(r,s)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基)二苯并[a,d]环庚烷-2-基]氧]乙酸的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及链接剂（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚 烧-2-基]氧]乙酸（Ramagelinker)的制备方法。
【背景技术】
[0002] (R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚烷-2-基]氧]乙酸 (Ramage1inker)是一种有效的固相合成C-端链接剂，相对于其他多肽链接切割条件温和。 Ramagelinker的合成方法，目前的方法为以下8步 1. 邻羧基苯甲醛和间甲氧基苯乙酸在无水乙酸钠的催化下反应后处理得到R-a; 2. R_a氛化还原反应后处理得到R_1 ; 3. R-1在多聚磷酸的催化下反应后处理得到R-b; 4. R_b用1、2_二氣乙烧溶解，在无水八1013的催化反应后处理得到R_c; 5. R-c与&'CH2C02Et反应后处理得到R-d; 6. R-d与NaOH溶液反应后处理得到R-2 ; 7. R-2用NaBH4还原反应后处理得到R-4 ; 8. R-4用DMF溶解，在PTS催化下与Fmoc_NH2反应得到产物ramagelinker。
[0003] 该方法存在反应步骤多，后处理麻烦，三废多，生产成本较高的技术缺陷。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种链接剂（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并 [A，D]环庚烧-2-基]氧]乙酸（Ramagelinker)的制备方法。主要解决原合成方法步骤 长，后处理麻烦，三废多，成本高的技术问题。
[0005] 本发明的技术方案：一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚 烷-2-基]氧]乙酸的制备方法，包括以下步骤： A. 邻羧基苯甲醛和间甲氧基苯乙酸在无水乙酸钠的催化下反应6~12小时得到 2- (3-甲氧基苯乙烯基）苯甲酸（中间体），中间体用甲醇、四氢呋喃或二氧六环溶解，在 Pd-C或兰尼镍催化下通氢气还原，再后处理结晶得到2- (3-甲氧基苯乙基）苯甲酸（R-1); B. (R-1)与SOCl^P0C1 3反应得到 2-甲氧基-10，11-二氢-5H-二苯并[a,d]环 庚烯-5-酮，负压蒸去S0C12或？0(：13后，用苯、甲苯或1，2_二氯乙烷溶解，在无水A1C13 的催化反应后处理结晶得到2-羟基-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-5-酮 (R-2)； (：.〇?-2)在01^或丙酮碳酸钾溶液中和溴乙酸苄酯反应生成乙基2-[(5-氧-10，11-二 氢-5h-二苯并[A，D]环庚烷-2-基）氧]苄酯（R-3); D. (R-3)在Pd-C或兰尼镍催化下通氢气还原得到2-[ (5-羟基-10,11-二氢-5h-二 苯并[A，D]环庚烷-2-基）氧]乙酸（R-4); E. (R-4)在DMF中加入催化剂量的PTS，和Fmoc-NH#应得到2-(R，S)-2-[[5-(9-芴 甲氧羰基氨基）二苯并[A,D]环庚烧-2-基]氧]乙酸即Remagelinker。
[0006] 总计5步反应即可完成得到合格的Remagelinker。
[0007]进一步， 步骤A:邻羧基苯甲醛：间甲氧基苯乙酸：无水乙酸钠的摩尔比为1:1:0. 1~2. 5 ;反 应温度控制在180~240°C，2- (3-甲氧基苯乙烯基）苯甲酸优选用甲醇溶解，氢化温度控 制在25~45°C，所述后处理结晶为：将Pd-C或兰尼镍抽滤，负压蒸干溶剂后，用醋酸乙酯 和石油醚或正己烷容积比1:1. 5~3. 5结晶； 步骤B:反应温度控制在：60~80°C，投料比（R-1) :S0C12或者P0C1 3比例为摩尔比 1:2~5，（R-1)和A1C13和苯、甲苯或1，2_二氯乙烷的投料摩尔比为1:2~4:10~15,所 述后处理结晶为：反应完成后将溶液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取，用质量百分浓度为5% 盐酸洗涤，再用饱和食盐水洗，油相按乙酸乙酯与石油醚或正己烷容积比为1:2~5结晶； 步骤C:反应加入催化剂叔丁醇钾，90~110°C反应4-8小时。（R-2):溴乙酸苄酯摩 尔比为1:1. 2~1. 5 ; 步骤D: (R-3)和Pd-C(5%)或兰尼镍投料重量比为1:0. 05~0. 2,溶剂体系为甲醇、 乙醇、四氢呋喃或者二氧六环中的一种，反应温度为25-45°C，时间为2~6小时； 步骤E: (R-4)和Fmoc-NHjPPTS投料摩尔比为1: (1. 1~1. 4) :0. 1，加水稀释后，用 乙酸乙酯萃取，用质量百分浓度10%的柠檬酸或者质量百分浓度5%盐酸水溶液酸化到pH 为3-4。之后饱和食盐水洗，分层。以醋酸乙酯：石油醚或者正己烷体积比1:1~3结晶， 或者脱溶后用甲醇结晶。
[0008] 本发明的反应式如下：
【主权项】
1?一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚烷-2-基]氧]乙酸的 制备方法，包括以下步骤： A.邻羧基苯甲醛和间甲氧基苯乙酸在无水乙酸钠的催化下反应6~12小时得到中间 体2- (3-甲氧基苯乙烯基)苯甲酸，中间体用甲醇、四氢呋喃或二氧六环溶解，在Pd-C或 兰尼镍催化下通氢气还原，再后处理结晶得到2- (3-甲氧基苯乙基）苯甲酸； 8.2-(3-甲氧基苯乙基）苯甲酸与30(：12或？0(：13反应得到2-甲氧基-10，11-二 氢-5H-二苯并[a,d]环庚稀-5-酮，负压蒸去SOCl2或？0013后，用苯、甲苯或1,2-二 氯乙烷溶解，在无水AlCl3的催化反应后处理结晶得到2-羟基-10，11-二氢-5H-二苯并 [a,d]环庚稀-5-酮； C. 2-羟基-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-5-酮在N，N-二甲基甲酰胺或 丙酮碳酸钾溶液中和溴乙酸苄酯反应生成乙基2-[(5_氧-10, 11-二氢-5h-二苯并[A,D] 环庚烷-2-基）氧]苄酯； D. 乙基2-[(5-氧-10, 11-二氢-5h-二苯并[A，D]环庚烷-2-基)氧]苄酯在Pd-C或 兰尼镍催化下通氢气还原得到2- [(5-羟基-10, 11-二氢-5h-二苯并[A，D]环庚烷-2-基） 氧]乙酸； E. 2-[ (5-羟基-10, 11-二氢-5h-二苯并[A,D]环庚烷-2-基)氧]乙酸在N，N-二 甲基甲酰胺中加入催化剂量的对甲苯磺酸，和？111〇(3-順2反应得到2-(R，S)-2-[ [5-(9-芴 甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚烷-2-基]氧]乙酸。
2. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环 庚烷-2-基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：所述步骤A:邻羧基苯甲醛：间甲氧基苯乙 酸：无水乙酸钠的摩尔比为1:1:0. 1~2. 5 ;反应温度控制在180~240°C，氢化温度控制 在25~45°C，所述后处理结晶为：将Pd-C或兰尼镍抽滤，负压蒸干溶剂后，用醋酸乙酯和 石油醚或正己烷容积比1:1. 5~3. 5结晶。
3. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚 烷-2-基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：2_ (3-甲氧基苯乙烯基）苯甲酸用甲醇溶解。
4. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环 庚烷-2-基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：所述步骤B:反应温度控制在：60~80°C，投 料比2- (3-甲氧基苯乙基）苯甲酸：SOCl2或者POCl3比例为摩尔比1:2~5，2- (3-甲 氧基苯乙基）苯甲酸和AlCl3和苯、甲苯或1，2-二氯乙烷的投料摩尔比为1:2~4:10~ 15,所述后处理结晶为：反应完成后将溶液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取，用质量百分浓度 为5%盐酸洗涤，再用饱和食盐水洗，油相按乙酸乙酯与石油醚或正己烷容积比为1:2~5 结晶。
5. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环 庚烷-2-基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：所述步骤C:反应加入催化剂叔丁醇钾，90~ ll〇°C反应4-8小时，2-羟基-10，11-二氢-5H-二苯并[a,d]环庚烯-5-酮：溴乙酸 苄酯摩尔比为1:1. 2~1. 5。
6. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环 庚烧_2_基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：所述步骤D:乙基2-[ (5-氧-10, 11-二 氢-5h-二苯并[A，D]环庚烷-2-基）氧]苄酯和Pd-C或兰尼镍投料重量比为1:0. 05~ 0. 2,溶剂体系为甲醇、乙醇、四氢呋喃或者二氧六环中的一种，反应温度为25-45°C，时间为 2~6小时。
7. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚 烧_2_基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：所述步骤E:2_[(5_羟基-10, 11-二氛_5h_二 苯并[A，D]环庚烷-2-基）氧]乙酸和Fmoc-NH2和对甲苯磺酸投料摩尔比为I: (I. 1~ 1.4) :0. 1，加水稀释后，用乙酸乙酯萃取，用质量百分浓度10%的柠檬酸或者质量百分浓度 5%盐酸水溶液酸化到pH为3-4,之后饱和食盐水洗，分层，以醋酸乙酯：石油醚或者正己 烷体积比1:1~3结晶，或者脱溶后用甲醇结晶。
8. 根据权利要求1所述的一种（R，S)-2-[[5-(9-芴甲氧羰基氨基）二苯并[A，D]环庚 烧_2_基]氧]乙酸的制备方法，其特征是：所述步骤E:2_[(5_羟基-10, 11-二氛_5h_二 苯并[A，D]环庚烷-2-基）氧]乙酸和Fmoc-NH2和对甲苯磺酸投料摩尔比为I: (I. 1~ 1.4) :0. 1，加水稀释后，用乙酸乙酯萃取，用质量百分浓度10%的柠檬酸或者质量百分浓度 5%盐酸水溶液酸化到pH为3-4,之后饱和食盐水洗，分层，用甲醇结晶。
【专利摘要】本发明涉及Ramage linker的制备方法，主要解决原合成方法步骤长，后处理麻烦，三废多，成本高的技术问题。制备由A.邻羧基苯甲醛和间甲氧基苯乙酸反应得到中间体2-（3-甲氧基苯乙烯基）苯甲酸,中间体用溶剂溶解，然后氢化还原，再后处理结晶得到R-1；B.（R-1）与SOCl2或POCl3反应得到2-甲氧基-10,11-二氢-5H-二苯并[a, d ]环庚烯-5-酮,负压蒸去SOCl2 或POCl3后，用苯、甲苯或1,2-二氯乙烷溶解，在无水AlCl3的催化反应后处理结晶得到R-2； C.(R-2）在DMF或丙酮碳酸钾溶液中和溴乙酸苄酯反应生成R-3；D．(R-3）氢化还原得到R-4；E.（R-4）在DMF中加入催化剂量的PTS,和Fmoc-NH2反应得到Remage linker。Ramage linker是一种有效的固相合成C-端链接剂。
【IPC分类】C07C269-06, C07C271-24
【公开号】CN104761470
【申请号】CN201510107760
【发明人】付等良, 徐红岩, 涂雨龙
【申请人】吉尔生化（上海）有限公司, 上海吉尔多肽有限公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年3月12日