本发明涉及属于植物提取技术领域，特别涉及一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法。
背景技术：
菊芋又名地姜、洋姜和鬼子姜，是菊科向日葵属多年生草本植物，原产北美洲，十七世纪传入欧洲，后传入中国。菊芋叶片中含有丰富的营养物质，并含有天然生物抗氧化剂—绿原酸，据测量，干菊芋叶片中绿原酸含量可达3％左右。绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。
目前，国内主要以金银花、杜仲等高价药用资源为原料提取绿原酸，资源有限且价格昂贵，中国专利201210531489.6从烟草中提取分离绿原酸，但烟草中含有多种有害物质，其安全性得不到保障。加之，菊芋的利用方式相对单一，对其叶片利用的研究也鲜有报道，如何能充分利用菊芋叶片丰富的营养物质及开发其保健养生功能，成为今后研究急需解决的问题。
技术实现要素：
本发明为解决上述技术问题，本发明提供了一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法。
具体是通过以下技术方案来实现的：
一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法，包括步骤如下：1)发酵；2)超声波处理；3)酶处理；4)微波处理；5)树脂吸附；6)硅藻土吸附。
上述方法中，所述发酵是将菊芋叶在蒸汽环境中处理至叶片表面含水量为35-45％，然后打浆，得菊芋叶汁，并按添加菊芋叶汁3-7％的菊粉酶液于温度为37-45℃条件下微波处理3-8h，再水浴保温处理8-12h；然后加入菊芋叶汁质量10-15％的葡萄糖、菊芋叶汁质量4-7％d瑞氏乳杆菌、菊芋叶汁质量80-90％的碳酸水，于温度为10-15℃条件下恒温发酵2-3d。
上述方法中，所述超声波处理，是将发酵产物置于功率为160-190w的超声条件下处理15min。
上述方法中，所述酶处理是向超声波处理产物中加入其质量0.3-0.8％的复合酶，于水浴温度为10-15℃条件下处理7-12h。
上述方法中，所述微波处理是将酶处理产物置于功率为230-250w的微波条件下处理20min。
上述方法中，所述树脂吸附是将微波处理产物通过大孔树脂柱，动态吸附至饱和，用ph＝5.5-6.5的盐酸溶液以6-8bv/h的流速淋洗大孔树脂柱至流出液无色。
上述方法中，所述硅藻土吸附是向树脂吸附产物中加入脂吸附产物质量45-50％的改性硅藻土搅拌均匀后加热处理至液体被完全吸收，然后取出改性硅藻土进行挤压，收集挤压液，即得绿原酸。
上述方法中，所述蒸汽环境，其蒸汽温度为120-128℃。
上述方法中，所述复合酶以重量份计包括：木瓜蛋白酶2-3份、木质素酶5-9份、果胶酶4-7份、酪氨酸酶1-2份、过氧化物酶0.6-1.8份、纤维素酶8-14份。
上述方法中，所述大孔树脂是符合药用要求的极性或中极性大孔吸附树脂。
上述方法中，所述改性硅藻土是按硅藻土：竹叶粉＝(13-17)：1的质量比进行混合，并置于研磨机中粉磨至180-260目，然后在功率为160-200w的超声条件下处理15min。
具体为：
1)发酵：将菊芋叶在蒸汽环境中处理至叶片表面含水量为35-45％，然后打浆，得菊芋叶汁，并按添加菊芋叶汁3-7％的菊粉酶液于温度为37-45℃条件下微波处理3-8h，再水浴保温处理8-12h；然后加入菊芋叶汁质量10-15％的葡萄糖、菊芋叶汁质量4-7％d瑞氏乳杆菌、菊芋叶汁质量80-90％的碳酸水，于温度为10-15℃条件下恒温发酵2-3d；
2)超声波处理：将步骤1)所得物置于功率为160-190w的超声条件下处理15min；
3)酶处理：向步骤2)所得物中加入其质量0.3-0.8％的复合酶，于水浴温度为10-15℃条件下处理7-12h；
4)微波处理：将步骤3)所得物置于功率为230-250w的微波条件下处理20min；
5)树脂吸附：将步骤4)中所得物通过大孔树脂柱，动态吸附至饱和，用ph＝5.5-6.5的盐酸溶液以6-8bv/h的流速淋洗大孔树脂柱至流出液无色；
6)硅藻土吸附：向步骤5)所得物中加入步骤5)所得物质量45-50％的改性硅藻土搅拌均匀后加热处理至液体被完全吸收，然后取出改性硅藻土进行挤压，收集挤压液，即得绿原酸。
本发明的有益效果在于：
本发明以菊芋叶为原料，选用菊粉酶、瑞士乳杆菌进行发酵处理，使得菊芋产酒，进而避免了浸提绿原酸过程中有机溶剂的使用，并且有助于绿原酸的溶出；减少了生产安全隐患，避免使用助剂加大对环境造成的二次污染，有利于环境保护，同时还减少了助剂洗脱工序，大大降低了绿原酸的提取成本。
本发明先利用超声波激发，使得木质素、纤维素等物质被活化，再合理利用复合酶处理，有效打断阻碍绿原酸溶出的组织结构，提高植物组织通透性，减小绿原酸传质阻力，增大绿原酸提取率。
本发明再结合微波处理，抑制了微生物的生长，保证了绿原酸稳定性，提高绿原酸提取率及产品品质，因此，本发明方法所得绿原酸提取率高达99.3％。
本发明利用树脂及硅藻土进行吸附，吸附速率快，大孔树脂及硅藻土可重复利用，并且，吸附了多种成分的硅藻土还可用于建筑等其他领域，提高了绿原酸的纯度，因此，本发明方法所得绿原酸纯度高达97.9％。
本发明方法的原料廉价易得，生产成本低，操作简单，方法绿色环保。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法，步骤包括：
1)发酵：将菊芋叶在蒸汽温度为128℃的条件下蒸汽环境中处理至叶片表面含水量为45％，然后打浆，得菊芋叶汁，并按添加菊芋叶汁7％的菊粉酶液于温度为45℃条件下微波处理8h，再水浴保温处理12h；然后加入菊芋叶汁质量15％的葡萄糖、菊芋叶汁质量7％的瑞氏乳杆菌、菊芋叶汁质量90％的碳酸水，于温度为15℃条件下恒温发酵3d；
2)超声波处理：将步骤1)所得物置于功率为190w的超声条件下处理15min；
3)酶处理：向步骤2)所得物中加入其质量0.8％的复合酶，于水浴温度为15℃条件下处理12h；
4)微波处理：将步骤3)所得物置于功率为250w的微波条件下处理20min；
5)树脂吸附：将步骤4)中所得去通过大孔树脂柱，动态吸附至饱和，用ph＝6.5的盐酸溶液以8bv/h的流速淋洗大孔树脂柱至流出液无色；
6)硅藻土吸附：向步骤5)所得物中加入步骤5)所得物质量45-50％的改性硅藻土搅拌均匀后加热处理至液体被完全吸收，然后取出改性硅藻土进行挤压，收集挤压液，即得绿原酸；
所述复合酶包括：木瓜蛋白酶3g、木质素酶9g、果胶酶7g、酪氨酸酶2g、过氧化物酶1.8g、纤维素酶14g；
所述大孔树脂是符合药用要求的极性或中极性大孔吸附树脂；
所述改性硅藻土是按硅藻土：竹叶粉＝17：1的质量比进行混合，并置于研磨机中粉磨至260目，然后在功率为200w的超声条件下处理15min。
实施例2
本实施例提供一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法，步骤包括：
1)发酵：将菊芋叶在蒸汽温度为120℃的条件下蒸汽环境中处理至叶片表面含水量为35％，然后打浆，得菊芋叶汁，并按添加菊芋叶汁3％的菊粉酶液于温度为37℃条件下微波处理3h，再水浴保温处理8h；然后加入菊芋叶汁质量10％的葡萄糖、菊芋叶汁质量4％的瑞氏乳杆菌、菊芋叶汁质量80％的碳酸水，于温度为10℃条件下恒温发酵2d；
2)超声波处理：将步骤1)所得物置于功率为160w的超声条件下处理15min；
3)酶处理：向步骤2)所得物中加入其质量0.3％的复合酶，于水浴温度为10℃条件下处理7h；
4)微波处理：将步骤3)所得物置于功率为230w的微波条件下处理20min；
5)树脂吸附：将步骤4)中所得去通过大孔树脂柱，动态吸附至饱和，用ph＝5.5的盐酸溶液以6bv/h的流速淋洗大孔树脂柱至流出液无色；
6)硅藻土吸附：向步骤5)所得物中加入步骤5)所得物质量45％的改性硅藻土搅拌均匀后加热处理至液体被完全吸收，然后取出改性硅藻土进行挤压，收集挤压液，即得绿原酸；
所述复合酶包括：木瓜蛋白酶2g、木质素酶5g、果胶酶4g、酪氨酸酶1g、过氧化物酶0.6g、纤维素酶8g；
所述大孔树脂是符合药用要求的极性或中极性大孔吸附树脂；
所述改性硅藻土是按硅藻土：竹叶粉＝13：1的质量比进行混合，并置于研磨机中粉磨至180目，然后在功率为160w的超声条件下处理15min。
实施例3
本实施例提供一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法，步骤包括：
1)发酵：将菊芋叶在蒸汽温度为125℃的条件下蒸汽环境中处理至叶片表面含水量为40％，然后打浆，得菊芋叶汁，并按添加菊芋叶汁5％的菊粉酶液于温度为40℃条件下微波处理5h，再水浴保温处理10h；然后加入菊芋叶汁质量12％的葡萄糖、菊芋叶汁质量5％d瑞氏乳杆菌、菊芋叶汁质量85％的碳酸水，于温度为15℃条件下恒温发酵3d；
2)超声波处理：将步骤1)所得物置于功率为175w的超声条件下处理15min；
3)酶处理：向步骤2)所得物中加入其质量0.5％的复合酶，于水浴温度为15℃条件下处理10h；
4)微波处理：将步骤3)所得物置于功率为240w的微波条件下处理20min；
5)树脂吸附：将步骤4)中所得去通过大孔树脂柱，动态吸附至饱和，用ph＝6.0的盐酸溶液以7bv/h的流速淋洗大孔树脂柱至流出液无色；
6)硅藻土吸附：向步骤5)所得物中加入步骤5)所得物质量48％的改性硅藻土搅拌均匀后加热处理至液体被完全吸收，然后取出改性硅藻土进行挤压，收集挤压液，即得绿原酸；
所述复合酶包括：木瓜蛋白酶2.5g、木质素酶7g、果胶酶5.5g、酪氨酸酶1.5g、过氧化物酶1.2g、纤维素酶11g；
所述大孔树脂是符合药用要求的极性或中极性大孔吸附树脂；
所述改性硅藻土是按硅藻土：竹叶粉＝15：1的质量比进行混合，并置于研磨机中粉磨至200目，然后在功率为180w的超声条件下处理15min。