一种红球菌及其在降解木质素方面的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种红球菌及其在降解木质素方面的应用，属于微生物技术领域。
【背景技术】
[0002]木质素是自然界中含量丰富的三大生物质之一，占陆生植物干重的15%_40%，其结构为由苯丙烷单元结构通过醚键和碳碳键组成的具有三维空间结构无定型芳香类化合物，与纤维素和半纤维素构成植物骨架的主要成分。木质素与纤维素、半纤维素结合十分稳定，不易降解，是生物质能源利用的关键瓶颈之一，同时木质素也是木材水解工业和造纸工业的副产物以及城市生活垃圾中一种较难降解的物质，采用化学试剂处理这些废弃物会造成严重的环境污染。
[0003]尽管针对木质素的降解方法已经有了几十年的研宄，但是仍然存在许多的问题，例如化学法不能够解决污染问题，物理法又有高能耗的挑战，而生物降解由于其低成本，反应条件温和，无二次污染的优点被广泛应用于各种有害有机物的降解。据报道，目前发现的能够降解木质素的细菌有鞘氨醇单胞菌)、假单胞菌(Aewi/offlmas sp.)等。
[0004]本发明从南海海泥中筛选到一株红球菌(Rhodococcus sp.)L17，能够在高盐分等极端环境中生长，并且能够高效降解木质素。红球菌具有强大的降解底物能力，能降解多种底物，并生成具有生物活性的类固醇、丙烯酰胺以及丙烯酸。最近还发现红球菌能够降解木质素生成三酰甘油，是生产生物能源的有效候选菌株。
【发明内容】
[0005]本发明的首要目的在于提供一种红球菌(/PAot/ococciAssp.) L17。
[0006]本发明的另一目的在于提供所述红球菌iRhodococcuss^1.) L17在环保领域中的应用，特别是在降解木质素中的应用。
[0007]本发明通过下述技术方案实现:
一种红球菌) L17，于2014年3月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.8943。
[0008]所述红球菌(TfeotZococciAssp.) L17具有如下的形态和生理生化特性:
采用常规的细菌生理生化鉴定方法和透射电镜观察，为革兰氏阳性，不形成分生孢子，好氧，过氧化氢酶阳性，芳香基硫酸脂酶阴性，不能降解酪蛋白、纤维糖等。
[0009]所述红球菌i Rhocbcoccussp.) L17 的 16S rDNA 序列(如 SEQ ID N0.1 所不)已经提交至NCBI数据库，登录号为KM215139。
[0010]SEQ ID N0.1:GGCTGGTGGGGCCTGGCTTTACACATGCCAAGTCGAACGATGAAGCCCAGCTTGCTGGGTGGATTAGTGGC
GAACGGGTGAGTAACACGTGGGTGATCTGCCCTGCACTCTGGGATAAGCCTGGGAAACTGGGTCTAATACCGGATA
TGACCTCGGGATGCATGTTCTGGGGTGGAAAGTTTTTCGGTGCAGGATGAGCCCGCGGCCTATCAGCTTGTTGGTGGGGTAATGGCCTACCAAGGCGACGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCC
AGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGAT
GACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTCACCCATGACGAAGCGCAAGTGACGGTAGTGGGAGAAGAAGCACCGGCCA
ACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTGTCCGGAATTACTGGGCGTAAAGAGCTCGTAGGC
GGTTTGTCGCGTCGTCTGTGAAATCCCGCAGCTCAACTGCGGGCTTGCAGGCGATACGGGCAGACTCGAGTACTGCA
GGGGAGACTGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGGTCTCT
GGGCAGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAAC
GGTGGGCGCTAGGTGTGGGTTTCCTTCCACGGGATCCGTGCCGTAGCCAACGCATTAAGCGCCCCGCCTGGGGAGTA
CGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGATTAATTCGATGCAA
CGCGAAGAACCTTACCTGGGTTTGACATGTACCGGACGACTGCAGAGATGTGGTTTCCCTTGTGGCCGGTAGACAGG
TGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCTGTGT
TGCCAGCACGTGATGGTGGGGACTCGCAGGAGACTGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCA
TCATGCCCCTTATGTCCAGGGCTTCACACATGCTACAATGGTCGGTACAGAGGGCTGCGATACCGTGAGGTGGAGCG
AATCCCTTAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATCGGGGTCTGCAACTCGACCCCGTGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCA
GATCAGCAACGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCATGAAAGTCGGTAACACCC
GAAGCCGGTGGCCTAACCCCTTGTGGGAGGGAGCACGTTCGAAAGGGGGATTAGGGGGGGGo
[0011 ] 所述红球菌(Rhodococcuss^.) L17应用于降解木质素，按照以下步骤进行:将含有木质素的无机盐培养基PH调为6.5-8.5，然后将0D600值为0.4-0.5 (对数增长期)的红球菌(/Sot/ococciAssp.)L17按体积比10%_40%的接种量接种，于25_42°C进行反应；所述的含有木质素的无机盐培养基中的木质素的浓度优选为20-100mg/L ;所述反应为振荡反应，
振荡速度为100-250rpm ;所述反应的时间为72_108h。
[0012]本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:
(I)本发明首次从中国南海海泥中筛选到具有降解木质素能力的红球菌(Rho do Co c cu ss^>.) L17，能够在极端环境下生长。
[0013](2)本发明的红球菌(Rhodococcuss\>.) L17能够降解木质素，降解率可达90%-100%ο
[0014](3)本发明的红球菌(TSoi/ococciAssp.) L17降解木质素相对于物理化学法成本低，且无二次污染。
【具体实施方式】
[0015]下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0016]实施例1:
本发明所述的具有降解木质素能力的红球菌(WAoi/ococciAssp.) L17从中国南海海泥中进行分离、纯化而得。
[0017]其分离纯化方法如下:所用的驯化培养基为无机盐培养基，组分为(g/L):6.2gNa2HPO4, 3.0g KH2PO4,0.5g NaCl，1.0g NH4Cl, pH7.0。首先将 3g 污泥加入 10mL 含 20mg/L木质素的无机盐培养基，37°C驯化60天后