一种用于检测犬副流感病毒试剂盒的制作方法

本发明涉及病毒检测技术领域，特别涉及一种用于检测犬副流感病毒试剂盒。

背景技术：

犬副流感是由犬副流感病毒(canineparainfluenzavirus，cpiv，下文称之为cpiv)引起犬的一种传染性疾病。该病流行广泛，病毒侵害犬呼吸系统，引起呼吸系统炎症，临床表现为发热、咳漱、流涕，常和细菌、支原体及其他病毒混合感染，使犬病情加重。犬副流感是目前养犬业，尤其是宠物犬的主要传染病之一。

cpiv是腮腺炎病毒属，副黏病毒科成员，病毒基因组为单链，不分节段，负链rna病毒，长约15kb，包含编码8个结构蛋白(np、p、v、m、sh、hn、f、l)的7段基因。其中，核衣壳蛋白(np)为病毒核衣壳的主要组成成分，含量最高，与病毒rna结合，高度保守，与病毒粒子的组装、复制和刺激机体产生免疫应答等密切相关。np蛋白在病毒感染初期即可诱导机体产生强烈的抗体反应并产生高滴度的特异性抗体。

随着国民生活水平的提高，宠物犬饲养量逐年上升，因此对犬和犬主人的健康保驾护航，加强犬副流感的检测及防治非常重要。迄今，国际上用于犬副流感检测的方法可以分为抗原检测和抗体检测两大类。对抗原的检测主要包括病毒的分离鉴定，rt-pcr，胶体金试纸条等。而针对抗体的检测方法有免疫荧光法，中和实验和血凝抑制试验等，atp荧光检测仪器是通过微弱荧光通过光电传感器转换为电信号，通过模数转换，结合单片机完成数据读取分析，从而得出检测结果，然而现有的atp荧光检测仪器在检测过程中，为加强信号传输，通常会设置放大电路，然而放大电路会产生偏置电流，引起误差电压，从而影响光电传感器的检测信号，降低了检测精确度，同时其整体的遮光效果较差，也易影响检测数据。

技术实现要素：

本发明用于解决上述不足，提供了一种用于检测犬副流感病毒试剂盒，降低了检测误差，提高了检测特异性。

本发明所解决的技术问题可以采用以下技术方案来实现：

一种用于检测犬副流感病毒试剂盒，包括遮光检测盒、all-readypcrbeads全预混冻干粉、阳性对照组、阴性对照组、光电检测器，所述遮光检测盒与所述光电检测器配合安装，所述光电检测器内设有一光电检测模块，所述all-readypcrbeads全预混冻干粉包括犬副流感病毒rna荧光定量pcr检测所需的反转录酶、核酸扩增酶、反应buffer及特异性引物和探针；所述阴性对照组采用无犬副流感病毒rna的酶水，阳性对照组为体外转录犬副流感病毒rna，所述光电检测模块包括一光电二极管，所述光电二极管阳极端连接一误差校对电路，所述光电二极管阴极端连接一运算反馈电路，所述误差校对电路另一端连接第一放大电路，所述光电二极管输出端处连接设有第二放大电路，所述光电二极管通过测量槽与所述遮光检测盒配合安装，所述遮光检测盒内设有一检测腔，所述检测腔呈上下垂直贯通结构，所述检测腔顶端设有置样槽，底端设有对接槽，所述对接槽与所述测量槽对应配合。

所述误差校对电路由校对电容、校对电阻及校对pin二极管相互并联连接构成，所述运算反馈电路由反馈电容、反馈电阻及反馈pin二极管相互并联连接构成，所述校对电容和反馈电容型号相同，所述校对电阻和所述反馈电阻型号相同，所述校对pin二极管和所述反馈pin二极管型号相同。

所述第一放大电路和所述第二放大电路均采用ad8605放大器。

所述遮光检测盒顶端设有一遮光盖，所述遮光盖用于封盖所述置样槽。

还包括一样品架，所述样品架上设有若干试管孔。

本发明通过与现有技术相比具有如下有益效果：本发明通过优化设计，结合遮光检测盒并优化光电检测模块，降低了检测误差，提高了检测特异性。

本发明的特点可参阅本案图式及以下较好实施方式的详细说明而获得清楚地了解。

附图说明

图1为本发明的整体结构示意图；

图2为本发明的光电检测模块电路结构示意图；

图3为本发明的误差校对电路结构示意图；

图4为本发明的运算反馈电路结构示意图；

图5为本发明的第一放大电路结构示意图；

图6为本发明的第二放大电路结构示意图；

图7为本发明的遮光盖与置样槽安装结构示意图；

图8为本发明的对接槽与测量槽安装剖视结构示意图。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体图示，进一步阐述本发明。

如图1至图8所示，本发明提供的一种用于检测犬副流感病毒试剂盒，包括遮光检测盒1、all-readypcrbeads全预混冻干粉、阳性对照组、阴性对照组、光电检测器3，遮光检测盒1与光电检测器3配合安装，所述all-readypcrbeads全预混冻干粉包括犬副流感病毒rna荧光定量pcr检测所需的反转录酶、核酸扩增酶、反应buffer及特异性引物和探针，加入提取的样品rna并补足20ul体积的水后即可直接进行荧光定量pcr检测；所述阴性对照组采用无犬副流感病毒rna的酶水，阳性对照组为体外转录犬副流感病毒rna，光电检测器3内设有一光电检测模块，光电检测模块包括一光电二极管，光电二极管优选采用硅光电二极管，光电二极管阳极端连接一误差校对电路，光电二极管阴极端连接一运算反馈电路，误差校对电路另一端连接第一放大电路，光电二极管输出端处连接设有第二放大电路，输出端用于连接单片机，电信号通过在输出端完成模数转换后传输至单片机内，单片机通过内部运算处理完成数据读取，结合设置误差校对电路可以降低第一放大电路和第二放大电路内偏置电流产生的误差，当经流放大器反相输入端的电流为i1时，同相输入端的电流为i2，则通过误差校对电路和运算反馈电路，可以得出由偏置电流引起的误差电压为i1*反馈电阻r4阻值-i2*校对电阻r3阻值，其可以大大降低误差值，从而增加检测精确度，光电二极管通过测量槽31与遮光检测盒1配合安装，测量槽31位于光电检测器3上，遮光检测盒1内设有一检测腔13，检测腔13呈上下垂直贯通结构，检测腔13顶端设有置样槽12，方便试样放置，底端设有对接槽14，对接槽14与测量槽31对应配合，对接槽14与测量槽31采用错位对接结构，增加遮光效果。

本发明误差校对电路由校对电容c3、校对电阻r3及校对pin二极管pin1相互并联连接构成，运算反馈电路由反馈电容c4、反馈电阻r4及反馈pin二极管pin2相互并联连接构成，校对电容c3和反馈电容c4型号相同，校对电阻r3和反馈电阻r4型号相同，校对电阻r3和反馈电阻r4优选采用陶瓷电阻或薄膜电阻，校对pin二极管pin1和反馈pin二极管pin2型号相同。

本发明第一放大电路和第二放大电路均采用ad8605放大器。

本发明遮光检测盒1顶端设有一遮光盖11，遮光盖11用于封盖置样槽12。

本发明还包括一样品架2，样品架2上设有若干试管孔21，方便试样放置。

本具体实施使用时，在高效反转录酶的作用下，以rna为模板，以引物为起点合成与rna模板互补的cdna链。在taq酶的作用下，经高温变性、中文退火及延伸的循环，使特异dna片段的拷贝数放大，经荧光素标记的探针与扩增的dna杂交，利用taq聚合酶的5′-3′外切活性，使荧光探针的报告基因与淬灭基因团分离，发出特异性荧光信号，利用优化后的荧光检测装置进行特异性荧光信号的检测，根据样品的cq值的大小及扩增曲线的形成情况判定结果，结合遮光检测盒并优化光电检测模块，降低了检测误差，提高了检测特异性。

由技术常识可知，本发明可以通过其它的不脱离其精神实质或必要特征的实施方案来实现。因此，上述公开的实施方案，就各方面而言，都只是举例说明，并不是仅有的。所有在本发明范围内或在等同于本发明的范围内的改变均被本发明包含。