物质结合用固相载体的冷冻干燥体、制造方法以及容器的制造方法

文档序号:8539130阅读:510来源:国知局
物质结合用固相载体的冷冻干燥体、制造方法以及容器的制造方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及物质结合用固相载体的冷冻干燥体、用于使物质含有液中的物质与物质结合用固相载体结合的容器和含有物质结合用固相载体的冷冻干燥体的制造方法。
【背景技术】
[0002]近年来,由于基因的利用技术的发展,基因诊断、基因治疗等利用基因的医疗备受注目。另外,在农业和畜牧业领域也开发有很多使用基因鉴别品种、改良品种的方法。作为利用基因的技术,PCR(Polymerase Chain React1n:聚合酶链式反应)等技术得到了广泛普及。如今,PCR在生物体物质的信息解析中成为了必不可少的技术。PCR是通过对含有作为扩增对象的核酸(靶核酸)和试剂的溶液(反应液)实施热循环以扩增靶核酸的方法。作为PCR的热循环,普遍的是以2个梯度或者3个梯度的温度实施热循环。
[0003]另一方面,对于医疗现场中诊断以流感为代表的感染病的现状是使用免疫层析试剂盒等简易检查试剂盒是主流。但是在这样的简易检查中,有时精度不够,需求可实现更高检查精度的PCR用于感染病的诊断。另外,由于医疗机构的普通门诊患者等的诊察时间受限的关系,需将检查所花费的时间限制在短时间内。因此,例如流感的检查现状是牺牲检查的精度而通过简易的免疫层析试剂盒等的检查来实现短时间化。基于这样的实际情况,在医疗领域,为了能够利用可实现更高精度的PCR进行检查,需要缩短反应所需时间。
[0004]专利文献I中,作为短时间内实施在PCR的反应前进行的核酸的提取操作的方法,记载了使核酸与具有磁性的微珠粘接并使用磁铁进行操作的方法。
[0005]专利文献1:日本特开2009 - 207459号公报

【发明内容】

[0006]磁性粒子等核酸结合用固相载体,通常静置时因其磁性等而凝聚。因此,在用于PCR等之前需要使核酸结合用固相载体在液体内分散。
[0007]本发明的目的在于提供一种省去用于使物质结合用固相载体分散的操作而以更短时间使物质与物质结合用固相载体结合的容器。
[0008]本发明的一个实施方式涉及的物质结合用固相载体的冷冻干燥体的特征在于,物质结合用固相载体与添加剂一起被冷冻干燥。上述物质结合用固相载体优选为磁性粒子。上述添加剂可以是海藻糖、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、糊精、葡聚糖、聚乙二醇、环糊精或者麦芽糊精。
[0009]本发明的另一个实施方式涉及的用于使物质含有液中的物质与物质结合用固相载体结合的容器的特征在于,容器内具备物质结合用固相载体与添加剂一起被冷冻干燥而成的冷冻干燥体。该容器可以具有投入上述物质含有液的开口部、用于过滤从上述开口部投入的上述物质含有液的过滤部、用于使通过上述过滤部的上述物质含有液与上述冷冻干燥体接触的接触部、以及用于使在上述接触部与上述冷冻干燥体接触的上述物质含有液向上述容器外流出的流出部。
[0010]本发明的另一个实施方式涉及的含有物质结合用固相载体的冷冻干燥体的制造方法的特征在于,将物质结合用固相载体与添加剂一起冷冻干燥。上述物质结合用固相载体优选为磁性粒子。上述添加剂可以是海藻糖、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、糊精、葡聚糖、聚乙二醇、环糊精或者麦芽糊精。
【附图说明】
[0011]图1是实施方式涉及的容器的截面示意图。
[0012]图2是示意地表示实施方式涉及的容器中的图1的A的截面的截面图。
[0013]图3是示意地表示实施方式涉及的容器中的图1的B的截面的截面图。
[0014]图4A?图4E是表示使用实施方式涉及的容器的核酸提取方法的示意图。
[0015]图5A?图5E是表示使用实施方式涉及的容器的蛋白质的精制方法的示意图。
【具体实施方式】
[0016]以下对本发明的实施方式进行说明。以下说明的实施方式是说明本发明的例子的实施方式。本发明不受以下的实施方式的任何限定,包括在不变更本发明的主旨的范围内实施的各种变形方式。应予说明,并不能限定为以下说明的构成的全部均为本发明的必须构成要素。
[0017]图1是本实施方式的用于使物质含有液中的物质与物质结合用固相载体接触的容器的截面示意图。应予说明,本说明书中“物质”是指例如DNA、RNA等核酸,蛋白质等。
[0018]本发明涉及的容器100具有过滤器设置部112、冷冻干燥体114、凹部118和流出口 110。过滤器设置部112例如是开有直径数毫米或一边数毫米的孔的塑料板。优选在过滤器设置部112设置细网眼过滤器和粗网眼过滤器这2层过滤器。
[0019]细网眼过滤器设置在粗网眼过滤器的后段。细网眼过滤器和粗网眼过滤器只要具有物质能够通过的大小的孔即可。例如,可将粗网眼过滤器的孔设为50?200 μ m,将细网眼过滤器的孔设为10?30 μπι。粗网眼过滤器和细网眼过滤器的材质没有特别限定,例如,可以使用聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、硝基纤维素、玻璃纤维制作。应予说明,在本实施方式中,为了抑制过滤器堵塞设置了粗网眼过滤器和细网眼过滤这2层,但也可以仅设置I层。另外,根据物质含有液中的混入物的量可以不设置过滤器。
[0020]将物质含有液从开口部106投入容器100内时,物质含有液被2层过滤器过滤,从物质含有液除去细胞、病毒等的残渣。通过过滤器的孔的物质含有液与冷冻干燥体114接触,溶解冷冻干燥体。然后,物质含有液中的物质与冷冻干燥体114中的物质结合用固相载体结合。从由此得到的结合有物质的载体,例如可根据后面叙述的物质提取方法分离出物质。容器100的材质没有特别限定,可以是由高分子构成的塑料或金属等。图2是示意地表示图1的A的容器的截面。如图2所示,过滤器设置部112的孔116优选设置在面的一部分使得通过孔116的物质含有液流向冷冻干燥体114,但过滤器设置部112的孔也可以设置在整体,通过将部分开有孔116的塑料片等夹持在过滤器设置部112与过滤器之间,使得物质含有液流向冷冻干燥体114。
[0021]冷冻干燥体114是将添加剂和物质结合用固相载体冷冻干燥而成的。使物质结合用固相载体分散在加有添加剂的液体中,在其分散的状态下冷冻干燥而成。该冷冻干燥体114中物质结合用固相载体以分散的状态存在。作为与物质结合用固相载体一起被冷冻干燥的添加剂,只要是在冷冻干燥后保持物质结合用固相载体的分散状态且与水接触时容易溶解的物质即可,例如,可以使用海藻糖、蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、糊精、葡聚糖、聚乙二醇、环糊精或者麦芽糊精等。与物质结合用固相载体一起被冷冻干燥的添加剂的向液体中的添加量只要是冷冻干燥后确保物质结合用固相载体的分散状态的量即可,例如,优选向10 μ I的液体中添加200?2000 μ g的海藻糖。物质结合用固相载体只要是能够在表面进行结合的物质即可,例如可举出二氧化硅粒子、聚合物粒子、磁性粒子等一直以来公知的物质,但优选使用磁性粒子。
[0022]图3是示意地表示实施方式涉及的容器中的图1的B的截面的截面图。凹部118是使物质含有液与冷冻干燥体114接触的部分。凹部118是在容器100的底面119呈洼地状的部位。在凹部118粘接有冷冻干燥体114,另外,形成有流出口 110。通过过滤器的物质含有液在底面119沿凹部118流动,通过流出口 110向容器外流出。
[0023](核酸的提取方法)
[0024]接下来,参照图4对使用本实施方式涉及的容器100提取核酸的方法进行说明。图4是表示使用实施方式涉及的容器的核酸提取方法的示意图。
[0025]首先,对核酸提取方法中使用的容器100、瓶200和核酸提取用设备400进行说明。
[0026]瓶200的上部具有开口部220。在本
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