四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用

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四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及曲霉酬类化合物,尤其是设及四环曲霉酬类化合物及其制备方法和应 用。
【背景技术】
[0002] 炎症反应是机体免疫反应的一部分,是血管或组织对损伤或病原体等有害刺激的 局部反应。炎症反应的主要症状有发热、疼痛、肿胀、泛红W及机体功能的丧失等,对患者的 生活质量有不同程度的影响。炎症导致风湿性关节炎、炎症性肠病、神经退化性疾病、脈毒 性休克、动脉粥样硬化等疾病相关W,局部慢性炎症反应还可诱发机体癌变
[0003] 目前,抗炎药物的作用机制多种多样,如阻断与炎症有关的前列腺素合成的关键 酶环加氧酶-2(COX-2)的作用,或抑制炎症因子如肿瘤坏死因子-a、白细胞介素(IL)、一 氧化氮(NO)、自由基等毒性分子的诱导表达等。广泛使用的抗炎药主要分为两类:一 种是非酱体抗炎药(NSAIDs),如双氯芬酸、布洛芬、嘲噪美辛、蒙普生等;另一种是C0X-2的 选择性抑制剂昔布类,如塞来昔布、依托昔布等W。该两类药物在减轻炎症病痛的同时,都 存在较强的副作用,如长期服用NSAH)s会导致肠胃糜烂或溃瘍W及各种屯、血管疾病W,昔 布类药物对凝血功能和肾功能都有影响。
[0004] 天然产物是一类来源于动物、植物、微生物等生物体的次级代谢产物,因其复杂多 样的化学结构W及各种各样的生物活性,始终在新药研发中占有举足轻重的地位。海洋微 生物特殊的生存环境,为代谢多样性提供了可能,因此是产生结构新颖、活性多样的天然产 物的重要来源。海洋微生物代谢的天然产物,为开发新型治疗效果好、毒副作用低的抗炎药 物或其他生物活性药物提供了重要资源。
[000引参考文献:
[0006] 1. Maranhao, R. C. and A. C. A. Leite, Development of Anti-Atherosclerosis Therapy Based on the Inflammatory and Proliferative Aspects of the Disease[J]. Qirr. Pharm. Des. , 2015. 21 (9) :p. 1196-1204.
[0007] 2. Schwartsburd, P. M. , Chronic inflammation as inductor of pro-cancer microenvironment:Pathogenesis of dysregulated feedback control [J].Cancer Metastasis Rev. , 2003. 22(1) :p. 95-102.
[000引 3. Warner, T. D., et al., Nonsteroid drug selectivities for cyclo-oxygenase-lrather than cycl0-0xygenase-2are associated with human gastrointestinal toxicity:a full in vitro analysis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A .,1999. 96(13) :p. 7563-7568.
[0009] 4. Huang, X. -s. , et al. , Inhibitory effect of momordicin on inflammatory factors generation by preventing nuclear translocation of nuclear factor-kappa B[J].Zhongguo Dongmai Yin曲ua Zazhi, 2013. 21(7) :p. 583-588.
[0010] 5. Matsui, T. , et al. , Hypothermia at 35 °C Reduces the Time-D巧endent Microglial Production of Pro-inflammatory and Anti-inflammatory Factors that Mediate Neuronal Cell Death[J]. Neurocrit. Care, 2014. 20(2):p. 301-310.
[0011] 6. Shaikh, S. R. and G. M. Nazeruddin, Multi component reactions and non -steroidal anti -inflammatory drugs[J]. J. Chem. Pharm. Res. , 2014. 6(12):p. 505 -534, 3 0卵.
[0012] 7. A1 -Turki, D. A. , et al. , Therapeutic and toxic effects of new NSAIDs and related compounds:a review and prospective study[J]. Int. J. Pharmacol. , 2010. 6(6) :p. 813 - 825.

【发明内容】

[0013] 本发明的第一目的是提供曲霉(Aspergillus sp. )ZL(Ub-14。
[0014] 本发明的第二目的是提供四环曲霉酬类化合物及其制备方法。
[0015] 本发明的第=目的是提供四环曲霉酬类化合物有制备抗炎症药物中的应用。
[0016] 所述曲霉(Aspergillus sp. )ZL(Ub-14已于2014年12月26日保藏于中国典型 培养物保藏中屯、,地址;中国武汉武汉大学,邮编;430072,保藏中屯、保藏编号为CCTCC NO ; M 2014668。
[0017] 所述四环曲霉酬类化合物包括四个曲霉酬化合物,即四环曲霉酬A、四环曲霉酬 B、四环曲霉酬C和四环曲霉酬D ;
[001引四环曲霉酬A的分子式为〔22也09,分子量为434. 16,手性碳的绝对构型为5aS、6R、 6aR、10aR、llR、llaR ;
[0019] 四环曲霉酬B的分子式为〔22&8〇8,分子量为420. 18,手性碳的绝对构型为5aS、6R、 6aR、10aR、llR、llaR ;
[0020] 四环曲霉酬C的分子式为C21H24O9,分子量为420. 14,手性碳的绝对构型为5aS、6R、 6aR、10aR、llR、llaR ;
[0021] 四环曲霉酬D的分子式为化,分子量为436. 46,手性碳的绝对构型为5aS、6S、 6aR、10aR、llR、llaS、12R ;
[0022] 四环曲霉酬A、四环曲霉酬B、四环曲霉酬C和四环曲霉酬D的化学结构式如下;
[0023]
【主权项】
1. 曲霉(Aspergillus sp.)ZL01b-14,已于2014年12月26日保藏于中国典型培养物 保藏中心,保藏中心保藏编号为CCTCC NO :M 2014668。
2. 四环曲霉酮类化合物,其特征在于包括四个曲霉酮化合物,即四环曲霉酮A、四环曲 霉酮B、四环曲霉酮C和四环曲霉酮D ; 四环曲霉酮A的分子式为C22H26O9,分子量为434. 16,手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、 IOaRU 1R> IlaR ; 四环曲霉酮B的分子式为C22H28O8,分子量为420. 18,手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、 IOaRU 1R> IlaR ; 四环曲霉酮C的分子式为C21H24O9,分子量为420. 14,手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、 IOaRU 1R> IlaR ; 四环曲霉酮D的分子式为C22H28O9,分子量为436. 46,手性碳的绝对构型为5aS、6S、6aR、 10aR、llR、llaS、12R ; 四环曲霉酮A、四环曲霉酮B、四环曲霉酮C和四环曲霉酮D的化学结构式如下:
3. 如权利要求2所述四环曲霉酮类化合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤: 1) 制备马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基平板,将曲霉(Aspergillus sp. )ZL01b-14 转接到马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基平板上,倒置培养得平板菌种; 2) 将步骤1)得到的平板菌种接种于马铃薯-葡萄糖半海水液体培养基中摇床培养,得 种子液; 3) 将步骤2)所得种子液转接到发酵培养基中,倒置发酵后得发酵培养物; 4) 将步骤3)得到的发酵培养物用混合有机溶剂浸提,将提取液减压浓缩至干,甲醇溶 解后过滤,滤液再减压浓缩至干得浸膏,浸膏用乙酸乙酯和水萃取至乙酸乙酯相无色,收集 乙酸乙酯相减压浓缩至干得粗提物浸膏,再用甲醇和石油醚萃取至石油醚相无色,收集甲 醇相减压浓缩至膏状,然后用甲醇溶解,过滤后再次减压浓缩,得浓缩粗提物浸膏; 5) 将步骤4)得到的浓缩粗提物浸膏进行反相中压液相柱层析,以甲醇/水连续梯度洗 脱得组分1和组分2,组分1经两次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮 A和四环曲霉酮B ;组分2经一次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮C 和四环曲霉酮D。
4. 如权利要求3所述四环曲霉酮类化合物的制备方法,其特征在于在步骤1)中,所述 马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基的配制方法为:将去皮的马铃薯切成小块,加水煮沸 20~40min,纱布过滤得马铃薯滤液,加入葡萄糖、琼脂和半海水,加水定容至lOOOmL,灭菌 条件为121°C下灭菌20min;所述马铃薯滤液中葡萄糖与马铃薯的质量比可为1 : (10~ 20),所述琼脂与马铃薯的质量比可为1 : (15~20)。
5. 如权利要求3所述四环曲霉酮类化合物的制备方法,其特征在于在步骤2)中,所 述马铃薯-葡萄糖半海水液体培养基的配制方法为:将去皮的马铃薯切成小块,加水煮沸 20~40min,纱布过滤得马铃薯滤液,加入葡萄糖和半海水,加水定容至lOOOmL,灭菌条件 为121°C下灭菌20min;所述马铃薯滤液中葡萄糖与马铃薯的质量比可为1 : (10~20); 所述摇床培养的条件可为27~28°C,160~180rpm,培养的时间为4~6天。
6. 如权利要求3所述四环曲霉酮类化合物的制备方法,其特征在于在步骤3)中,所述 发酵培养基采用马铃薯-葡萄糖-琼脂-20 % NaCl培养基,马铃薯-葡萄糖-琼脂-20 % NaCl培养基的配制方法可为:将去皮的马铃薯切成小块,加水煮沸20~40min,纱布过滤 得马铃薯滤液,加入葡萄糖、NaCl和琼脂,加水定容至lOOOmL,灭菌条件为121°C下灭菌 20min,所述马铃薯滤液中的葡萄糖与马铃薯的质量比可为1 : (10~20),琼脂与马铃薯的 质量比可为1 : (15~20),马铃薯与NaCl的质量比可为1 : (0.5~1.5)。
7. 如权利要求3所述四环曲霉酮类化合物的制备方法,其特征在于在步骤4)中,所述 混合有机溶剂采用乙酸乙酯/甲醇/甲酸,乙酸乙酯、甲醇、甲酸的体积比为80 : 15 : 5; 所述乙酸乙酯和水的体积比可为1 : 1,甲醇和石油醚的体积比可为1 : 1;各次减压浓缩 的温度均可为45°C。
8. 如权利要求3所述四环曲霉酮类化合物的制备方法,其特征在于在步骤5)中,所述 甲醇/水连续梯度洗脱的比例变化按体积比为0/100到100/0 ; 所述组分1经两次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱中的两次凝胶柱层析可 采用Sephadex LH-20,洗脱剂分别为甲醇和丙酮/甲醇,丙酮与甲醇的体积比可为4 : 1, 一次半制备高压液相色谱的洗脱条件可为60%甲醇; 所述组分2经一次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱中的凝胶柱层析可采用 Sephadex LH-20,洗脱剂为丙酮/甲醇,丙酮与甲醇的体积比可为4 : 1,一次半制备高压 液相色谱的洗脱剂可为45%甲醇。
9. 如权利要求2所述四环曲霉酮类化合物在制备抗炎症药物中应用;所述炎症可包括 但不限于风湿性关节炎、炎症性肠病、神经退化性疾病和脓毒性休克由促炎症因子介导的 炎症。
10. 如权利要求9所述应用,其特征在于所述抗炎症药物还包括以四环曲霉酮A、B、C 和D作为有效成分并含有常规药用载体的药物组合物。
【专利摘要】四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用,涉及曲霉酮类化合物。四环曲霉酮类化合物包括四环曲霉酮A、B、C和D。制备培养基平板,将曲霉转接到平板上培养得平板菌种,再接种于液体培养基中得种子液;转接到发酵培养基中得发酵培养物,浸提后浓缩至干,甲醇溶解后过滤,滤液浓缩至干得浸膏,再萃取至乙酸乙酯相无色,收集乙酸乙酯相浓缩至干得粗提物浸膏,再萃取至石油醚相无色,收集甲醇相浓缩至膏状,用甲醇溶解,过滤后浓缩得浓缩粗提物浸膏,进行反相中压液相柱层析,洗脱得组分1和2,组分1经两次层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮A和B;组分2经一次层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮C和D。CCTCC NO: M 201466820141226
【IPC分类】A61P25-00, C12N1-14, C07D493-04, A61P1-00, C12R1-66, A61P29-00, A61K31-366, A61P19-02, C12P17-18
【公开号】CN104630078
【申请号】CN201510094280
【发明人】邓贤明, 徐庆妍, 湛莹, 亓双, 王跃宙, 胡志钰, 郑忠辉, 宋思扬
【申请人】厦门大学
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年3月3日
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