本发明涉及一种烟用香料，具体涉及一种以菊苣根为原料制备得到的卷烟用香料。同时，本发明还涉及所述卷烟用香料的制备方法和应用，属于烟用添加剂技术领域。
背景技术：
香精香料对卷烟产品的口味起着关键性作用。目前大部分的香料都是通过化学合成方法得到，但化学合成的香料不仅成本高、合成困难，而且对环境和健康会造成一定影响。通过天然动植物直接提取的香料又存在提取成本高，原料有限等问题。利用微生物技术发酵植物材料制备得到的香料同属于天然香料级别，且在提高产品质量的同时，可以节约资源，降低成本。
目前有枯草芽孢杆菌van3用于提高烟丝品质的研究，然而，其发酵时间长达30天，且吸味苦涩，不能够很好的改善刺激性，香气量不足。
菊苣是一种灌木丛生的多年生草本植物，根肉质、短粗。在我国云南、四川（成都）及广东等有引种栽培。菊苣为药食两用植物，菊苣叶可调制生菜，根含菊糖及芳香族物质，具有清热解毒，利尿消肿，健胃等功效，目前被广泛用于咖啡、饮料、茶、保健品、食品、中药中。但现有技术中，对菊苣的营养物质和香气利用微生物进行发酵提取，并作为烟用香精香料应用到卷烟中的方法目前还没有相关报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种菊苣根制烟用香料，将其应用于卷烟，以提升卷烟产品的香气浓度和香气量。
本发明的另一目的是提供一种制备所述菊苣根烟用香料的方法。
本发明的目的还在于提供所述菊苣根烟用香料在卷烟生产的应用。
本发明的目的通过下述技术方案予以实现。
*除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。
一种菊苣根烟用香料，其特征在于：将菊苣根粉碎后，用枯草芽孢杆菌bacillussubtilis进行发酵，发酵所得物即为所需的烟用香料；所述的枯草芽孢杆菌bacillussubtilis保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏号为cgmccno.4091；保藏日期：2010年08月16日。枯草芽孢杆菌bacillussubtilis从烤烟表面分离而得。
上述菊苣根发酵提取物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为30℃～38℃、100～180r/min振荡培养，培养时间为6～24h；
（2）将菊苣根粉碎后，添加10～20倍量的蒸馏水，灭菌制成待发酵样品；
（3）将活化好的菌液接种于待发酵样品中，接种量为0.5%-2.5%；接种后的发酵培养条件同活化培养条件；培养时间为6～24h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为45℃～65℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物。
上述的菊苣根烟用香料在卷烟中的应用，其特征在于：在卷烟制丝加料阶段，将所述的菊苣根制烟用香料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为5～20g/箱烟丝。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
1.本发明首创性地利用枯草芽孢杆菌bacillussubtilis发酵菊苣根制备烟用香精香料，并以底料形式添加到卷烟中。
2.制成香料后，菊苣根中的有效成分以及其特有的香气在与烟丝复合后，能够丰富烟香，提升香气量，进一步减少青杂气。
3.本发明工艺简单，操作容易，成本低，适于推广应用，对促进卷烟工业健康发展具有积极意义。
具体实施方式
下面将结合实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是对本发明一部分实例，而不是全部的实例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。所用的lb(luria-bertani)培养基：1%蛋白胨，1%氯化钠，0.5%酵母提取物。
实施例1
本实施例的菊苣根烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091在lb液体培养基中进行活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为37℃、120r/min振荡培养，培养时间为12h；
（2）取粉碎后的菊苣根粉100g，添加15倍量的水，在121℃下灭菌30min，制成待发酵样品；
（3）利用枯草芽孢杆菌cgmccno.4091对其进行发酵，将步骤（1）中活化好的菌液接种于待发酵样品中，菌株接种量为1%，发酵条件为：转速120rmp，发酵温度37℃，发酵时间12h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为50℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物，保存待用。
（5）用gc-ms对步骤（4）所得的烟用香料的致香成分进行检测，检测结果表明，该发酵所得物中含量较高的致香物质主要有糠醛、棕榈酸、亚油酸、棕榈酸乙酯、己酸、2-乙酰基呋喃、2-乙酰基吡咯、糠醇、亚油酸乙酯、2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮、3-甲基戊酸、2-甲基四氢呋喃-3-酮、2-环戊烯-1,4-二酮、芹菜脑、苯乙醛、4-乙烯基愈创木酚、棕榈酸甲酯、吡啶、香兰素、丁香酚、2-乙酰基吡啶、吡嗪等。
（6）将步骤（4）所得的烟用香料作为底料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为8g/箱，并以不添加香料的烟叶为对照。将处理组和对照组的烟丝放入恒温恒湿箱内平衡24h后，制成卷烟，样品和对照均随机编号，由评吸专家组成的评吸小组进行感官评吸。加香评吸试验结果表明，该香料添加剂谐调烟香，可明显提高烟气浓度、烟气细腻醇和、降低刺激性、掩盖杂气、余味干净，并赋予卷烟一种清新的特殊香韵。
实施例2
本实施例的菊苣根烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091在lb液体培养基中进行活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为37℃、120r/min振荡培养，培养时间为12h；
（2）取粉碎后的菊苣根粉100g，添加20倍量的水，在121℃下灭菌30min，制成待发酵样品；
（3）利用枯草芽孢杆菌cgmccno.4091对其进行发酵，将步骤（1）中活化好的菌液接种于待发酵样品中，菌株接种量为2%，发酵条件为：转速120rmp，发酵温度37℃，发酵时间12h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为50℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物，保存待用。
（5）对步骤（4）所得的烟用香料的致香成分进行检测，检测结果表明，该发酵所得物中含量较高的致香物质主要有糠醛、棕榈酸、亚油酸、棕榈酸乙酯、己酸、2-乙酰基呋喃、2-乙酰基吡咯、糠醇、亚油酸乙酯、2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮、3-甲基戊酸、2-甲基四氢呋喃-3-酮、2-环戊烯-1,4-二酮、芹菜脑、苯乙醛、4-乙烯基愈创木酚、棕榈酸甲酯、吡啶、香兰素、丁香酚、2-乙酰基吡啶、吡嗪等。
（6）将步骤（4）所得的烟用香料作为底料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为10g/箱，并以不添加香料的烟叶为对照。将处理组和对照组的烟丝放入恒温恒湿箱内平衡24h后，制成卷烟，样品和对照均随机编号，由评吸专家组成的评吸小组进行感官评吸。加香评吸试验结果表明，该香料添加剂谐调烟香，掩盖杂气，减少刺激性，烟气柔和细腻，余味干净，生津。
实施例3
本实施例的菊苣根烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091在lb液体培养基中进行活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为33℃、160r/min振荡培养，培养时间为18h；
（2）取粉碎后的菊苣根粉100g，添加15倍量的水，在121℃下灭菌30min，制成待发酵样品；
（3）利用枯草芽孢杆菌cgmccno.4091对其进行发酵，将步骤（1）中活化好的菌液接种于待发酵样品中，菌株接种量为1%，发酵条件为：转速160rmp，发酵温度33℃，发酵时间18h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为50℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物，保存待用。
（5）对步骤（4）所得的烟用香料的致香成分进行检测，检测结果表明，该发酵所得物中含量较高的致香物质主要有糠醛、棕榈酸、亚油酸、棕榈酸乙酯、己酸、2-乙酰基呋喃、2-乙酰基吡咯、糠醇、亚油酸乙酯、2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮、3-甲基戊酸、2-甲基四氢呋喃-3-酮、2-环戊烯-1,4-二酮、芹菜脑、苯乙醛、4-乙烯基愈创木酚、棕榈酸甲酯、吡啶、香兰素、丁香酚、2-乙酰基吡啶、吡嗪等。
（6）将步骤（4）所得的烟用香料作为底料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为12g/箱，并以不添加香料的烟叶为对照。将处理组和对照组的烟丝放入恒温恒湿箱内平衡24h后，制成卷烟，样品和对照均随机编号，由评吸专家组成的评吸小组进行感官评吸。加香评吸试验结果表明，该香料添加剂谐调烟香，提升香气质，烟气浓度，掩盖杂气，减少刺激性，烟气柔和细腻，余味干净舒适。
实施例4
本实施例的菊苣根烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091在lb液体培养基中进行活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为33℃、160r/min振荡培养，培养时间为18h；
（2）取粉碎后的菊苣根粉100g，添加20倍量的水，在121℃下灭菌30min，制成待发酵样品；
（3）利用枯草芽孢杆菌cgmccno.4091对其进行发酵，将步骤（1）中活化好的菌液接种于待发酵样品中，菌株接种量为2%，发酵条件为：转速160rmp，发酵温度33℃，发酵时间18h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为50℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物，保存待用。
（5）对步骤（4）所得的烟用香料的致香成分进行检测，检测结果表明，该发酵所得物中含量较高的致香物质主要有糠醛、棕榈酸、亚油酸、棕榈酸乙酯、己酸、2-乙酰基呋喃、2-乙酰基吡咯、糠醇、亚油酸乙酯、2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮、3-甲基戊酸、2-甲基四氢呋喃-3-酮、2-环戊烯-1,4-二酮、芹菜脑、苯乙醛、4-乙烯基愈创木酚、棕榈酸甲酯、吡啶、香兰素、丁香酚、2-乙酰基吡啶、吡嗪等。
（6）将步骤（4）所得的烟用香料作为底料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为15g/箱，并以不添加香料的烟叶为对照。将处理组和对照组的烟丝放入恒温恒湿箱内平衡24h后，制成卷烟，样品和对照均随机编号，由评吸专家组成的评吸小组进行感官评吸。加香评吸试验结果表明，该香料添加剂谐调烟香，提升香气质、烟气浓度，烟气柔和细腻，掩盖杂气，减少刺激性，余味干净舒适。
实施例5
本实施例的菊苣根烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091在lb液体培养基中进行活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为30℃、160r/min振荡培养，培养时间为24h；
（2）取粉碎后的菊苣根粉100g，添加15倍量的水，在121℃下灭菌30min，制成待发酵样品；
（3）利用枯草芽孢杆菌cgmccno.4091对其进行发酵，将步骤（1）中活化好的菌液接种于待发酵样品中，菌株接种量为1%，发酵条件为：转速160rmp，发酵温度30℃，发酵时间24h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为50℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物，保存待用。
（5）对步骤（4）所得的烟用香料的致香成分进行检测，检测结果表明，该发酵所得物中含量较高的致香物质主要有糠醛、棕榈酸、亚油酸、棕榈酸乙酯、己酸、2-乙酰基呋喃、2-乙酰基吡咯、糠醇、亚油酸乙酯、2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮、3-甲基戊酸、2-甲基四氢呋喃-3-酮、2-环戊烯-1,4-二酮、芹菜脑、苯乙醛、4-乙烯基愈创木酚、棕榈酸甲酯、吡啶、香兰素、丁香酚、2-乙酰基吡啶、吡嗪等。
（6）将步骤（4）所得的烟用香料作为底料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为10g/箱，并以不添加香料的烟叶为对照。将处理组和对照组的烟丝放入恒温恒湿箱内平衡24h后，制成卷烟，样品和对照均随机编号，由评吸专家组成的评吸小组进行感官评吸。加香评吸试验结果表明，该香料添加剂谐调烟香，烟气浓度提升明显，香气细腻柔和，抑制杂气，余味干净。
实施例6
本实施例的菊苣根烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
（1）取枯草芽胞杆菌cgmccno.4091在lb液体培养基中进行活化培养，得到枯草芽孢杆菌活化菌液；菌种活化培养条件为30℃、160r/min振荡培养，培养时间为24h；
（2）取粉碎后的菊苣根粉100g，添加20倍量的水，在121℃下灭菌30min，制成待发酵样品；
（3）利用枯草芽孢杆菌cgmccno.4091对其进行发酵，将步骤（1）中活化好的菌液接种于待发酵样品中，菌株接种量为2%，发酵条件为：转速160rmp，发酵温度30℃，发酵时间24h；
（4）发酵液经过滤、离心后，取上清液，在温度为50℃条件下减压浓缩成浸膏，即为所需的菊苣根发酵提取物，保存待用。
（5）对步骤（4）所得的烟用香料的致香成分进行检测，检测结果表明，该发酵所得物中含量较高的致香物质主要有糠醛、棕榈酸、亚油酸、棕榈酸乙酯、己酸、2-乙酰基呋喃、2-乙酰基吡咯、糠醇、亚油酸乙酯、2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮、3-甲基戊酸、2-甲基四氢呋喃-3-酮、2-环戊烯-1,4-二酮、芹菜脑、苯乙醛、4-乙烯基愈创木酚、棕榈酸甲酯、吡啶、香兰素、丁香酚、2-乙酰基吡啶、吡嗪等。
（6）将步骤（4）所得的烟用香料作为底料均匀地喷洒在烟丝上，添加量为12g/箱，并以不添加香料的烟叶为对照。将处理组和对照组的烟丝放入恒温恒湿箱内平衡24h后，制成卷烟，样品和对照均随机编号，由评吸专家组成的评吸小组进行感官评吸。加香评吸试验结果表明，该香料添加剂谐调烟香，香气细腻柔和，掩盖杂气，减少刺激性，增加甜感，余味干净，生津。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。