一种多肽原料天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐的制备方法与流程

本发明涉及一种多肽原料天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐的制备方法。

背景技术

天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐是合成多肽特别是液相合成多肽的重要中间体，天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐的制备特别是天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐过程中甲酯的制备一般的方法为：1，碘甲烷法，在专利venenumbiodesignllc;letourneau,jeffreyj;cole,andrewg;marinelli,bretta;quintero,jorgeg-wo2017/214359,2017,a1描述。2，叠氮甲烷法，在chemistryofnaturalcompounds,2012,vol.48,#2,p.262–266中描述。3，醋酸酐脱水缩合后形成内酸酐后和甲醇反应得到部分单酯法，在文献hoppe-seyler'szeitschriftfürphysiologischechemie1963vol.333p.108–113中有描述。也是现有用的比较多的天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐的制备方法，路线为：第一步，天冬氨酸和氯甲酸苄酯在ph=8-9反应得到苄氧羰基天冬氨酸；第二步，苄氧羰基天冬氨酸悬浮于醋酐中加热反应，反应结束后加入乙醚和石油醚研磨得到苄氧羰基天冬氨酸内酸酐；第三步，苄氧羰基天冬氨酸内酸酐悬浮于乙醚中，加入甲醇反应，得到苄氧羰基天冬氨酸α-甲酯，在加入二环己胺析出中间体苄氧羰基天冬氨酸α-甲酯二环己胺盐；第四步，中间体苄氧羰基天冬氨酸α-甲酯二环己胺盐悬浮于水和乙酸乙酯中，加入柠檬酸解离，处理得到苄氧羰基天冬氨酸α-甲酯；第五步，苄氧羰基天冬氨酸α-甲酯悬浮于二氯甲烷中，通入异丁烯，滴加浓硫酸，密封反应五天，处理得到苄氧羰基天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯；第六步，苄氧羰基天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶于甲醇中，加入催化剂钯炭，通氢气，反应得到油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯；第七步，油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶解于乙醚中，滴加乙醚-盐酸气，得到最终产品天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐，总收率在20-25%。整体步骤多，产率低，并且用到了易自燃的钯炭，易爆炸的氢气，成本和危险性均高。

技术实现要素：

本发明技术目的在于克服原工艺中的复杂性，周期长，成本高，避免了文献中用到的碘甲烷毒性大，叠氮甲烷危险性大，醋酸酐选择性差得率低等技术问题，提供了一种多肽原料天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐的制备方法，该方法简单易控制，反应周期较短，成本低，适宜于规模化生产。

为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：一种多肽原料天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步，将天冬氨酸悬浮于干燥的四氢呋喃中，在三氯氧磷的作用下制备成天冬氨酸内酸酐盐酸盐；

第二步，天冬氨酸内酸酐盐酸盐悬浮于甲醇中反应得到天冬氨酸α-甲酯盐酸盐，用三乙胺调节ph值为弱碱性使天冬氨酸α-甲酯析出；

第三步，天冬氨酸α-甲酯悬浮于二氯甲烷中，通入异丁烯，滴加浓硫酸，密封反应五天，经处理得到油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯；

第四步，油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶解于乙醚中，滴加乙醚-盐酸气，得到最终产品天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐。

具体步骤是，所述第一步，原料天冬氨酸悬浮于干燥的四氢呋喃中，滴加三氯氧磷并保持温度在5-15℃，20分钟到1小时滴加完毕。反应时温度为15-25℃，时间为10-14小时。原料天冬氨酸和三氯氧磷的摩尔比是：1:0.5~0.6，原料天冬氨酸和四氢呋喃的质量比是：1:3.5~4.5。

第二步，三乙胺调节ph值为7到8之间，天冬氨酸内酸酐盐酸盐和甲醇重量比是：1:4~6。

第三步，异丁烯重量为天冬氨酸α-甲酯重量的2~3倍，浓硫酸的体积数为天冬氨酸α-甲酯质量数的5%-6%，二氯甲烷体积数为天冬氨酸α-甲酯重量数的10-12倍，反应温度为15-25℃。

第四步，油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶解于乙醚中，滴加乙醚-盐酸气，快速搅拌，直到体系ph=6-7，保持全程温度20-30℃，体系析出白色固体，即为最终产品天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐。商品级盐酸气通入乙醚中至基本饱和得到乙醚-盐酸气溶液。

本发明的有益效果是：天冬氨酸α-甲酯由天冬氨酸和三氯氧磷缩合后和甲醇反应获得，得到的天冬氨酸α-甲酯和异丁烯在浓硫酸的催化下直接反应得到产品，缩短了合成步骤，适合大批量生产，避免使用钯炭、氢气等易燃易爆，产生的三废少，收率高，也避免使用碘甲烷，叠氮甲烷，醋酐等剧毒易爆化学品，并且可以显著降低生产成本。

附图说明

图1为本发明实施例1最终产品ms图谱。

图2为本发明实施例1最终产品hplc图谱。

图3为本发明实施例1最终产品核磁谱图。

图4为本发明实施例1最终产品红外图谱。

具体实施方式

本发明包括但不限于下述实例

实施例1：

第一步，原料天冬氨酸100kg悬浮于400kg干燥的四氢呋喃中，在体系10℃时开始滴加60kg三氯氧磷并保持全程温度不超过15℃，约1小时滴加完毕。自然升温反应，反应时温度控制在15-20℃之间，反应时间为12小时。离心，得到天冬氨酸内酸酐盐酸盐湿重200kg。

第二步，200kg湿重的天冬氨酸内酸酐盐酸盐悬浮于800kg甲醇中，于20℃反应10小时，得到天冬氨酸α-甲酯盐酸盐，体系澄清，tlc检测反应结束，用70kg三乙胺慢慢调节ph值7-8之间，并保持温度不高于30℃，使天冬氨酸α-甲酯析出。离心，烘干，得到天冬氨酸α-甲酯77.4kg，熔点165.4-165.7度，收率70%。

第三步，将77.4kg的天冬氨酸α-甲酯悬浮于800l二氯甲烷中，降温到0℃，通入232kg异丁烯，滴加4.64l质量百分浓度98%的浓硫酸，密封反应五天，温度维持在15-20℃，tlc检测反应完全，用质量百分浓度8%的碳酸氢钠水溶液洗涤两次（400l*2），分层，减压蒸馏除去二氯甲烷，得到油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯101kg，收率94.5%。

第四步，将101kg油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶解于2000l乙醚中，滴加预先配制好的乙醚-盐酸气溶液，快速搅拌，直到体系ph=6-7，保持全程温度20-30℃，体系析出的白色固体即为最终产品天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐。离心，烘干，得到产品92.2kg，熔点158.0-159.0度，收率77.4%。产品ms图谱见图1，产品hplc图谱见图2，产品核磁谱图见图3，产品红外图谱见图4。

14.5kg商品级盐酸气通入175l乙醚中得到基本饱和的到乙醚-盐酸气溶液。

实施例2

第一步，原料天冬氨酸100g悬浮于400g干燥的四氢呋喃中，在体系5℃时开始滴加60g三氯氧磷并保持全程温度低于15℃，约20分钟滴加完毕。自然升温反应，反应时温度控制在20-25℃之间，反应时间为10小时。离心，得到天冬氨酸内酸酐盐酸盐湿重195g。

第二步，195g湿重的天冬氨酸内酸酐盐酸盐悬浮于800g甲醇中，于20℃反应10小时，得到天冬氨酸α-甲酯盐酸盐，体系澄清，tlc检测反应结束，用70g三乙胺慢慢调节ph值7-8之间，并保持温度不高于30℃，使天冬氨酸α-甲酯析出。离心，烘干，得到天冬氨酸α-甲酯78.0g，熔点167.5-168.4度。收率70.5%。

第三步，将78.0g的天冬氨酸α-甲酯悬浮于900ml二氯甲烷中，降温到0℃，通入约230g异丁烯，滴加4.5毫升质量百分浓度98%的浓硫酸，密封反应六天，温度维持在15-20℃，tlc检测反应完全，用质量百分浓度8%的碳酸氢钠水溶液洗涤两次（400毫升*2），分层，减压蒸馏除去二氯甲烷，得到油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯99g，收率92.6%。

第四步，将99g油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶解于2l乙醚中，滴加预先配制好的乙醚-盐酸气溶液175毫升，快速搅拌，直到体系ph=6-7，保持全程温度20-30℃，体系析出的白色固体即为最终产品天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐。离心，烘干，得到产品91.0g，熔点158.4-162.9度，收率76.4%。产品图谱见实施例1。

实施例3

第一步，原料天冬氨酸25kg悬浮于100kg干燥的四氢呋喃中，在体系8℃时开始滴加15kg三氯氧磷并保持全程温度低于15℃，约40分钟滴加完毕。自然升温反应，反应时温度控制在18-22℃之间，反应时间为14小时。离心，得到天冬氨酸内酸酐盐酸盐湿重50.5kg。

第二步，50.5kg湿重的天冬氨酸内酸酐盐酸盐悬浮于220kg甲醇中，于20℃反应10小时，得到天冬氨酸α-甲酯盐酸盐，体系澄清，tlc检测反应结束，用17.5kg三乙胺慢慢调节ph值7-8之间，并保持温度不高于30℃，使天冬氨酸α-甲酯析出。离心，烘干，得到天冬氨酸α-甲酯19.8kg，熔点171.6度，收率71.7%。

第三步，将19.8kg的天冬氨酸α-甲酯悬浮于200l二氯甲烷中，降温到0℃，通入约58kg异丁烯，滴加1.2l质量百分浓度98%的浓硫酸，密封反应六天，温度维持在20-25℃，tlc检测反应完全，用质量百分浓度8%的碳酸氢钠水溶液洗涤两次（100升*2），分层，减压蒸馏除去二氯甲烷，得到油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯26.0kg，收率97.3%。

第四步，将26.0kg油状物天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯溶解于500l乙醚中，滴加预先配制好的乙醚-盐酸气溶液45l，快速搅拌，直到体系ph=6-7，保持全程温度20-30℃，体系析出的白色固体即为最终产品天冬氨酸β-叔丁酯α-甲酯盐酸盐。离心，烘干，得到产品23.5kg，熔点155.1-156.8度，收率78.9%。产品图谱见实施例1。