一种细胞油脂的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及细胞中油脂的提取方法，属于生物化工方面油脂的再利用领域。
【背景技术】
[0002] 生物柴油是植物油、动物油、废弃油脂或微生物油脂经转化而形成的脂肪酸甲酯 或乙酯。在由于化石能源的日趋减少以及使用化石能源造成的环境污染的加剧，科研工作 者开始把注意力集中到可再生能源的开发利用上。1993年，世界粮农组织（FAO)预测，到 2050年，以生物质能源为主的可再生能源将提供全世界60%的电力和40%的燃料，其价格低 于化石燃料。在各种可再生能源中，具有广泛实用价值的能源是生物质能。生物质是地球 上最普遍的一种可再生能源资源，它包括林业生物质、能源作物、水生植物、农业废弃物、城 市垃圾、有机废水和人畜粪便等。目前，在世界能源消耗中，生物质能占14%，在发展中国家 占40%以上。在生物质能源中，生物柴油的生产越来越引起人们的重视。
[0003] 生物柴油是典型的"绿色能源"，具有环保性能好、发动机启动性能好、燃料性能 好、原料来源广泛、具有可再生性等特性。但原料供应却限制了生物柴油的进一步发展[2]。
[0004] 与动植物油脂相比，微生物油脂有更大的优势：节约劳动力，不受气候、季节的影 响；适应性强，生产周期短；原料丰富多样，环保，价格便宜，能连续大规模生产，生产成本 低；利用生物技术改良菌种或者选择不同培养基，可以使微生物生产经济价值高的功能性 油脂。
【发明内容】
[0005] 本发明的技术目的在于提供一种生物细胞中油脂的提取方法。
[0006] 本发明的技术目的是通过以下技术方案实现的：
[0007] -种细胞中油脂的提取方法，包括以下步骤：将细胞离心，洗涤，重复离心，液氮冷 冻12?48h，解冻，超声破碎，干燥后研磨成粉，加入有机溶剂，摇动0. 5?5h，离心后，取上 清50?80摄氏度水浴1?6h，放入烘箱中烘干称重。
[0008] 本发明所述的提取方法优选所述离心转速为3000?6000rpm/min。
[0009] 本发明所述的提取方法优选所述有机溶剂选自氯仿、甲醇、乙醇、丙酮中的至少两 种或多种的混合物。更优选为氯仿和甲醇的混合溶剂。
[0010] 本发明所述的提取方法优选所述有机溶剂为氯仿：甲醇为1?5:1的混合溶剂，更 优选为2:1的混合溶剂。
[0011] 本发明所述的提取方法优选所述液氮冷冻时间为18?36h。
[0012] 本发明所述的提取方法优选所述水浴温度为65?75°C。
【具体实施方式】
[0013] 下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以 任何方式限制本发明。
[0014] 实施例I
[0015] 将细胞于4000rpm/min离心，洗涤，重复离心，液氮冷冻24h，解冻，超声破碎，干燥 后研磨成粉，加入有机溶剂氯仿：甲醇为3:1，摇动2h，离心后，取上清70摄氏度水浴lh，放 入烘箱中烘干称重。
[0016] 实施例2
[0017] 将细胞于4500rpm/min离心，洗涤，重复离心，液氮冷冻26h，解冻，超声破碎，干燥 后研磨成粉，加入有机溶剂氯仿：甲醇为2:1，摇动lh，离心后，取上清75摄氏度水浴0. 5h， 放入烘箱中烘干称重。
[0018] 实施例3
[0019] 将细胞于5000rpm/min离心，洗涤，重复离心，液氮冷冻18h，解冻，超声破碎，干 燥后研磨成粉，加入有机溶剂氯仿：甲醇为4:1，摇动0. 5h，离心后，取上清80摄氏度水浴 0. 5h，放入烘箱中烘干称重。
[0020] 实施例4
[0021] 将细胞于6000rpm/min离心，洗涤，重复离心，液氮冷冻12h，解冻，超声破碎，干燥 后研磨成粉，加入有机溶剂氯仿：甲醇为2:1，摇动3h，离心后，取上清80摄氏度水浴3h，放 入烘箱中烘干称重。
[0022] 实施例5
[0023] 测定实施例1?4所制备的油脂的提取率，如表1所示。
[0024] 表 1
[0025]
【主权项】
1. 一种细胞油脂的提取方法，其特征在于包括以下步骤：将细胞离心，洗涤，重复离 心，液氮冷冻12?48h，解冻，超声破碎，干燥后研磨成粉，加入有机溶剂，摇动0. 5?5h，离 心后，取上清50?80摄氏度水浴1?6h，放入烘箱中烘干称重。
2. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述离心转速为3000?eOOOrpm/ min〇
3. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述有机溶剂选自氯仿、甲醇、乙醇、 丙酮中的至少两种或多种的混合物。
4. 根据权利要求1或3所述的提取方法，其特征在于所述有机溶剂为氯仿和甲醇的混 合溶剂。
5. 根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于所述有机溶剂为氯仿：甲醇为1?5:1 的混合溶剂。
6. 根据权利要求4所述的提取方法，其特征在于所述有机溶剂为氯仿：甲醇为2:1的 混合溶剂。
7. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述液氮冷冻时间为18?36h。
8. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述水浴温度为65?75°C。
【专利摘要】一种细胞中油脂的提取方法，公开了一种采用有机溶剂提取生物细胞中的油脂的方法，所述的有机溶剂包括氯仿、甲醇、乙醇、丙酮中的至少两种或多种的混合物，尤其优选为氯仿甲醇的混合物作为提取溶剂，本发明所提供的提取方法提取率高，尤其适用于微生物细胞的油脂提取，微生物油脂具有节约能源，生产周期短，环保，成本低的有点，可以提高微生物的生产经济价值。
【IPC分类】C11B1-10
【公开号】CN104560376
【申请号】CN201310500260
【发明人】秦宏佳
【申请人】大连市沙河口区中小微企业服务中心
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2013年10月21日