本发明涉及生物制品技术领域，尤其涉及一种防治土传病害复合菌剂及其制备方法。
背景技术：
我国农业生产中，由于化学肥料的长期使用，致使农田生态环境、土壤理化性质、土壤结构和土壤微生物区系受到不同程度的破坏，以及植物土传病害的病原物的复合侵染，在一定程度上严重影响了农产品的生产。
随着微生物技术在农业中的应用，利用有益微生物杀灭或压低病原生物数量以控制植物病害发生、发展，许多功能菌也广泛应用于农药和肥料领域，为实现环保、无污染和高效农业生产提供了有效的方法和解决途径。
目前市面上同类技术产品虽能在秸秆资源的利用和对土壤有机质的提升方面有一定促进作用，但仍存在着以下问题：菌种存活能力差，多种微生物一起培养产生拮抗，容易造成部分菌种死亡，从而影响生防效果；菌种之间会产生抗衡，适应性差，应用效果不稳定；制备方法不完善、不成熟，工业化程度低。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种既能促进土壤改良、又有良好生防效果的防治土传病害复合菌剂。
为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：防治土传病害复合菌剂，包括如下重量份的组份：荧光假单孢菌液体菌种25～35份；枯草芽孢杆菌液体菌种25～35份；巨大芽孢杆菌液体菌种25～35份；苏云金杆菌液体菌种25～35份；哈次木霉液体菌种3～7份；大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；琼脂1～3份；磷酸氢二钾8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。
作为优选，所述防治土传病害复合菌剂包括如下重量份的组份：荧光假单孢菌液体菌种30份；枯草芽孢杆菌液体菌种30份；巨大芽孢杆菌液体菌种30份；苏云金杆菌液体菌种30份；哈次木霉液体菌种5份；大豆蛋白粉10份；牛肉膏2份；琼脂2份；磷酸氢二钾10份；尿素10份；糖蜜20份。
由于采用了上述技术方案，本防治土传病害复合菌剂具有以下有益效果：
(1)将每种微生物的功能组合为强势的菌体，菌种功能各异，完美搭配相符；其中包含固氮、絮凝能力较强的荧光假单胞及解磷菌的芽孢杆菌，分解有机质、纤维、蛋白、秸秆及农残所用的哈次木霉；枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌对鳞翅目、双翅目及膜翅目有较强的杀伤力，巨大芽孢杆菌解磷、解药，是典型的好气菌，这个群体具有强有力的防治能力；本产品具有强大的存活能力，能快速繁殖，具有固氮、溶磷、防止肥分流失的效果。
(2)菌种通过单独培养成熟稳定后按一定比例组合，避免了多种微生物一起培养产生拮抗造成部分菌种死亡的现象，按照真细菌的比例搭配避免了菌之间的抗衡，本产品是一种多功能复合型的生防菌群，对当前的土壤改良、农业的环保、废弃秸秆垃圾有着很好的解决方式，既能促进土壤改良，又有很好的生防效果，利于改善土壤结构、防止肥分流失、保护生态环境。
本发明还提供了上述防治土传病害复合菌剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤一、培养基的制备
(1)培养基a的制备
取氨基酸、磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量为氨基酸1.5～2.5％、磷酸二氢钾1.5～2.5％、葡萄糖0.5～1.5％、蛋白胨0.1～0.9％、尿素0.1～0.9％、牛肉膏0.5～1.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基a；
(2)培养基b的制备
取硝酸钾、氯化钠、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量为硝酸钾0.3～0.8％、氯化钠0.1～0.3％，糖蜜3～8％，葡萄糖1～3％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基b；
步骤二、液体菌种的培养
取荧光假单孢菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和苏云金杆菌先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基a进行培养，得到荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种和苏云金杆菌液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
取哈次木霉先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基b进行培养，得到哈次木霉液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
步骤三、液体菌种的熟化
将步骤二中培养后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种和哈次木霉液体菌种分别投入90～100公斤培养基中，在种子罐内25～35℃培养5～8天，熟化后备用；
步骤四、液体菌种的复合与强化
取步骤三中熟化后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种、哈次木霉液体菌种、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、琼脂、磷酸氢二钾、尿素、糖蜜按比例混合成复合体，即制得该防治土传病害复合菌剂。
作为优选，步骤四中各组份的重量份配比如下：荧光假单孢菌液体菌种25～35份；枯草芽孢杆菌液体菌种25～35份；巨大芽孢杆菌液体菌种25～35份；苏云金杆菌液体菌种25～35份；哈次木霉液体菌种3～7份；大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；琼脂1～3份；磷酸氢二钾8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。
由于采用了上述技术方案，本制备方法具有以下有益效果：利用各自微生物的特性在培养过程中实行菌种的单独培养，菌种成熟稳定后加以复合使其进入稳定状态，防止混合后导致有些菌种衰微，避免了多种微生物一起培养产生拮抗造成部分菌种死亡的现象。本制备方法简单易于实现，这种方式复合而成菌种功能各异，完美搭配相符，具有固氮、溶磷、解钾、分解有机质、抑制虫害和促进有机质转换、加速有机质分解养分等功能，既能促进土壤改良，又有很好的生防效果。
具体实施方式
下面结合实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
本实施例中，防治土传病害复合菌剂包括如下重量份的组份：荧光假单孢菌液体菌种25份；枯草芽孢杆菌液体菌种25份；巨大芽孢杆菌液体菌种25份；苏云金杆菌液体菌种25份；哈次木霉液体菌种3份；大豆蛋白粉8份；牛肉膏1份；琼脂1份；磷酸氢二钾8份；尿素8份；糖蜜15份。
其制备方法包括如下步骤：
步骤一、培养基的制备
(1)培养基a的制备
取氨基酸、磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量为氨基酸1.5％、磷酸二氢钾1.5％、葡萄糖0.5％、蛋白胨0.2％、尿素0.3％、牛肉膏0.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基a；
(2)培养基b的制备
取硝酸钾、氯化钠、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量为硝酸钾0.3％、氯化钠0.1％，糖蜜4％，葡萄糖1％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基b；
步骤二、液体菌种的培养
取荧光假单孢菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和苏云金杆菌先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基a进行培养，得到荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种和苏云金杆菌液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
取哈次木霉先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基b进行培养，得到哈次木霉液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
步骤三、液体菌种的熟化
将步骤二中培养后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种和哈次木霉液体菌种分别投入90～100公斤培养基中，在种子罐内25～35℃培养5～8天，熟化后备用；
步骤四、液体菌种的复合与强化
取步骤三中熟化后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种、哈次木霉液体菌种、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、琼脂、磷酸氢二钾、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成复合体，即制得该防治土传病害复合菌剂。
实施例2
本实施例中，防治土传病害复合菌剂包括如下重量份的组份：荧光假单孢菌液体菌种30份；枯草芽孢杆菌液体菌种30份；巨大芽孢杆菌液体菌种30份；苏云金杆菌液体菌种30份；哈次木霉液体菌种5份；大豆蛋白粉10份；牛肉膏2份；琼脂2份；磷酸氢二钾10份；尿素10份；糖蜜20份。
其制备方法包括如下步骤：
步骤一、培养基的制备
(1)培养基a的制备
取氨基酸、磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量为氨基酸2％、磷酸二氢钾2％、葡萄糖1％、蛋白胨0.5％、尿素0.5％、牛肉膏1％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基a；
(2)培养基b的制备
取硝酸钾、氯化钠、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量为硝酸钾0.5％、氯化钠0.2％，糖蜜5％，葡萄糖2％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基b；
步骤二、液体菌种的培养
取荧光假单孢菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和苏云金杆菌先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基a进行培养，得到荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种和苏云金杆菌液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
取哈次木霉先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基b进行培养，得到哈次木霉液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
步骤三、液体菌种的熟化
将步骤二中培养后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种和哈次木霉液体菌种分别投入90～100公斤培养基中，在种子罐内25～35℃培养5～8天，熟化后备用；
步骤四、液体菌种的复合与强化
取步骤三中熟化后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种、哈次木霉液体菌种、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、琼脂、磷酸氢二钾、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成复合体，即制得该防治土传病害复合菌剂。
实施例3
本实施例中，防治土传病害复合菌剂包括如下重量份的组份：荧光假单孢菌液体菌种35份；枯草芽孢杆菌液体菌种35份；巨大芽孢杆菌液体菌种35份；苏云金杆菌液体菌种35份；哈次木霉液体菌种7份；大豆蛋白粉12份；牛肉膏3份；琼脂3份；磷酸氢二钾12份；尿素12份；糖蜜25份。
其制备方法包括如下步骤：
步骤一、培养基的制备
(1)培养基a的制备
取氨基酸、磷酸二氢钾、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量为氨基酸2.5％、磷酸二氢钾2.5％、葡萄糖1.5％、蛋白胨0.8％、尿素0.8％、牛肉膏1.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基a；
(2)培养基b的制备
取硝酸钾、氯化钠、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量为硝酸钾0.8％、氯化钠0.3％，糖蜜8％，葡萄糖3％的混合液，ph值6.5～7.5，得培养基b；
步骤二、液体菌种的培养
取荧光假单孢菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和苏云金杆菌先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基a进行培养，得到荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种和苏云金杆菌液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
取哈次木霉先在无菌室纯化复壮，然后分别用500克培养基b进行培养，得到哈次木霉液体菌种；培养条件为25～30℃摇床培养24～72小时；
步骤三、液体菌种的熟化
将步骤二中培养后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种和哈次木霉液体菌种分别投入90～100公斤培养基中，在种子罐内25～35℃培养5～8天，熟化后备用；
步骤四、液体菌种的复合与强化
取步骤三中熟化后的荧光假单孢菌液体菌种、枯草芽孢杆菌液体菌种、巨大芽孢杆菌液体菌种、苏云金杆菌液体菌种、哈次木霉液体菌种、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、琼脂、磷酸氢二钾、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成复合体，即制得该防治土传病害复合菌剂。
以上所述仅为本发明示意性的具体实施方式，并非用以限定本发明的范围。任何本领域的技术人员，在不脱离本发明的构思和原则的前提下所作出的等同变化与修改，均应属于本发明保护的范围。