一种海洋微藻的养殖方法与流程

本发明涉及海洋微藻养殖技术领域，具体为一种海洋微藻的养殖方法。

背景技术：

微藻是一类在陆地、海洋分布广泛，营养丰富、光合利用度高的自养植物，细胞代谢产生的多糖、蛋白质、色素等，使其在食品、医药、基因工程、液体燃料等领域具有很好的开发前景。藻类个体大小悬殊，其中，只有在显微镜下才能分辨其形态的微小藻类类群被人们称为微藻。

海洋微藻中含有蛋白质、氨基酸、色素、dha和epa等丰富的营养物质，目前广泛被应用于水产育苗方面，是鱼、虾等高档海鲜良好的优质饵料。但在生产实践应用当中，由实验室基础养藻到池塘生产实践应用过程当中仍然存在诸多问题，例如，直接从实验室到自然条件下的微藻转移过程中，容易使海洋微藻发生不适，产生停止生长及死亡的现象，以及藻类的诸多应激反应等。

基于此，本发明设计了一种海洋微藻的养殖方法，以解决上述问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种海洋微藻的养殖方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种海洋微藻的养殖方法，包括以下三个培养阶段：

一级培养：培养时间为3～8天，采用盐度为25‰～35‰的海水配置养殖液，且每升海水中含有以下组分的培养基：fecl31.6～3mg、nh46mo7o240.08～0.2mg、hcl2～3mg；一级培养的海水经过高温高压灭菌；一级培养的外部环境为，光照时间：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

二级培养：培养时间为3～8天，采用盐度为25‰～35‰的海水配置养殖液，且每升海水中含有以下组分的培养基：mgso411～13mg、cacl20.5～2mg、h2so40.2～0.35ml；二级培养的海水经过中高温灭菌；二级培养的外部环境为，光照时间：黑暗时间

三级培养：培养时间为3～8天，采用盐度为25‰～35‰的海水配置养殖液，且每升海水中含有以下组分的培养基：柠檬酸铁0.01～0.1mg、mgcl12～14mg、葡萄糖0.05～0.2mg；三级培养的海水经过曝气和日晒处理；三级培养的外部环境为，自然条件下，定期泼洒尿素追肥，浓度为0.03g/l～0.08g/l。

其中，一级培养贴近实验室全程无菌操作过程，为海洋微藻提供微量生长环境保证下一步的接种量；二级培养为开放式培养过程，保证微藻的活性以及在逐渐提高微藻的适应能力；三级培养为开放式贴近自然条件下的培养过程，此阶段为藻大量培养过程以及海洋微藻的批量产出，在这个过程中海洋微藻基本能够实现在自然条件下的良好生长。

优选的，一级培养的培养基包括：fecl32.6mg、mncl20.72mg、h3bo467.2mg、edta90mg、kh2po440mg、nano2200mg、zncl20.42mg、cocl20.4mg、nh46mo7o240.18mg、cuso40.4mg、hcl2.5mg、维生素b120.02mg、维生素b10.4mg、生物素0.02mg；

二级培养的培养基包括：nacl29.2mg、mgso412.3mg、kcl0.75mg、cacl21.11mg、nano31.2mg、k2hpo40.17mg、h3bo42.86mg、znso40.66mg、namoo40.063mg、h2so40.3ml、mncl25.43mg、cuso40.24mg；

三级培养的培养基包括：柠檬酸铁0.05mg、mgcl13.66mg、nano30.2mg、kcl0.018mg、nah2po40.022mg、葡萄糖0.1mg、nasio30.1mg。

优选的，一级培养的海水经过120℃、30min的高温高压灭菌；二级培养的海水经过90℃、10min的中高温灭菌；三级培养的海水经过2h以上的曝气和日晒处理。

优选的，一级培养、二级培养和三级培养的接种密度均为106个细胞/ml。

优选的，三级培养的外部环境为，追肥泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.05g/l。

优选的，一级培养、二级培养和三级培养的海水盐度为30‰。

优选的，一级培养、二级培养和三级培养每个阶段的培养时间为5天。

一种海洋微藻的养殖设备，包括养殖池，养殖池的左侧设有第一养殖槽，养殖池的右部后侧段设有第一养殖槽，右部前侧段设有第二养殖槽，第一养殖槽和养殖槽的顶部封闭，且内腔顶面均匀固定有灯管，第三养殖槽的顶部设为开口状态，且上方设有抛洒组件，养殖池的后侧壁对应第一养殖槽和第三养殖槽的位置固定有储液箱，右侧壁对应第二养殖槽的位置固定有储液箱，每个储液箱的两个分别固定有进液管和出液管，进液管和出液管的另一端与对应的养殖槽连接，且进液管和出液管上分别设有泵体。

优选的，抛洒组件包括对称固定于第三养殖槽外侧壁端的两个支撑板，两个支撑板的顶端固定有驱动箱，驱动箱的内侧对称固定有两个平行的滑槽，且滑槽的内侧端固定于第二养殖槽的上方，滑槽中滑动连接有移动块，两个移动块的下方之间固定有抛洒管，移动块中套接有螺杆，螺杆与滑槽转动连接，且一端伸出驱动箱中，并固定有第一锥齿轮，第一锥齿轮啮合有第二锥齿轮，且两个第二锥齿轮的中心处共同固定有驱动轴，驱动轴与驱动箱转动连接，且其中一端连接有电机。

优选的，养殖池的后侧转动连接有第一转轴，右侧转动连接有第二转轴，第一转轴的右端和第二转轴的后端分别固定有锥齿轮，两个锥齿轮连接有电机，且其中一个锥齿轮的外侧啮合有驱动锥齿轮，驱动锥齿轮连接有电机，第一转轴的左端穿过第一养殖槽的储液箱，伸入第三养殖槽的储液箱中，并与储液箱的侧壁转动连接，第二转轴的前侧端深入第二养殖槽的储液箱中，并与储液箱侧壁转动连接，第一转轴和第二转轴上位于储液箱的轴段上均匀固定有搅拌叶。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明通过在每个阶段提供不同的主要营养成分，能够帮助海洋微藻逐步适应实验室环境至生产实践环境的转变，提高微藻抗环境干扰能力，维持生长的稳定性；

2、海水是微藻直接接触和存货的直接环境因素，本发明通过不同级别的处理，使得三个培养阶段的海水环境逐级接近于生产实践的养殖环境，避免海水微藻在养殖环境骤变造成的适应不良。

综上，本发明通过三级培养过程，改变培养条件及培养基配方从而解决藻类的应激反应，能够解决实验室到生产实践过度不稳定的情况，不但实现了海洋微藻生长缓慢的问题，且同时保证微藻亲本的活性，本发明也适合在大的养殖场所保证微藻的稳定快速增长。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明的养殖设备结构示意图；

图2为本发明的抛洒管结构示意图。

附图中，各标号所代表的部件列表如下：

1-第一养殖槽，2-第二养殖槽，3-第三养殖槽，301-支撑板，302-驱动箱，303-滑槽，304-螺杆，305-移动块，306-抛洒管，307-第一锥齿轮，308-第二锥齿轮，309-驱动轴，4-储液箱，401-进液管，402-出液管，403-第一转轴，404-第二转轴。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一

本发明提供一种技术方案：一种海洋微藻的养殖方法，包括以下三个培养阶段：

1一级培养的海水为经过高温高压灭菌120℃，30min，海水用量200～500ml，藻的接种量为100ml(密度为106个细胞/ml)；一级培养基为：fecl32.6mg、mncl20.72mg、h3bo467.2mg、edta90mg、kh2po440mg、nano2200mg、zncl20.42mg、cocl20.4mg、nh46mo7o240.18mg、cuso40.4mg、hcl2.5mg、维生素b120.02mg、维生素b10.4mg、生物素0.02mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

2二级培养的海水为经过90℃，10min处理，海水量为500～5000ml，藻的接种量为300ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：nacl29.2mg、mgso412.3mg、kcl0.75mg、cacl21.11mg、nano31.2mg、k2hpo40.17mg、h3bo42.86mg、znso40.66mg、namoo40.063mg、h2so40.3ml、mncl25.43mg、cuso40.24mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

3三级培养的海水经过曝气和日晒两个小时以上，海水量为5000ml以上，藻的接种量为500ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：柠檬酸铁0.05mg、mgcl13.66mg、nano30.2mg、kcl0.018mg、nah2po40.022mg、葡萄糖0.1mg、nasio30.1mg；外部环境为自然条件下，定期泼洒尿素追肥，泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.05g/l。

本实施例采用的藻种为海链藻，通过上述培养过程，藻的增长率为50.7％。

实施例二

本发明提供一种技术方案：一种海洋微藻的养殖方法，包括以下三个培养阶段：

1一级培养的海水为经过高温高压灭菌120℃，30min，海水用量200～500ml，藻的接种量为100ml(密度为106个细胞/ml)；一级培养基为：fecl32.6mg、mncl20.72mg、h3bo467.2mg、edta90mg、kh2po440mg、nano2200mg、zncl20.42mg、cocl20.4mg、nh46mo7o240.18mg、cuso40.4mg、hcl2.5mg、维生素b120.02mg、维生素b10.4mg、生物素0.02mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

2二级培养的海水为经过90℃，10min处理，海水量为500～5000ml，藻的接种量为300ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：nacl29.2mg、mgso412.3mg、kcl0.75mg、cacl21.11mg、nano31.2mg、k2hpo40.17mg、h3bo42.86mg、znso40.66mg、namoo40.063mg、h2so40.3ml、mncl25.43mg、cuso40.24mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

3三级培养的海水经过曝气和日晒两个小时以上，海水量为5000ml以上，藻的接种量为500ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：柠檬酸铁0.05mg、mgcl13.66mg、nano30.2mg、kcl0.018mg、nah2po40.022mg、葡萄糖0.1mg、nasio30.1mg；外部环境为自然条件下，定期泼洒尿素追肥，泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.06g/l。

本实施例采用的藻种为叉边金藻，通过上述培养过程，藻的增长率为41.％。

实施例三

本发明提供一种技术方案：一种海洋微藻的养殖方法，包括以下三个培养阶段：

1一级培养的海水为经过高温高压灭菌120℃，30min，海水用量200～500ml，藻的接种量为100ml(密度为106个细胞/ml)；一级培养基为：fecl32.6mg、mncl20.72mg、h3bo467.2mg、edta90mg、kh2po440mg、nano2200mg、zncl20.42mg、cocl20.4mg、nh46mo7o240.18mg、cuso40.4mg、hcl2.5mg、维生素b120.02mg、维生素b10.4mg、生物素0.02mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

2二级培养的海水为经过90℃，10min处理，海水量为500～5000ml，藻的接种量为300ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：nacl29.2mg、mgso412.3mg、kcl0.75mg、cacl21.11mg、nano31.2mg、k2hpo40.17mg、h3bo42.86mg、znso40.66mg、namoo40.063mg、h2so40.3ml、mncl25.43mg、cuso40.24mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

3三级培养的海水经过曝气和日晒两个小时以上，海水量为5000ml以上，藻的接种量为500ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：柠檬酸铁0.05mg、mgcl13.66mg、nano30.2mg、kcl0.018mg、nah2po40.022mg、葡萄糖0.1mg、nasio30.1mg；外部环境为自然条件下，定期泼洒尿素追肥，泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.05g/l。

本实施例采用的藻种为赤潮异弯藻，通过上述培养过程，藻的增长率为38％。

实施例四

本发明提供一种技术方案：一种海洋微藻的养殖方法，包括以下三个培养阶段：

1一级培养的海水为经过高温高压灭菌120℃，30min，海水用量200～500ml，藻的接种量为100ml(密度为106个细胞/ml)；一级培养基为：fecl32.6mg、mncl20.72mg、h3bo467.2mg、edta90mg、kh2po440mg、nano2200mg、zncl20.42mg、cocl20.4mg、nh46mo7o240.18mg、cuso40.4mg、hcl2.5mg、维生素b120.02mg、维生素b10.4mg、生物素0.02mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

2二级培养的海水为经过90℃，10min处理，海水量为500～5000ml，藻的接种量为300ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：nacl29.2mg、mgso412.3mg、kcl0.75mg、cacl21.11mg、nano31.2mg、k2hpo40.17mg、h3bo42.86mg、znso40.66mg、namoo40.063mg、h2so40.3ml、mncl25.43mg、cuso40.24mg；外部环境为光照：黑暗时间＝12：12，光照强度为800～1500lux，温度为25.5～28.5℃，湿度为20％；

3三级培养的海水经过曝气和日晒两个小时以上，海水量为5000ml以上，藻的接种量为500ml(密度为106个细胞/ml)，培养基为：柠檬酸铁0.05mg、mgcl13.66mg、nano30.2mg、kcl0.018mg、nah2po40.022mg、葡萄糖0.1mg、nasio30.1mg；外部环境为自然条件下，定期泼洒尿素追肥，泼洒时间每次间隔7天，浓度为0.03g/l。

本实施例采用的藻种为扁藻，通过上述培养过程，藻的增长率为22.2％。

实施例五

本发明提供一种技术方案：一种海洋微藻的养殖设备，包括养殖池，养殖池的左侧设有第一养殖槽1，养殖池的右部后侧段设有第一养殖槽1，右部前侧段设有第二养殖槽2，第一养殖槽1和养殖槽的顶部封闭，且内腔顶面均匀固定有灯管，第三养殖槽3的顶部设为开口状态，且上方设有抛洒组件，养殖池的后侧壁对应第一养殖槽1和第三养殖槽3的位置固定有储液箱4，右侧壁对应第二养殖槽2的位置固定有储液箱4，每个储液箱4的两个分别固定有进液管401和出液管402，进液管401和出液管402的另一端与对应的养殖槽连接，且进液管401和出液管402上分别设有泵体。

优选的，抛洒组件包括对称固定于第三养殖槽3外侧壁端的两个支撑板301，两个支撑板301的顶端固定有驱动箱302，驱动箱302的内侧对称固定有两个平行的滑槽303，且滑槽303的内侧端固定于第二养殖槽2的上方，滑槽303中滑动连接有移动块305，两个移动块305的下方之间固定有抛洒管306，移动块305中套接有螺杆304，螺杆304与滑槽303转动连接，且一端伸出驱动箱302中，并固定有第一锥齿轮307，第一锥齿轮307啮合有第二锥齿轮308，且两个第二锥齿轮308的中心处共同固定有驱动轴309，驱动轴309与驱动箱302转动连接，且其中一端连接有电机。

养殖池的后侧转动连接有第一转轴403，右侧转动连接有第二转轴404，第一转轴403的右端和第二转轴404的后端分别固定有锥齿轮，两个锥齿轮连接有电机，且其中一个锥齿轮的外侧啮合有驱动锥齿轮，驱动锥齿轮连接有电机，第一转轴403的左端穿过第一养殖槽1的储液箱4，伸入第三养殖槽3的储液箱4中，并与储液箱4的侧壁转动连接，第二转轴404的前侧端深入第二养殖槽2的储液箱4中，并与储液箱4侧壁转动连接，第一转轴403和第二转轴404上位于储液箱4的轴段上均匀固定有搅拌叶。

本实施例的工作原理为：向第一养殖槽1中注入一定量的微藻和对应的养殖液进行培养，完成第一阶段的培养后，取出一定量的微藻放入第二养殖槽2中，在二级培养的养殖液中进行培养，完成第二阶段的培养后，取出一定量的微藻放入第三养殖槽3中，在三级培养的养殖液中进行培养，将三个阶段的养殖槽集中在一起，便于对微藻进行转移培养操作；

通过储液箱4放置对应成分的养殖液，在需要对养殖槽中的养殖液进行更换或者补充时，通过泵体使储液箱4的养殖液进入对应的养殖槽，并通过出液管402将养殖槽中的养殖液排出回收处理等；

用于三级培养的第三养殖槽3中需要定期泼洒尿素追肥，将抛洒管306的一端通过连接管外接储存有尿素的储料箱，通过抛洒管306进行追肥，同时通过电机使驱动轴309带动第二锥齿轮308转动，并通过第一锥齿轮307和第二锥齿轮308的传动，使两个螺杆304转动，从而使移动块305带动抛洒管306在第三养殖槽3上运动，从而对第三养殖槽3进行均匀追肥泼洒。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

以上公开的本发明优选实施例只是用帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。