一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法

文档序号:8553436阅读:747来源:国知局
一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯技术领域,具体是一种从 木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法。
【背景技术】
[0002] 中药木香为菊科植物木香AucklandialappaDecne.的干燥根,性辛、温,味苦, 归脾、胃、大肠、三焦、胆经,有行气止痛、温中和胃、健脾消食之功效,用于胸腹胀痛、呕吐、 腹泻、痢疾、里急后重、食积不消等症的治疗。药理研宄表明木香在抗心血管疾病、抗炎、抗 癌、抗溃疡、抗病原微生物等方面表现出良好的药理活性。化学成分研宄表明倍半萜内酯为 木香的主要有效成分,其中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量最高,是木香及其相关制剂 质量控制的主要指标。据文献报道,分离纯化木香中倍半萜内酯类成分的方法主要有反复 硅胶柱层析法及高速逆流色谱法,硅胶柱层析法的操作过程繁琐,回收率较低,经常使用氯 仿、苯等毒性较强的有机溶剂;在高速逆流色谱法中溶剂系统的选择比较困难,缺乏理论指 导。因此,建立一种高效快速的提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法对于深化 木香的药理研宄及完善质量控制体系均具有重要的意义。

【发明内容】

[0003] 本发明提供一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法,高 效、快速、简便。
[0004] 本发明是以如下技术方案实现的:一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去 氢木香内酯的方法,其特征在于:具体步骤如下:
[0005] (1)木香中倍半萜内酯的提取:将木香药材粉碎,用有机溶剂进行提取,过滤,提 取液经减压浓缩得粗提物,有机溶剂的用量是木蝴蝶药材用量的6~15倍;
[0006] (2)木香中倍半萜内酯的分离分析:用分析型高效液相色谱仪对步骤(1)中粗提 物的组成进行分离分析,流动相为甲醇-水,甲醇与水的体积比为65:35,流速为LOmL/ min;
[0007] (3)木香中倍半萜内酯的分离纯化:用半制备型高效液相色谱仪对步骤1中粗提 物中的成分进行分离纯化,流动相为甲醇-水,甲醇与水的体积比为70:30,流速为20~ 30mL/min;根据色谱图手动收集目标组分馏分,减压浓缩除去溶剂;(4)化合物的纯度检测 及结构鉴定:将每一个目标组分馏分减压浓缩后用甲醇溶解,其纯度用高效液相色谱法进 行检测,色谱条件见步骤(2),分析结果表明2种化合物的纯度都达到了 98%以上,经核磁 共振波谱分析2种化合物分别是木香烃内酯和去氢木香内酯。
[0008] 其进一步是:步骤(2)分析型高效液相色谱仪中的色谱柱采用分析型C18柱,检测 波长为220nm,柱温为室温。
[0009] 步骤(3)中半制备型高效液相色谱仪中的色谱柱采用半制备型C18柱。
[0010] 步骤(1)中有机溶剂为甲醇或乙醇或石油醚或乙酸乙酯;提取方法为冷浸或超声 或加热回流。乙醇的浓度为50%~100%。
[0011] 步骤(1)提取次数为2-5次,步骤(1)提取时间为0. 5-2小时。
[0012] 步骤(1)提取次数为3次,步骤(1)提取时间为1小时。
[0013] 步骤⑵分离纯化用甲醇-水洗脱液进行洗脱,洗脱方式有62%甲醇-水等度洗 脱/65 %甲醇-水等度洗脱/68 %甲醇-水等度洗脱。
[0014]步骤(3)分离纯化用甲醇-水洗脱液进行洗脱,洗脱方式有甲醇-水梯度洗脱或 65%甲醇-水等度洗脱或70%甲醇-水等度洗脱或75%甲醇-水等度洗脱。
[0015] 本发明有益效果是:高效、快速从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内 酯2种化合物的纯度都达到了 98%以上;工艺过程绿色环保,对环境无严重危害,综合成本 低。
【附图说明】
[0016]图1是木香粗提物的分析型高效液相色谱图;
[0017]图2是木香粗提物的半制备型高效液相色谱图;
[0018] 图3是木香烃内酯的高效液相色谱图及紫外光谱图;
[0019] 图4是去氢木香内酯的高效液相色谱图及紫外光谱图。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例和附图详细说明本发明的技术方案,但保护范围不被此限制。实 施例中所用设备或原料皆可从市场获得。所用试剂均购自天津市化学试剂三厂,所用水为 去离子水。
[0021] 从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法,其步骤为:
[0022] (1)木香中倍半萜内酯的提取:将木香药材粉碎,用8倍量95%乙醇加热回流提取 3次,每次lh,过滤,将提取液合并,减压浓缩得粗提物。
[0023] (2)木香中倍半萜内酯的分离分析:用分析型高效液相色谱仪对粗提物的组成进 行分离分析,色谱柱为C18柱(250X4.6mmI.D.,5ym),流动相为甲醇-水(65:35,V/V);流 速为I.OmL/min,检测波长为220nm,柱温为室温。
[0024] (3)木香中倍半萜内酯的分离纯化:用半制备型高效液相色谱仪对粗提物中的成 分进行分离纯化,色谱柱为C18柱(250X25. 4mmI.D.,IOym),流动相为甲醇-水(70:30, V/V),流速为25.OmL/min,检测波长为220nm,柱温为室温。根据色谱图手动收集目标组分 馏分,减压浓缩除去溶剂。
[0025] (4)化合物的纯度检测及结构鉴定:将每一个目标组分馏分减压浓缩后用甲醇溶 解,其纯度用高效液相色谱法进行检测,色谱条件见步骤(2),分析结果表明2种化合物的 纯度都达到了 98 %以上。经核磁共振波谱分析2种化合物分别是木香烃内酯和去氢木香内 酯。
[0026]发明人通过使用不同浓度的甲醇作流动相,采用不同的洗脱方式,控制甲醇-水 洗脱液的流速为20-30mL/min(优选25mL/min),优选出了实现本发明目的的纯化条件,有 关实验结果如下:
[0027] 表一木香粗提物的半制备型高效液相色谱分离条件
[0028]
【主权项】
1. 一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法,其特征在于:具 体步骤如下: (1) 木香中倍半萜内酯的提取:将木香药材粉碎,用有机溶剂进行提取,过滤,提取液 经减压浓缩得粗提物,有机溶剂的用量是木蝴蝶药材用量的6~15倍; (2) 木香中倍半萜内酯的分离分析:用分析型高效液相色谱仪对步骤(1)中粗提物的 组成进行分离分析,流动相为甲醇-水,甲醇与水的体积比为65:35,流速为1.0 mL/min ; (3) 木香中倍半萜内酯的分离纯化:用半制备型高效液相色谱仪对步骤1中粗提物中的成分进 行分离纯化,流动相为甲醇-水,甲醇与水的体积比为70:30,流速为20~30mL/min ;根据 色谱图手动收集目标组分馏分,减压浓缩除去溶剂; (4)化合物的纯度检测及结构鉴定:将每一个目标组分馏分减压浓缩后用甲醇溶解, 其纯度用高效液相色谱法进行检测,色谱条件见步骤(2),分析结果表明2种化合物的纯度 都达到了 98 %以上,经核磁共振波谱分析2种化合物分别是木香烃内酯和去氢木香内酯。
2. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:步骤(2)分析型高效液相色谱仪中的色谱柱采用分析型C 18柱,检测波长 为220nm,柱温为室温。
3. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:步骤(3)中半制备型高效液相色谱仪中的色谱柱采用半制备型C 18柱,检 测波长为220nm,柱温为室温。
4. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:步骤(1)中有机溶剂为甲醇或乙醇或石油醚或乙酸乙酯;提取方法为冷 浸或超声或加热回流。
5. 根据权利要求4所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:乙醇的浓度为50%~100%。
6. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:步骤(1)提取次数为2-5次,步骤(1)提取时间为0. 5-2小时。
7. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:步骤(1)提取次数为3次,步骤(1)提取时间为1小时。
8. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯 的方法,其特征在于:步骤(2)分离纯化用甲醇-水洗脱液进行洗脱,洗脱方式有62%甲 醇-水等度洗脱/65 %甲醇-水等度洗脱/68 %甲醇-水等度洗脱。
9. 根据权利要求1所述的一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的 方法,其特征在于:步骤(3)分离纯化用甲醇-水洗脱液进行洗脱,洗脱方式有甲醇-水梯 度洗脱或65%甲醇-水等度洗脱或70%甲醇-水等度洗脱或75%甲醇-水等度洗脱。
【专利摘要】本发明公开了一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法,涉及提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯技术领域。本发明是以木香药材为原料,经过下述步骤:(1)木香中倍半萜内酯的提取;(2)木香中倍半萜内酯的分离分析;(3)木香中倍半萜内酯的分离纯化;(4)化合物的纯度检测及结构鉴定。用半制备型高效液相色谱进行分离纯化,流动相为甲醇-水,得到2种高纯度的成分,经鉴定分别是木香烃内酯和去氢木香内酯。本工艺过程绿色环保,对环境无严重危害,综合成本低。
【IPC分类】C07D307-93
【公开号】CN104876900
【申请号】CN201510253201
【发明人】杨冬芝, 杨方秀, 陆益红, 汤道权, 樊夏雷
【申请人】徐州医学院
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年5月18日
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