离心，弃去血浆，收集血细胞；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入1-2倍体积的蒸馏水，用稀naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血，离心，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成8-10g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6000-7000u/g血细胞，50-60℃微波辅助酶解，其中，加稀naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：加入稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5000-6000u/g血细胞，50-60℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至90-95℃灭活，离心，分离出上清液；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为50-60°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。
作为优选，抗凝步骤中，所述抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖的混合溶液，其中，柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖的重量比为(0.8-1):(0.3-0.6):1。
作为优选，分离血细胞步骤中，离心速率为3000-3500rpm，离心时间为10-15min。
作为优选，超声辅助溶血步骤中，超声功率为300-400w。
作为优选，微波辅助碱酶酶解步骤中，微波频率为1500-3000mhz，功率为5kw。
作为优选，微波辅助碱酶酶解步骤中，稀naoh的浓度为0.5mol/l。
作为优选，微波辅助木瓜蛋白酶酶解步骤中，稀hcl的浓度为0.5mol/l。
作为优选，浓缩步骤中，所述过滤为微孔过滤。
作为优选，微孔过滤的孔径为22μm。
本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
上述的鹿血蛋白多肽在制备保健品上的应用。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
(1)本发明提供的鹿血蛋白多肽的分子具有较好的均一性，寡肽的占比高，易于吸收；该鹿血蛋白多肽具有较好的抗疲劳和抗氧化活性，具有较好的功效；
(2)本发明提供的鹿血蛋白多肽用于制备养生酒之后具有较高的稳定性，不易产生沉淀或浑浊，在保健品领域具有较好的应用前景。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
以下具体实施方式中，如未特殊说明，所采用的试剂或材料均可通过市售或常规试验手段的方式获得。
本发明提供一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向新鲜鹿血中加入抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样离心，弃去血浆，收集血细胞；
本步骤中抗凝剂优选为所述抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖的混合溶液，其中，柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖的重量比为(0.8-1):(0.3-0.6):1，即该混合型抗凝剂能弥补单独的抗凝剂造成体系ph值不稳定等缺陷；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入1-2倍体积的蒸馏水，用稀naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血，离心，收集上清液；
采用超声辅助，有效地提高血细胞的溶出速率；该ph值条件下，血细胞渗透压增大，可以加速血细胞的破裂，较大地提高了血细胞的溶出速率，且不会引起细胞蛋白变性；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成8-10g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6000-7000u/g血细胞，50-60℃微波辅助酶解，其中，加稀naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：加入稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5000-6000u/g血细胞，50-60℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至90-95℃灭活，离心，分离出上清液；
在溶血后，依次进行碱酶、木瓜蛋酶酶解，两者结合协调性地完成血细胞蛋白的酶解；酶解过程，体系的ph值均呈现较好的稳定性，能有效减少因ph环境骤变影响蛋白或多肽变性的情况；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为50-60°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。
该鹿血蛋白多肽具有较高的寡肽比例，易于被身体吸收，同时用于配制保健饮品，具有较好的分散性和稳定性。该膏状液具有较好的稳定性的流变性，可进一步喷雾干燥或直接用于配制保健饮品。
实施例1
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3300rpm离心12min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:(0.3-0.6):1重量比混合；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血15min，超声功率350w，以3300rpm离心12min，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成9g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6500u/g血细胞，55℃微波辅助酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5000-6000u/g血细胞，55℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为60°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为73.4％，寡肽比例为89.2％。
实施例1
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3300rpm离心12min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:0.4:1重量比混合；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血15min，超声功率300w，以3300rpm离心12min，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成9g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6500u/g血细胞，55℃微波辅助酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5500u/g血细胞，55℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为55°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为73.4％，寡肽比例为89.2％。
实施例2
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3300rpm离心12min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:0.5:1重量比混合；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血15min，超声功率400w，以3500rpm离心10min，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成8g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为7000u/g血细胞，55℃微波辅助酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为6000u/g血细胞，55℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为60°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为72.1％，寡肽比例为88.6％。
实施例3
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3000rpm离心15min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:0.55:1重量比混合；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血15min，超声功率350w，以3500rpm离心10min，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成8g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6000u/g血细胞，55℃微波辅助酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5000u/g血细胞，55℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为50°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为74.4％，寡肽比例为89.7％。
对比例1：
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3300rpm离心12min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:0.4:1重量比混合；
溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，35-37℃溶血60min，以3300rpm离心12min，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成9g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6500u/g血细胞，55℃微波辅助酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5500u/g血细胞，55℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为55°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为61.8％，寡肽比例为87.4％。
对比例2：
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3300rpm离心12min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:0.4:1重量比混合；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血15min，超声功率350w，以3300rpm离心12min，收集上清液；
碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成9g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6500u/g血细胞，55℃酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；
微波辅助木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5500u/g血细胞，55℃微波辅助进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为55°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为73.6％，寡肽比例为60.1％。
对比例3
一种鹿血蛋白多肽，其制备方法依次包括：
分离血细胞：向1l新鲜鹿血中加入8g抗凝剂，分散，得到抗凝血样，将抗凝血样以3300rpm离心12min，弃去血浆，收集血细胞；本步骤中，抗凝剂为柠檬酸、柠檬酸钠与葡萄糖按1:(0.3-0.6):1重量比混合；
超声辅助溶血：将血细胞用生理盐水洗涤，加入等体积的蒸馏水，用0.5mol/l的naoh调节ph为9-10，采用35-37℃超声辅助溶血15min，超声功率350w，以3300rpm离心12min，收集上清液；
微波辅助碱酶酶解：向上清液中加入蒸馏水稀释成9g血细胞/l，加入碱性蛋白酶，使酶浓度为6500u/g血细胞，55℃微波辅助酶解，其中，加0.5mol/l的naoh溶液使上清液的ph值保持9-10，得酶解液；微波频率为2500mhz，功率为5kw；
木瓜蛋白酶酶解：向酶解液加入0.5mol/l的稀盐酸使酶解液ph值为6-7，加入木瓜蛋白酶，使酶浓度为5000-6000u/g血细胞，55℃进行酶解，将酶解液加热至95迅速降温℃灭活，以3300rpm离心12min，分离出上清液；
浓缩：用22μm微孔膜将上清液过滤，减压浓缩至brix为60°，即得鹿血蛋白多肽的膏状液。以血细胞为基准计，收率为72.4％，寡肽比例为64.9％。
由实施例1-3与对比例1-3的比较可知，在溶血阶段未采用超声波辅助溶血，收率明显降低；而在碱酶酶解或木瓜蛋白酶酶解过和未采用微波辅助手段，虽然收率下降不明显，但寡肽比例大大下降。
本发明提供的鹿血蛋白多肽，在免疫、抗氧化等方面具有显著的功效，可直接添加于酒品中以制得保健饮品。
性能检测与效果评价
1、抗氧化能力测定
将10μmol/l的trolox储备液加磷酸盐缓冲液稀释成浓度为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.6μmol/l的标准溶液，以磷酸盐缓冲液为阴性对照，以荧光半衰时间为纵坐标，以trolox浓度为横坐标，绘制标准曲线。
取1g的实施例1-3的鹿血蛋白多肽，加100ml的磷酸盐缓冲液进行稀释，混合均匀，以蒸馏水为空白对照，分别采用磷酸盐缓冲液稀释按10倍、100倍、1000倍、10000倍、100000倍稀释，将稀释液进行测定，其结果如下表所示：
表1抗氧化能力测试结果
2、小鼠负重试验
采用spf雄性小鼠，体重为18-22g，每试验组10只，共40只，分别进行负重游泳测定，实验期间环境温度为22-24℃，湿度50-54％。采用实施例1得到的鹿血蛋多肽，设定剂量为0.1g/kg.bw、0.2g/kg.bw、0.5g/kg.bw，以灭菌水为对照组，拌食喂养30天，进行负重游泳试验。
表2负重游泳试验
灌胃喂养30天后，各剂量组小鼠，相对于对照组小鼠的负重游泳时间明显延长。说明本申请提供的鹿血蛋白多肽具有提高机体抗疲劳作用。
3、稳定性试验
将实施例1-3与对比例1-3的鹿血蛋白多肽以1:10的配比加至50°的白酒中，震荡均匀至无肉眼可见沉淀，得到鹿血蛋白多肽的养生酒，取1l养生酒以3000rpm的速度离心5min，观察养生酒的外观以及是否有沉淀，若有，则测量沉淀体积，结果如下表所示：
表3稳定性试验结果
如上表所示，该申请获得的鹿血蛋白多肽具有较高的动力学稳定性，该蛋白多肽制备养生酒后不易变质，不易产生沉淀，品质较高。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。