定量PCR方法及用于其的试剂盒与流程

文档序号:30012450发布日期:2022-05-13 10:01阅读:来源:国知局

技术特征:

1.定量PCR法(qPCR法),其用于测定人细胞中靶基因的含量,

所述qPCR法包括下述步骤:将与所述靶基因不交叉的规定量的外源DNA作为用于校正所述靶基因的测定量的外标添加至含有所述人细胞的生物体试样中。

2.如权利要求1所述的qPCR法,其中,所述qPCR法为实时PCR法,所述靶基因的测定量的校正包括求出针对所述靶基因测得的Ct值与针对所述外源DNA测得的Ct值之差(ΔCt)、由所述ΔCt换算为所述靶基因的量。

3.如权利要求1所述的qPCR法,其中,所述靶基因的测定量的校正包括反映回收率,所述回收率是将基于qPCR法的所述外源DNA的测定量与所述生物体试样中的所述外源DNA的添加量进行对比而求得的。

4.如权利要求1所述的qPCR法,其中,所述qPCR法为实时PCR法,所述靶基因的测定量以所述生物体试样的每单位量的拷贝数表示。

5.如权利要求1所述的qPCR法,其中,所述人已被施予了基因工程化T细胞,以及/或者患有引起白细胞减少的疾病、或接受了引起白细胞减少的疗法。

6.qPCR用试剂盒,其包含作为用于校正靶基因的测定量的外标的、与所述靶基因不交叉的规定量的外源DNA。


技术总结
本发明提供经改良的定量PCR法(qPCR法),其用于测定人细胞中的靶基因含量,能够例如在细胞疗法中以更高的精度分析细胞动力学。本发明的qPCR法包括下述步骤:将与靶基因不交叉的规定量的外源DNA作为用于校正靶基因的测定量的外标添加至含有人细胞的生物体试样中。

技术研发人员:松本真一;山本俊辅;后藤昭彦;福田美雪;平林英树;
受保护的技术使用者:武田药品工业株式会社;
技术研发日:2020.09.29
技术公布日:2022.05.13
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