一种绵羊促卵泡激素基因重组表达制备方法与流程

文档序号:15457469发布日期:2018-09-15 01:30阅读:来源:国知局
技术总结
本发明提供一种绵羊促卵泡激素基因重组表达制备方法,包括以下步骤:获取绵羊FSH‑αβ氨基酸序列,对其进行密码子优化,在上游依次添加了BamH I酶切位点、kozak序列和TG,下游添加了CTP序列和EcoRI酶切位点,得到重组FSH‑αβ,将其连接至载体上,得到pcDNA3.1‑FSHαβ;将pcDNA3.1‑FSHαβ在大肠杆菌中进行扩增,提取重组质粒;将重组质粒转染CHO‑K1‑S2全悬浮细胞,转染后,加入G418继续培养,收集细胞上清液。应用本发明的方法得到的FSH蛋白为分泌性表达,培养后CHO‑K1‑S2‑FSH细胞上清中检测到FSH的平均含量为87mIU/mL。

技术研发人员:冯若飞;王兴陇;李向茸;张海霞;李琼毅;李倩
受保护的技术使用者:西北民族大学
技术研发日:2018.03.20
技术公布日:2018.09.14

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