一种用于治疗脱发的米诺地尔晶型及其制备方法

本发明属于药物晶型技术领域，具体涉及一种用于治疗脱发的米诺地尔晶型及其制备方法。

背景技术：

药物活性成分固体形态的改变往往能引起药物理化性质的改变，如药物的熔点、溶解度、溶出速率、稳定性以及药物粉体的流动性、可压性等，进而对药物的生产工艺和制剂研发、药效以及毒副作用产生影响。对药物活性成分固体形态的研究是药物开发过程中的重要环节，目前常见的药物固体形态改造手段包括药物成盐、形成共晶、形成药物水合物或溶剂化物、药物多晶型筛选以及形成无定型物，这些固体形态都属于晶型药物的研究范畴。对于具有可离子化位点的药物来说，成盐法是最常用也是最有效的药物改造手段，而且适用于外用制剂。药物成盐是指可电离的药物活性成分在适宜的溶剂中电离，与带相反电荷的离子以离子键结合，在适当的条件下结晶析出的过程。药物成盐可以改变药物活性成分的超分子结构，对药物的理化性质和生物学性质产生影响。

米诺地尔是中国药典收载的抗高血压药物，内服米诺地尔可以治疗高血压。在米诺地尔的临床应用中，研究者偶然发现外用米诺地尔可以治疗脱发。为提高米诺地尔外用制剂的治疗效果，本发明采用药物成盐技术对米诺地尔进行晶型改造，通过动物实验验证制备的米诺地尔晶型药物的治疗效果，为发展新型米诺地尔外用制剂提供化学物质基础。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种用于治疗脱发的米诺地尔晶型及其制备方法。

本发明以米诺地尔作为药物活性成分，其化学名是6-(1-哌啶基)-2,4-嘧啶二胺-3-氧化物，结构式如a所示，选用2,4-二羟基苯甲酸作为成盐试剂，结构式如b所示。

本发明所述的米诺地尔晶型具有如下特征。

米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的基本结构单元由1个米诺地尔阳离子和1个2,4-二羟基苯甲酸阴离子通过离子键相互作用结合生成；米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的晶体结构属于单斜晶系，空间群为p21/c，其轴长a=8.2794~9.2794å，b=10.8172~11.8172å，c=17.3776~18.3776å，轴角α=γ=90°，β=101.788~102.788°；在x-射线粉末衍射图样中，米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型在衍射角2θ=10.265°，14.953°，18.218°，20.661°，21.591°，22.329°，29.810°处有主要峰，在衍射角2θ=9.236°，12.798°，15.871°，16.952°，18.660°，20.010°，25.538°，26.452°，34.998°处有次要峰，其中2θ值的误差范围为±0.3°。

本发明所述的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的制备方法为加热-室温挥发结晶法，其步骤如下。

(1)摩尔比为1:1的米诺地尔和2,4-二羟基苯甲酸溶解于一定量的溶剂，所用溶剂为水、甲醇、乙醇、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种或几种的混合溶剂，反应体系中米诺地尔的最终浓度为5~25mg/ml。

(2)反应液在加热条件下搅拌反应0.5~3小时，反应温度为30~70°c，反应后用中速滤纸过滤反应液。

(3)滤液室温静置8~24小时，有白色块状晶体析出，即为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

本发明所述的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的制备方法还可以采用溶剂辅助研磨法，其步骤如下。

(1)摩尔比为1:1的米诺地尔和2,4-二羟基苯甲酸置于直径为10cm的玛瑙研钵内，研磨成200目的粉末。

(2)用微量移液器移入一定量的溶剂，均匀研磨0.5~2小时，所用溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合溶剂，溶剂的用量与粉末的体积比为0.1~0.2µl/mg。

(3)收集粉末，冷冻干燥12小时，得到白色固体粉末即为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

本发明制备的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型优于米诺地尔原药的治疗效果，具有治疗脱发的潜力。

本发明中检测药物晶型结构的仪器如下。

1.单晶结构测定采用brukerapexii型x-射线单晶衍射仪进行。

2.x-射线粉末衍射采用的仪器型号为brukerd8advance。

附图说明

图1是米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的结构图。

图2是米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的超分子结构图。

图3是米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的粉末x-射线衍射图和单晶衍射模拟衍射图的比较。

图4是米诺地尔原药以及米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型对小鼠背部毛发生长促进作用的效果图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。

实施例1。

(1)称取1182.7mg的米诺地尔溶解在40ml的乙醇中，称取871.1mg的2,4-二羟基苯甲酸溶解在60ml的蒸馏水中，将两种溶液混合后置于200ml的圆底烧瓶中，安装回流装置。

(2)在70°c的水浴中搅拌反应1小时。

(3)反应液用中速滤纸过滤，滤液置于200ml烧杯中，用保鲜膜覆盖烧杯口，用10ml注射器扎7个小口，静置结晶。白色块状晶体约24小时后析出，为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例2。

(1)称取1833.5mg的米诺地尔溶解在40ml的甲醇中，称取1350.4mg的2,4-二羟基苯甲酸溶解在60ml的蒸馏水中，将两种溶液混合后置于200ml的圆底烧瓶中，安装回流装置。

(2)在70°c的水浴中搅拌反应1小时。

(3)反应液用中速滤纸过滤，滤液置于200ml烧杯中，用保鲜膜覆盖烧杯口，用10ml注射器扎7个小口，静置结晶。白色块状晶体约24小时后析出，为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例3。

(1)称取2500.0mg的米诺地尔和1841.3mg的2,4-二羟基苯甲酸混合置于200ml的圆底烧瓶中，加入40ml的二氯甲烷和60ml的甲醇，搅拌混匀后安装回流装置。

(2)在45°c的水浴中搅拌反应3小时。

(3)反应液用中速滤纸过滤，滤液置于200ml烧杯中，用保鲜膜覆盖烧杯口，用10ml注射器扎5个小口，静置结晶。白色块状晶体约8小时后析出，为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例4。

(1)称取1183.4mg的米诺地尔和871.6mg的2,4-二羟基苯甲酸混合置于200ml的圆底烧瓶中，加入50ml的四氢呋喃和50ml的蒸馏水，混匀后安装回流装置。

(2)在60°c的水浴中搅拌反应1小时。

(3)反应液用中速滤纸过滤，滤液置于200ml烧杯中，用保鲜膜覆盖烧杯口，用10ml注射器扎5个小口，静置结晶。白色块状晶体约12小时后析出，为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例5。

(1)称取500.0mg的米诺地尔和368.3mg的2,4-二羟基苯甲酸混合置于200ml圆底烧瓶中，加入20ml的二氯甲烷、40ml的乙醇和40ml的乙酸乙酯，混匀后安装回流装置。

(2)在30°c的水浴中搅拌反应0.5小时。

(3)反应液用中速滤纸过滤，滤液置于200ml烧杯中，用保鲜膜覆盖烧杯口，用10ml注射器扎3个小口，静置结晶。白色块状晶体约24小时后析出，为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例6。

(1)称取1186.3mg的米诺地尔和873.8mg的2,4-二羟基苯甲酸混合置于200ml圆底烧瓶中，加入10ml的n,n-二甲基甲酰胺、45ml的乙醇和45ml的蒸馏水，混匀后安装回流装置。

(2)在70°c的水浴中搅拌反应1.5小时。

(3)反应液用中速滤纸过滤，滤液置于200ml烧杯中，用保鲜膜覆盖烧杯口，用10ml注射器扎7个小口，静置结晶。白色块状晶体约12小时后析出，为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例7。

(1)称取540.0mg的米诺地尔和397.7mg的2,4-二羟基苯甲酸置于直径为10cm的玛瑙研钵内，研磨成200目的粉末。

(2)用微量移液器移入100µl的甲醇，均匀研磨0.5小时。

(3)收集粉末，冷冻干燥12小时，得到白色固体粉末即为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

实施例8。

(1)称取1182.7mg的米诺地尔和863.1mg的2,4-二羟基苯甲酸置于直径为10cm的玛瑙研钵内，研磨成200目的粉末。

(2)用微量移液器移入400µl的乙醇，均匀研磨2小时。

(3)收集粉末，冷冻干燥12小时，得到白色固体粉末即为米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型。

效果实施例1。

对实施例1到例6得到的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型进行x-射线单晶衍射表征，测试在德国bruker公司的apexii型x-射线单晶衍射仪上，采用经石墨单色器单色化的mo射线进行。结构采用shelxt-2013程序由直接法解出，精修采用shelxl-2018程序以全矩阵最小二乘法进行。连在氮原子和氧原子上的氢原子在差值傅里叶图中找到，骑式模式精修，其他氢原子坐标由计算得到，键长c-h=0.93å(芳香环)和0.97å(亚甲基)，同样采用骑式构象精修，热参数uiso(h)=1.5ueq(氧原子)或1.2ueq(其他载原子)。米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的晶体学参数如表所示，晶体结构如图1和图2所示。

效果实施例2。

对实施例7和例8制备的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型进行粉末x-射线衍射表征，测试条件：cu-kα靶(λ=1.54056å)，管电压35kv，管电流30ma，扫描速度0.2°/s，结果如图3所示。

效果实施例3。

选取雄性和雌性昆明小鼠各6只，用乙醚麻醉，对其背部剃毛后用蜡脱毛。分别配制浓度为8mmol/l的米诺地尔原药和米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型的生理盐水溶液。将小鼠背部皮肤均匀分成左、中、右三个区域，左侧、中间、右侧分别局部涂抹浓度为8mmol/l的米诺地尔生理盐水溶液、生理盐水溶液、浓度为8mmol/l的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型生理盐水溶液，每日涂抹2次，持续2周。每日拍照记录小鼠背部毛发生长情况，代表性结果如图4所示。从结果可知，右侧（米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型处理组）背部皮肤毛发比左侧（米诺地尔处理组）和中间（生理盐水处理组）的毛发长得更多更密，说明制备的米诺地尔-2,4-二羟基苯甲酸盐晶型促进小鼠毛发生长效果优于米诺地尔原药，表明制备的米诺地尔晶型具有治疗脱发的潜力。