一种制备s-腺苷蛋氨酸的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种制备S-腺苷蛋氨酸的方法。
【背景技术】
[0002] S-腺苷蛋氨酸（S-adenosyl-L-methionine，简写为SAM)是一种重要的生理活性 物质，作为甲基供体和生理性巯基化合物的前体，它参与人体内与甲基转移和巯基转移相 关的多种生化反应，对于维持肝细胞膜的正常流动相和肝脏的解毒功能具有不可或缺的作 用。
[0003] 研宄发现，SAM对于病毒性肝炎、酒精肝、脂肪肝等肝病导致的肝内胆汁淤积、肝硬 化、抑郁症和骨关节炎等多种疾病具有积极的治疗效果，已在意大利、德国、西班牙等国家 被批准为处方药进入临床应用。
[0004] 在我国，SAM已进入2009版国家医保目录，用于胆汁淤积性肝病的治疗。此外，SAM 还具有止痛、抗抑郁等保健效果，已被美国FDA批准为一种新型膳食补充剂进入市场，年销 售量已超过10亿美元，并以每年10%以上的速度递增。近年来，SAM还被用来生产去肩、止 痒、减皱、抗衰老的美容化妆品，应用范围越来越广。随着SAM应用范围的日渐拓展，市场对 SAM的需求量也与日俱增。
[0005] SAM的主要制备方法有三种：包括化学合成、酶合成和发酵制备。
[0006] 化学合成的SAM是由（+) -SAM和（-)-SAM两种光学异构体组成的消旋体，而其中 仅有（-)-SAM才具有生理活性。由于难以分离（+)-SAM和（-)-SAM，而且生产成本较高，因 此，化学合成在SAM的大规模生产中应用较少。
[0007] 酶合成和发酵制备是目前大规模生产SAM的主流方法。这两种方法都是利用具有 S-腺苷甲流氨酸合成酶（简称SAM合成酶）活性的生物催化剂（生产SAM合成酶的菌株细 胞或SAM合成酶本身）催化L-蛋氨酸（也被称为L-甲硫氨酸）与三磷酸腺苷（ATP)的合 成反应而产生S-腺苷蛋氨酸（见反应式I)。
【主权项】
1. 一种制备S-腺苷蛋氨酸的方法，包括：以D/L-蛋氨酸为原料，发酵获得S-腺苷蛋 氨酸，其特征在于，往发酵液中添加柠檬酸和磷酸盐。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述柠檬酸的浓度为1.0 ~lOmmol/L ;磷酸 盐的浓度为〇. 05~0. 50mol/L。
3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述柠檬酸的浓度为4. 0~6. Ommol/L ;磷 酸盐的浓度为〇? 2~0? 3mol/L〇
4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的磷酸盐为磷酸二氢钾。
5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，接种前，将柠檬酸和磷酸盐添加至发酵液 中。
6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述菌株为产S-腺苷甲硫氨酸合成酶的野 生菌或工程菌。
7. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵的温度为25~30°C。
8. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵液的pH值为4. 5~5. 5。
9. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述D/L-蛋氨酸分次投加入发酵液中，投加 量为2~2. 5g/L，投加间隔时间为5~6h，投加次数为5~6次。
【专利摘要】本发明公开了一种制备S-腺苷蛋氨酸的方法，包括：以D/L-蛋氨酸为原料，发酵获得S-腺苷蛋氨酸，往发酵液中添加柠檬酸和磷酸盐。本发明将柠檬酸和磷酸盐添加入发酵液中，使菌株利用柠檬酸和磷酸盐合成ATP，在保证不显著提高原料成本的情况下，解决了现有技术中S-腺苷蛋氨酸产量因胞内ATP浓度低造成的产物产量低的问题，显著提高了S-腺苷蛋氨酸产量和L-蛋氨酸的转化率。
【IPC分类】C12P19-40
【公开号】CN104878059
【申请号】CN201510149807
【发明人】金志华, 胡升, 梅乐和, 金庆超, 吴志革, 杨郁, 尚龙安
【申请人】浙江大学宁波理工学院
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2015年3月31日