背景技术:
桑葚又名桑椹,为桑科植物桑树的果穗,桑葚喜温暖湿润的气候,稍耐荫,全国各地均有栽培。桑葚中含有多种营养成分,其中花青素含量很高,花青素具有很强的抗氧化能力,其改善视力的功能受到广泛的关注。
桑葚中主要是纤维素类成份,用一般的溶剂提取法很难将其中的花青素提取出,而花青素在高温条件下易分解,用热提取法也会损失大部分的花青素。
技术实现要素:
本发明的目的是提供酶法提取桑葚中花青素的方法,解决传统提取方法提取率不高的问题。
本发明是这样来实现的:桑葚主要是纤维素类物质,花青素很难溶出,本发明采用纤维素酶破坏细胞壁组成,使胞内的花青素能够溶出。
主要步骤是:将桑葚至于ph3.0-ph5.0的柠檬酸溶液中,加入2mg/g-10mg/g的纤维素酶,料液比为1g:5ml—1g:20ml,在40℃-60℃酶解60min-120min,2000r/min离心10min,取上清液1ml分别用ph1.0和ph4.0的缓冲液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值,以吸光值表示花青素浓度;剩余上清液减压浓缩后真空干燥,测定其提取率。
本发明解决了桑葚中花青素难以溶出的问题,使花青素的提取率提高,具有以下特点:
第一:采用纤维素酶破坏桑葚纤维素细胞,使花青素容易溶出,花青素的提取率比一般的有机溶剂提取、热提取高。
第二:采用酸溶液提取,可避免产物中有机溶剂残留问题,对于食用花青素更加安全,符合现在食品安全的规范。
具体实施方式::以下通过实施实例对本发明作进一步说明,但其并不限制本发明的保护范围。
实施例(一):
称取桑葚10g,按1g:14ml的料液比加入用柠檬酸和柠檬酸钠调节到ph4.0的溶液,按5mg/g加入纤维素酶,50℃水浴加热90min,酶解后2000r/min,离心10min,取上清液1ml,分别用ph1.0和ph4.0缓冲溶液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值。a=0.33,一次提取率为2.4%。
实施例(二)
称取桑葚10g,按1g:14ml的料液比加入用柠檬酸和柠檬酸钠调节到ph4.0的溶液,按2mg/g加入纤维素酶,50℃水浴加热90min,酶解后2000r/min,离心10min,取上清液1ml,分别用ph1.0和ph4.0缓冲溶液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值。a=0.304,一次提取率为1.8%。
实施例(三)
称取桑葚10g,按1g:14ml的料液比加入用柠檬酸和柠檬酸钠调节到ph5.0的溶液,按5mg/g加入纤维素酶,50℃水浴加热90min,酶解后2000r/min,离心10min,取上清液1ml,分别用ph1.0和ph4.0缓冲溶液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值。a=0.306,一次提取率为2.1%。
实施例(四)
称取桑葚10g,按1g:14ml的料液比加入用柠檬酸和柠檬酸钠调节到ph4.0的溶液,按5mg/g加入纤维素酶,60℃水浴加热90min,酶解后2000r/min,离心10min,取上清液1ml,分别用ph1.0和ph4.0缓冲溶液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值。a=0.31,一次提取率为2.06%。
对比实施例(一):
称取桑葚10g,按1g:14ml的料液比加入用柠檬酸和柠檬酸钠调节到ph4.0的溶液,50℃水浴加热90min,酶解后2000r/min,离心10min,取上清液1ml,分别用ph1.0和ph4.0缓冲溶液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值。a=0.128,一次提取率为1.7%。
对比实施例(二):
称取桑葚10g,按1g:14ml的料液比加入甲醇,用柠檬酸和柠檬酸钠调节到ph4.0的溶液,提取90min,提取后2000r/min,离心10min,取上清液1ml,分别用ph1.0和ph4.0缓冲溶液定容至25ml,在520nm和700nm处测定其吸光值。a=0.297,一次提取率为2.1%。
本发明优点:
(1)采用酶提取法,一次提取率提高了35%。
(2)本发明选择合适的酶用量、ph、料液比、温度和酶解时间,成本最低。
无有机溶剂残留,提取的花青素做为食品添加剂更加安全。