一种从石蒜属植物中提取石蒜碱的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种石蒜碱的提取方法，特别涉及一种从石蒜属植物中提取石蒜碱的 方法。
【背景技术】
[0002] 石蒜(Xycoris radiate. Herb)是石蒜科（Amaryllidaceae)石蒜属（Xycoris)的 多年生草本植物，主要分布在亚洲，我国有17种，在我国湖南、湖北、江苏、浙江、福建等省 均有分布。石蒜属植物具有较高的观赏价值，被誉为"中国郁金香"，石蒜鱗茎富含淀粉，女口 将其磨碎后用大量水淘洗，脱毒后食用，味如懦米粉，《救荒本草》中记载，可将其炒熟，水浸 过食。石蒜性味辛、甘、温，具有消肿、杀虫的作用，其所含丰富的生物碱也得到广泛应用，尤 其是石蒜碱，石蒜碱具有抗肿瘤、抗病毒的疗效，但是含量均较低。
[0003] 现有技术中主要有溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法、超临界流体萃取等方 法，但存在环境污染严重、生产成本高等缺点。
[0004] 中国专利2006100512151公开了一种从石蒜属植物中提取石蒜碱的方法，提取目 标物为石蒜碱；该专利重在石蒜碱分离，工艺复杂，操作繁琐，己酸己醋价格较高，需要反复 萃取。相比之下，本方法生产成本低，操作较简单。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种提取率高、 成产成本低的从石蒜中提取石蒜碱的方法。
[0006] 本发明解决其技术问题所采用的技术方案，一种从石蒜属植物中提取石蒜碱的方 法，包括W下步骤：
[0007] (1)提取：
[0008] 首先称取经烘干、粉碎、过筛处理的石蒜属植物粉末，W料液比1:5-25(优选 1:10-1:25,更优选1:10)，单位比例为g/mU加入抑调节为1. 5-7. 5(优选3-6,更优选4. 5) 的水，加入石蒜属植物粉末质量1 % -5% (优选2-5%，更优选4% )的酶，在40-8(TC (优 选35-65C，更优选5(TC )酶解0. 5-2.化（优选1-化，更优选1.化），离也20min，过滤，取上 清液，即得石蒜碱提取液；
[000引 似纯化
[0010] ①溶剂萃取；将步骤（1)提取的石蒜碱提取液用化0H调节抑至10,按体积比1:1 加入萃取剂H氯甲焼，摇匀，静置过夜，取下层氯仿相，肥1调节抑至2,抽滤，得石蒜碱萃取 浓缩液；
[0011] ②阳离子交换树脂吸附；将步骤①中萃取浓缩液经肥1调节抑至1~6(优选 抑为2)用D-001型阳离子交换树脂，W上样速率l-3BV/h (优选3BV/h)上样至饱和，用含 0. 5-2. 5mol/L(优选1. 5mol/L)氨水的40% -80% (优选70% )己醇溶液W 3BVA的洗脱 速率进行洗脱，干燥，得干燥物I ;
[0012] ③Ci8反相硅胶柱层析；C 18填料预处理，将20倍质量于步骤②中干燥物I的Ci8填 料装于层析柱中，然后W流动相（流动相；V(己膳）；V(磯酸盐）为16 ; 84)溶解层析 出来的层析物，上样，采用甲醇-水溶液分次洗脱，收集洗脱液，浓缩，真空冷冻干燥，得干 燥物II ;
[0013] ④正相硅胶柱层析；用经预处理的20倍质量于步骤③所得干燥物II的柱层析用 硅胶（200-300目）W柱直径-柱高湿法装柱，所述柱直径-柱高的比例为1:10~30 (优 选1:10)，步骤③所得干燥物II与硅胶混匀，加入洗脱剂溶解，所述洗脱剂为石油離、己酸己 醋、氯仿、丙丽、甲醇中的两种溶剂混合；蒸发溶剂后干法上样，洗脱，收集洗脱液，浓缩，真 空冷冻干燥，得干燥物III ;
[0014] ⑥重结晶；将步骤④所得干燥物III经己醇溶解，再结晶得到石蒜碱粗品，过滤，在 50~6(TC真空干燥得的石蒜碱。
[0015] 进一步，所述步骤④中，洗脱剂为石油離和己酸己醋，所述己酸己醋与石油離的体 积比为8. 4:1.6。
[0016] 进一步，所述酶为纤维素酶与半纤维素酶的混合酶，纤维素酶与果胶酶的混合酶， 半纤维素酶与果胶酶的混合酶，纤维素酶、半纤维素酶及果胶酶的混合酶中的一种。
[0017] 进一步，所述酶为纤维素酶与果胶酶的混合酶，所述纤维素酶与果胶酶的质量比 为 1:1。
[0018] 进一步，所述石蒜属植物为忽地笑、红花石蒜、攻瑰石蒜、稻草石蒜、或中国石蒜 (优选忽地笑）
[0019] 进一步，所述石蒜属植物粉末为鱗茎或花粉末。
[0020] 与现有技术相比，本发明操作简单，生产成本低，因采用的提取溶剂为水，按料液 比1:10计算，若生产1kg石蒜碱，比使用甲醇或无水己醇（工业用7. 5元/公斤）作为提取 溶剂，生产成本就降低42811元；对环境无污染，提取得率较高，提取得率提高了 30. 46% ; 反应时间短，与采用超声波辅助提取相比，时间缩短1. 5h，与现有技术浸提方法相比，时间 缩短2.化；本发明只在传统水提工艺上增加酶解过程，具有一定的应用价值，易用于工业 化生产；纯化工艺环保，且纯度高，可达99. 3%。
【附图说明】
[0021] 图1为本发明抑值对石蒜碱得率的影响分布图；
[0022] 图2为本发明酶用量对石蒜碱得率的影响分布图；
[0023] 图3为本发明酶解时间对石蒜碱得率的影响分布图；
[0024] 图4为本发明酶解温度对石蒜碱得率的影响分布图；
[00巧]图5为本发明料液比对石蒜碱得率的影响分布图。
【具体实施方式】
[0026] 参照附图及实施例对本发明做进一步说明。
[0027] 本实施例包括W下步骤；（1)提取；首先称取经烘干、粉碎、过筛处理的石蒜属植 物粉末2. 000g，W料液比1:5-25,单位比例为g/mU分别加入抑调节为1.5-7. 5的水，加 入石蒜属植物粉末质量1 % -5 %的酶，在40-8(TC酶解0. 5-2.化，离也20min，过滤，取上清 液，即得石蒜碱提取液；
[002引 似纯化
[0029] ①溶剂萃取；将步骤（1)提取的石蒜碱提取液用化0H调节抑至10,按体积比1:1 加入萃取剂H氯甲焼，摇匀，静置过夜，取下层氯仿相，肥1调节抑至2,抽滤，得石蒜碱萃取 浓缩液；
[0030] ②阳离子交换树脂吸附；将步骤①中萃取浓缩液经肥1调节抑至2,用D-001型阳 离子交换树脂，W上样速率3BVA上样至饱和，用含1. 5mol/L氨水的70%己醇溶液W 3BV/ h的洗脱速率进行洗脱，干燥，得干燥物I ;
[0031] ③反相硅胶柱层析；C 18填料预处理，将20倍质量于步骤②中干燥物I的Ci8填 料装于层析柱中，然后W流动相（流动相；V(己膳）；V(磯酸盐）为16 ; 84)溶解层析 出来的层析物，上样，采用甲醇-水溶液分次洗脱，收集洗脱液，浓缩，真空冷冻干燥，得干 燥物II ;
[0032] ④正相硅胶柱层析；用经预处理的20倍质量于步骤③所得干燥物II的柱层析用 硅胶（200-300目）W柱直径-柱高湿法装柱，所述柱直径-柱高的比例为1:10,步骤③所 得干燥物II与硅胶混匀，加入洗脱剂溶解，所述洗脱剂为石油離、己酸己醋、氯仿、丙丽、甲 醇中的两种溶剂混合；蒸发溶剂后干法上样，洗脱，收集洗脱液，浓缩，真空冷冻干燥，得干 燥物III ;
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