一种selaginellin M的制备方法
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及卷柏中selaginellin M的制备方法，其含量采用HPLC法检测应在 95%以上。属于中药提取分离、纯化领域。
【背景技术】：
[0002] 中国药典2005年版中规定卷柏为卷柏科植物卷柏Selaginella tamariscina (Beauv. ) Spring或垫状卷柏 Selaginella pulvinata (Hook, et Grev. )Maxim. 的干燥全草。全年均可采收，除去须根及泥沙，晒干。辛，平。归肝、心经。具有活血通经。 用于经闭痛经，癥瘕痞块，跌扑损伤。卷柏炭化瘀止血。用于吐血，崩漏，便血，脱肛。卷柏 中含有多种化学成分，如黄酮类，现已发现卷柏中含有芹菜素（apigenin)、穗花杉双黄酮 (amentoflavone)、扁柏双黄酮（hinokiflavone)、异柳杉素（isocryptomerin)及阿曼托 黄色（amentoflavone)等；苯丙素类、生物碱类、酷类、有机酸类等化合物。药理作用显示 具有：免疫及抗肿瘤作用、对血液系统的作用、抗病毒、抑菌与抗炎作用、镇痛镇静等作用。 selaginellin M为卷柏中一种有效成分，目前现有技术中未见此selaginellin M的提取方 法。本发明提供了一种方便、简便、快速的制备高纯度selaginellin M的方法。
【主权项】
1. 一种式（I)所示的selaginellin M的制备方法，其特征在于： a) 将中药卷柏的干燥全草原料切成寸段； b) 用乙醇、甲醇、水中的一种或甲醇-水、乙醇-水按比例1 :9~9 :1混合溶剂回流提 取；合并提取液，滤过，得提取液； c) 将提取液回收溶剂并浓缩，按比例1 :10~10 :1加入水，混悬，得混悬液； d) 将混悬液吸附于DlOl或各种极性、弱极性大孔吸附树脂柱，然后用乙醇-水或甲 醇-水(按比例10 :1~1 :1)的混合溶剂洗脱，分别以每份1/100~1/20总量洗脱剂的体 积量收集洗脱液流份，以三氯甲烷：甲醇（10 :1~1 :1)为展开剂采用TLC检查斑点，合并相 同的洗脱流份； e) 将合并的相同洗脱流份回收溶剂，得固体粉末； f) 将固体粉末用2-100倍量的石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、三氯甲烷、乙醇、甲醇中 的一种或两种（1 :1〇~10 :1)混合的混合有机溶剂溶解； g) 将固体粉末的有机溶剂或混合有机溶剂加入以Sephadex LH-20为吸附剂的层析柱 上吸附； h) 将吸附棕褐色固体粉末的Sephadex LH-20层析柱用石油醚、乙醚、乙酸乙醋、丙酮、 三氯甲烷中的一种或两种（1 :1〇~10 :1)混合的混合溶剂分别与乙醇或甲醇（10 :1~1 : 1)的混合溶剂洗脱，分别以每份1/100~1/20总量洗脱剂的体积量收集S印hadex LH-20 层析柱的黄色色带，直至完全，以三氯甲烷：甲醇（10 :1~I :1)为展开剂采用TLC跟踪检 查斑点，合并相同的洗脱流份； i) 将合并的相同洗脱流份回收溶剂，得固体粉末，即selaginellin M精制品；
2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（b)中加入相当于药材重量的 2-16倍溶剂，回流提取1-5次，每次0. 5至6小时。
3. 根据权利要求1所述的selaginellinM的制备方法，其特征在于：所述的中药卷柏 为：卷柏科植物卷柏 Selaginella tamariscina(Beauv. ) Spring或垫状卷柏 Selaginella pulvinata(Hook, et Grev. ) Maxim?的干燥全草原料。
4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤b)中甲醇-水或乙醇-水的浓 度为 30-75%。
5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤d)中的大孔树脂为DlOl。
6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤h)中，三氯甲烷：甲醇=3 :1-4 : 1〇
7. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤f)中，所述的有机溶剂为固体粉 末的10-30倍量。
8. -种药物制剂，其特征在于，通过权利要求1-7任何一项所述的制备方法制备得到 的selaginellin M和药学上可接受的载体或赋形剂结合。
9. 根据权利要求8所述的药物制剂，其特征在于：所述的制剂选自片剂、胶囊剂、颗粒 剂、注射剂、滴丸。
【专利摘要】本发明属于医药技术领域，提供了一种从中药卷柏中制备含量在95%以上的selaginellin M的制备方法。该化合物具有如下式（I）的结构。本发明中所述的selaginellin M是采用卷柏科植物卷柏Selaginella tamariscina(Beauv．) Spring或垫状卷柏Selaginella pulvinata(Hook．et Grev．)Maxim．的干燥全草原料为起始原料，用有机溶剂和/或水进行提取并且大孔树脂吸附和Sephadex LH-20吸附相结合的分离方法进行分离得到的。本发明具有工艺操作简单、重复性好，产率高，适合于工业化生产的优点，且本产品的纯度较高，其含量采用HPLC法检测在95%以上。（I）。
【IPC分类】C07C45-78, A61K31-122, C07C49-753
【公开号】CN104817447
【申请号】CN201510105626
【发明人】张国刚
【申请人】沈阳药科大学
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年3月10日