一种酶解法提取陈皮中橙皮苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明提供一种酶解法提取橙皮苷的方法，涉及医药领域。
【背景技术】
[0002]橙皮苷具有降低血管脆性，降血压、抗过敏、抑制肿瘤等作用，在临床上用于心血管系统疾病的辅助治疗，也可用于医药工业中制药的原料，橙皮苷还作为天然抗氧化剂用于食品和化妆品行业。
[0003]传统从柑橘皮中提取橙皮苷通常采用热水提取、醇回流提取、碱提酸沉等方法。这些方法都是采用化学溶剂浸润溶解药材中的有效成分，虽然简单易操作，但存在提取不完全、造成一些橙皮苷残留在果渣里，使用的化学试剂易造成环境污染等缺点。近年来报道微波和超声波辅助提取橙皮苷。虽然这两种方法提取时间短，但超声法噪音很大，微波法有辐射，它们对提取设备有很高的要求，这在一定程度上限制了其在企业大生产中的应用。
[0004]柑橘、柠檬、柚子等果皮中约含30%果胶，果胶主要存在于植物的细胞壁和细胞内层，由于果胶阻碍了细胞内橙皮苷等有效成分的溶出，采用果胶酶可以酶解果胶，使橙皮苷充分地溶解出来，从而明显提高橙皮苷的提取率。
[0005]与传统方法如醇溶剂回流提取法相比，酶解法提取橙皮苷具有容易过滤，操作简单，无有机溶剂残留，不造成环境污染的优点。与超声提取法、微波提取法相比，它有无需特殊设备、生产安全性好、有利于劳动保护及有利于企业大生产等优点。
【发明内容】
[0006]一种酶解法提取陈皮中橙皮苷的方法，其特征是:称取陈皮药材粗粉适量，按照料液比为1: 8?40 (g/mL)的比例加入蒸馏水，按照用量为药材质量的O?3%加入果胶酶，其用量为药材质量的O?3%，用稀盐酸将药液的pH值调节至3?5，置于40?55°C恒温水浴中O?3小时，取出，过滤，滤液浓缩至浸膏，然后置于真空干燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
【具体实施方式】
[0007]下面结合实施实例，对本发明进一步描述，但其不代表为本发明的唯一实施方式。
[0008]实施实例一
[0009]1.橙皮苷的提取:
[0010]将陈皮药材粉粹成粗粉，称取100.0Og,加入300mL蒸馏水，加入果胶酶(300000U/g)，用量为药材质量的0.3%，用稀盐酸调节溶液的pH值为3，置于45°C恒温水浴箱中酶解2小时，取出，过滤，滤液浓缩至浸膏，然后置于真空于燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
[0011]2.提取物中橙皮苷的含量测定
[0012]采用HPLC法测定，测定方法是参考2010年版《中国药典》陈皮药材中橙皮苷的含量测得方法。
[0013](I)标准溶液的配制精确称取橙皮苷标准品10.lmg，加入适量甲醇，超声溶解，用甲醇定容到25mL，配制成质量浓度为0.404mg/mL的橙皮苷标准品溶液。
[0014](2)检测波长的确定以空白溶剂甲醇为参比溶液，通过紫外可见分光光度计对橙皮苷标准溶液在200?400nm波长间扫描，同时，对陈皮样品溶液也进行光谱扫描。结果显示，橙皮苷标准溶液和陈皮样品液都在285nm处有强吸收峰，因此取283nm为检测波长。
[0015](3) HPLC 色谱条件色谱柱:Waters Symmetry C18 (250_X 4.6mm，5 μ m)，流动相:甲醇-2%冰醋酸溶液(34: 66)，流速:0.5mL/min，检测波长:283nm，温度为室温。进样量:20 μ Lo橙皮苷保留时间为5.lmin。
[0016](4)标准曲线的制备
[0017]分别精密吸取橙皮苷标准溶液l、2、3、4、5mL于1mL的容量瓶中，用甲醇定容，配成质量浓度分别为40.4,80.8、121.2、161.6,202 μ g/mL的一系列标准溶液，进行HPLC测定，在283nm波长处测峰面积。以橙皮苷标准溶液的浓度(y g/mL)为横坐标，以其峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为y = 185220x-25642，R2= 0.999，其中y表示峰面积，X表示橙皮苷的浓度。线性范围为40.4?202 μ g/mL。
[0018](5)橙皮苷提取率的测定
[0019]提取所得溶液，用0.45 μ m微孔滤膜过滤，通过HPLC测其峰面积。通过回归方程计算样品中橙皮苷的含量。实验重复三次，求平均值，测得橙皮苷提取物中橙皮苷有5.58g，则橙皮苷的提取率为5.58%。
[0020]实施实例二
[0021]1.橙皮苷的提取:
[0022]称取陈皮药材药材粗粉100g，加入200mL蒸馏水，加入果胶酶(30000U/g)，用量为药材质量的3%，用稀盐酸调节溶液的pH值为4，置于45°C恒温水浴箱中酶解1.5小时，取出，过滤，滤液浓缩至浸膏，然后置于真空干燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
[0023]2.橙皮苷提取率的测定
[0024]根据以上的HPLC法测定，测得橙皮苷提取物中橙皮苷有5.02g，则橙皮苷的提取率为5.02%o
【主权项】
1.一种酶解提取陈皮中橙皮苷的方法，其特征是:称取陈皮药材粗粉适量，按照料液比为1: 8?40 (g/mL)的比例加入蒸馏水，按照用量为药材质量的O?3%加入果胶酶，用稀盐酸将药液的PH值调节至3?5，置于40?55°C恒温水浴中酶解O?3小时，取出，过滤，滤液浓缩至浸膏，然后置于真空干燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
【专利摘要】本发明提供一种酶解法提取陈皮中橙皮苷的方法，涉及医药领域。因柑橘等果皮富含果胶，而果胶阻碍了细胞内有效成分的溶出。本发明是采用果胶酶来酶解药材细胞壁和细胞间的果胶，从而破坏细胞壁，使橙皮苷充分地溶解出来，达到明显提高橙皮苷提取率的目的。此法可用于提取陈皮、枳壳及枳实等药材中橙皮苷。它具有操作简单，无有机溶剂残留，不造成环境污染、无需特殊设备、生产安全性好、有利于企业大生产等优点。
【IPC分类】C07H17-07, C07H1-08
【公开号】CN104558072
【申请号】CN201410624367
【发明人】许玲玲, 杨晓东, 陈菲, 盛柳青, 李群力, 麻佳蕾, 蔡力玲, 陈贵颖
【申请人】金华职业技术学院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年10月31日