本发明涉及药物化学和治疗学领域，具体涉及卵磷脂类似物、制备方法及其作为抗肿瘤药物的用途。
背景技术
卵磷脂(即磷脂酰胆碱)是磷脂的主要成分之一，卵磷脂将大脑的指令迅速传递，信息传递速度越快，记忆力越强，是健脑食物。它能增强婴儿智力，提高学习效率。尤其是胎儿，在生长发育中对卵磷脂的需求极大。此外，卵磷脂还能抗御脂肪肝及酒精肝，有效保护肝脏健康。卵磷脂的两亲性使其具有乳化功能，可以将体内的水分和油脂充分混合，避免水分大量流失，防止皮肤粗糙老化；可将多余的脂肪化为较小的乳滴排出体外，帮助产妇或肥胖者尽快恢复体形。卵磷脂还可将血液中的胆固醇和脂肪酸化为极细的颗粒，从血管中排出，从而提高高密度脂蛋白含量，使血管恢复弹性，血流畅通，被誉为“血管清道夫”。
癌症化疗是指运用药物治疗癌症的方法，可以消灭已扩散到全身各部位的癌细胞，但是化疗常常伴随严重的毒副作用，自组装的纳米制剂可有效提高化疗药物的疗效、降低毒性。卵磷脂是一种两性分子，由亲水的头部和疏水的尾部组成，可自组装成纳米粒子。通过化学键合作用使单脂肪酰甘油卵磷脂与具有抗癌作用的化合物分子结合，可以形成化疗药物-卵磷脂复合物。该复合物既能通过自组装制成相应的脂质体药物传递系统，又能有效降低药物毒性。
喜树碱(camptothecin，cpt)是从我国特有植物喜树中提取得到的生物碱，喜树碱及其衍生物已形成一类重要的抗癌药物。喜树碱e环结构中闭合的α-羟基内酯环是其保持抗肿瘤活性的必需结构，但此α-羟基内酯环在人体内易水解开环形成羧酸盐结构，这种开环形式易与人血清蛋白结合而使其丧失抗肿瘤活性。更为严重的是，开环形式的钠盐经肾脏代谢后对泌尿系统和消化系统有极大的毒副作用。另外，多数喜树碱活性衍生物难溶于水，严重地阻碍着喜树碱类衍生物在临床中的推广应用。
喜树碱衍生物的制备方法研究较多，以下给出部分文献作为参考。
美国专利104894，1990-3-1号
pct专利申请2001009139，2001-2-8号
pct专利申请9602546，1996-7-12号
jbiolchem，1985，260，14873-14878
jmedchem，1991，34(1)，98-107
jmedchem，1998，41(1)，31-37
bioorgmedchemlett，2002，12(9)，1241-1244
bioorgmedchemlett，2003，13(21)，3739-3741
bioorgmedchem，2004，12(15)，4003-4008
bioorgmedchem，2004，12(13)，3657-3662
chempharmbull，1991，39，3183-3188
cancerres，1993，53，1577-1582
cancerres，1995，55，753-760
nyacadasci，1996，803，231-246
archpharmres，1998，21，581-590
jmedchem，1995，38(3)，395-401
技术实现要素：
本发明的一个目的是提供一类结合有抗癌药物的卵磷脂类似物，有利于提高药物的抗癌活性和生物利用度。
本发明的另一个目的是提供该类卵磷脂类似物的制备方法。
本发明的再一个目的是提供该类卵磷脂类似物作为抗肿瘤药物的应用。
为了实现上述目的，本发明提供的是具有式(1)所示的卵磷脂类似物。
其中，r选自：
-ch2ch2-s-s-ch2ch2-、-ch2-s-s-ch2-、
r1选自：-ococh2(ch2)15ch3、-ococh2(ch2)6ch＝ch(ch2)7ch3、-ococh2(ch2)13ch3；
r2选自：-h、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2och3。
本发明提供制备具有(1)所示的卵磷脂类似物的方法，包括如下步骤：
(1)在干燥的有机溶剂中，喜树碱或其衍生物与相应的羧酸在偶联剂及催化剂的作用下进行酯化反应，得到具有式(2)结构的中间体a；
其中，r选自：
-ch2-ch2-s-s-ch2-ch2-、-ch2-s-s-ch2-、
r2选自：-h、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2och3；
(2)中间体a在偶联剂及催化剂的作用下与相应的1-脂肪酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱反应，制得相应的卵磷脂类似物；所述的羧酸选自3,3'-二硫代二丙酸、二硫代甘醇酸、胱氨酸；所述的1-脂肪酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱选自1-硬脂酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱、1-油酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱、1-棕榈酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱。
其中，制备卵磷脂类似物的方法中所述的有机溶剂是二氯甲烷、二甲基亚砜和n，n-二甲基甲酰胺；所述的偶联剂是n，n-二环己基碳二亚胺(dcc)、n，n-羰基二咪唑(cdi)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc.hcl)；所述的催化剂是吡啶和4-二甲氨基吡啶(dmap)。
本发明还涉及含有作为活性成分的本发明化合物及药效学上可接受载体的各种制剂。
“药效学上可接受载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，他们适合于人使用，而且有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺合，而不明显降低化合物的药效。药效学上可接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如油豆、芝麻油、花生油、橄榄油等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温)、润滑剂(如十二烷基硫酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
本发明还涉及本发明所述的化合物制备抗肿瘤药物中的应用。
体外活性筛选实验表明所述的卵磷脂类似物具有明显的抗肿瘤作用及良好的剂量依赖关系。以人卵巢癌细胞系hxb1309h为受试细胞株，测定了卵磷脂类似物的半数抑制浓度(ic50)，其中部分样品的实验结果见表1：
表1：卵磷脂类似物对xb1309的的半数抑制浓度
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细描阐述：
具有式(1)所示的卵磷脂类似物。
其中，r选自：
-ch2-ch2-s-s-ch2-ch2-、-ch2-s-s-ch2-、
r1选自：-ococh2(ch2)15ch3、-ococh2(ch2)6ch＝ch(ch2)7ch3、-ococh2(ch2)13ch3；
r2选自：-h、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2och3。
本发明提供制备具有(1)所示的卵磷脂类似物的方法，包括如下步骤：
(1)在干燥的有机溶剂中，喜树碱或其衍生物与与相应的羧酸在偶联剂及催化剂的作用下进行酯化反应，得到具有式(2)结构的中间体a；
其中，r选自：
-ch2-ch2-s-s-ch2-ch2-、-ch2-s-s-ch2-
r2选自：-h、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2och3；
(2)中间体a在偶联剂及催化剂的作用下与相应的1-脂肪酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱反应，制得相应的卵磷脂类似物；所述的羧酸选自3,3'-二硫代二丙酸、二硫代甘醇酸、胱氨酸；所述的1-脂肪酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱选自1-硬脂酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱、1-油酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱、1-棕榈酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱。
其中，制备卵磷脂类似物的方法中所述的有机溶剂是二氯甲烷、二甲基亚砜和n，n-二甲基甲酰胺；所述的偶联剂是n，n-二环己基碳二亚胺(dcc)、n，n-羰基二咪唑(cdi)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc.hcl)；所述的催化剂是吡啶和4-二甲氨基吡啶(dmap)。
本发明还涉及含有作为活性成分的本发明化合物及药效学上可接受载体的各种制剂。
“药效学上可接受载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，他们适合于人使用，而且有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺合，而不明显降低化合物的药效。药效学上可接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如油豆、芝麻油、花生油、橄榄油
等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温)、润滑剂(如十二烷基硫酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
本发明还涉及本发明所述的化合物制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明的卵磷脂类似物和制备方法在如下实施例中更详细地叙述，但实施例不构成对本发明的限制。
实施例1制备喜树碱-20-o-(3,3'-二硫代二丙酰)单酯
将2.1克(0.01摩尔)3,3'-二硫代二丙酸溶于300毫升二氯甲烷中，依次加入1克二甲氨基吡啶、3.5克(0.01摩尔)喜树碱、3克n,n'-二环己基碳酰亚胺，在室温下搅拌24小时，过滤除去沉淀，滤液减压浓缩除去溶剂，将浓缩剩余物用硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20：1),得浅黄色喜树碱-20-o-(3,3'-二硫代二丙酰)单酯3.35克，收率62％。
1hnmr(300mhz，dmso-d6，ppm)：δ0.96(3h，t，h-19)，2.10(2h，m，h-18)，2.58-2.72(4h，m，-oocch2ch2s-)，2.87-2.99(4h，m，-oocch2ch2s-),5.11(2h，s，h-5)，5.50(2h，s，h-17)，6.89(1h，d，n-h)，7.14(h，s，h-14)，7.72(1h，q，h-10)，7.87(h，t，h-11)，8.00(1h，d，h-12)，8.14(1h，d，h-9)，8.42(1h，t，n-h)，8.65(1h，s，h-7)。
esimsm/z：539.3(m-1)-
实施例2制备1-硬脂酰-2-(喜树碱-20-o-(3,3'-二硫代二丙酰)单酯)丙三醇-3-磷酸胆碱(卵磷脂类似物)
将0.540克(0.001摩尔)喜树碱-20-o-(3,3'-二硫代二丙酰)单酯溶于50毫升二甲基亚砜中，加入0.5克1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐，0.1克4-二甲氨基吡啶，室温下，搅拌3小时后加入0.523克(0.001摩尔)1-硬脂酰-sn-丙三醇-3-磷酸胆碱，室温下，搅拌72小时，将反应液倒入500毫升冰水中，过滤，在50℃下，真空干燥滤饼，将滤饼用硅胶柱层析(甲醇：氯仿：水＝25：65:2),得黄色1-硬脂酰-2-(喜树碱-20-o-(3,3'-二硫代二丙酰)单酯)丙三醇-3-磷酸胆碱0.21克(即卵磷脂类似物)，收率20％。
1hnmr(300mhz，dmso-d6，ppm)：2.58-2.72(4h，m，-oocch2ch2s-)，2.87-2.99(4h，m，-oocch2ch2s-),3.23(12h,m,-nch3,-ch2-n-),3.56-4.17(4hm,-oc2h4n-),5.13(2h，s，h-5)，5.55(2h，s，h-17)，6.89(1h，d，n-h)，7.14(h，s，h-14)，7.72(1h，q，h-10)，7.87(h，t，h-11)，8.00(1h，d，h-12)，8.14(1h，d，h-9)，8.42(1h，t，n-h)，8.65(1h，s，h-7)。
实例3制备卵磷脂类似物自组装脂质体
将0.05克1-硬脂酰-2-(喜树碱-20-o-(3,3'-二硫代二丙酰)单酯)丙三醇-3-磷酸胆碱溶于5毫升甲醇中，超声波作用下，一次性加入25毫升蒸馏水，超声10分钟后，快速吹除甲醇，剩余物经冷冻干燥制得纳米级别微粒(粒径≤200nm)，即为含卵磷脂类似物自组装脂质体。