一种农用高浓度光合细菌的简易快速培养方法及应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物技术及微生物应用领域，尤其涉及一种农用高浓度光合细菌的简易快速培养方法及应用。
【背景技术】
[0002]光合细菌(Photosynthetic Bacteria，简称PSB)是地球上出现最早、自然界中普遍存在、具有原始光能合成体系的原核生物，是在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，是一类没有形成芽孢能力的革兰氏阴性菌，是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。近几十年来，人们逐步认识到菌体的营养价值及一些特殊的生理活性，具有进行光合作用、发酵以及固氮、产氢等功能，光合细菌能被广泛应用于生态环境、农业种植、畜牧水产养殖及人类生活方面，现有光合细菌培养方法操作过程复杂，杂菌较多、光合细菌浓度低、培养周期长、生产成本高、不适宜大面积推广使用。
【发明内容】
[0003]针对上述不足，为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是:
[0004]一种农用高浓度光合细菌的简易快速培养方法，所述培养方法包括如下步骤:
[0005](I)光合细菌菌种的选择
[0006]生产用的光合细菌菌种为天津农科院生物中心提供的红螺菌科红假单胞菌属的沼泽红假单胞菌 Rhodopseudomonas palustris ；
[0007](2)光合细菌菌种的培养米用室内培养或室外培养中的任意一种:
[0008]室内培养，采用玻璃水槽、水泥池、长筒塑料袋等培养，培养介质为井水、自来水或池塘水中的任意一种，温度为25?35°C，pH 6.5?9.0，光合细菌菌种接种量为光合细菌培养液体积的15%?25%，光照强度为2500?50001ux条件下培养，在4?6天能达到发酵终点，菌液浓度达到50亿/毫升以上；
[0009]室外培养，采用25L或50L的宽口径白色塑料桶培养，使用前用二氧化氯稀释液喷洒内壁，然后用培养介质洗净，培养介质为井水、自来水或池塘水中的任意一种，日平均气温在25-30°C以上，天气晴好，3?5天能达到发酵终点，菌液浓度达到50亿/毫升以上。
[0010]进一步，所述光合细菌的培养液，以重量份数计，包括下列组分:乙酸钠2.0?4.0份、磷酸二氢钾0.2?0.3份、α -萘乙酸钠0.05?0.15份、复硝酚钠0.05?0.15份、山梨酸钾0.1?0.3份、氯化铵1.2?1.5份、氯化钠2.0?4.0份、硫酸镁0.2?0.3份、氯化钴0.0015?0.0025份、硫酸亚铁0.03?0.04份、硫酸锰0.0015?0.003份、EDTA0.01?0.03份、钼酸钠0.003?0.008份、硼酸0.001?0.002份、酵母膏0.1?0.5份，水1000份。
[0011]进一步，所述步骤(2)中培养介质的pH为7.0?8.5。
[0012]进一步，光合细菌菌种接种量为光合细菌培养液体积的20%。
[0013]进一步，所述步骤(2)中室内培养的温度为30°C，室外培养的温度为25°C。
[0014]进一步，所述光合细菌的培养液，以重量份数计，包括下列组分:乙酸钠3.0份、磷酸二氢钾0.3份、α-萘乙酸钠0.1份、复硝酚钠0.1份、山梨酸钾0.2份、氯化铵1.2份、氯化钠3.0份、硫酸镁0.2份、氯化钴0.0015份、硫酸亚铁0.03份、硫酸锰0.0015份、EDTA0.025份、钼酸钠0.005份、硼酸0.001份、酵母膏0.3份，水1000份。
[0015]根据上述所述的一种农用高浓度光合细菌的简易快速培养方法培养的高浓度光合细菌在农业生产中的应用。
[0016]本发明具有的优点和积极效果是:
[0017](I)本发明优化了培养基的组成及成分，培养基中加入α-萘乙酸钠与复硝酚钠这两种植物生长调节剂，能促进光合细菌的快速繁殖，加入的山梨酸钾具有防腐抑菌的作用，可以抑制杂菌生长，因此可直接使用自然水来培养光合细菌，能够达到低杂菌，菌液的浓度能达到50亿/ml，而且降低了生产成本；
[0018](2)本发明培养光合细菌的速度比普通的培养方法快2?4天，能够在自然水(井水、自来水、池塘水等)介质下培养，简化了光合细菌的培养过程，培养所需设备简单，农户可自行生产。
[0019](3)本发明制备的光合细菌可以作为菌种持续扩大培养，操作简单，设备投资少，是一种适合农民自己培养，可以广泛推广的方法。
【具体实施方式】
[0020]实施例1每份以Ikg计
[0021]一种农用高浓度光合细菌的简易快速培养方法，所述培养方法包括如下步骤:
[0022](I)光合细菌菌种的选择
[0023]生产用的光合细菌菌种为天津农科院生物中心提供的红螺菌科红假单胞菌属的沼泽红假单胞菌 Rhodopseudomonas palustris ；
[0024](2)光合细菌菌种的培养采用室内培养或室外培养中的任意一种:
[0025]配制培养液:称取乙酸钠3000g、磷酸二氢钾300g、α -萘乙酸钠100g、复硝酸钠10g,山梨酸钾200g、氯化铵1200g、氯化钠3000g、硫酸镁200g、硼酸lg、氯化钴1.5g、硫酸亚铁30g、硫酸锰1.5g、EDTA25g、钼酸钠5g、酵母膏300g、水1000kg。
[0026]室内培养，采用玻璃水槽、水泥池、长筒塑料袋等培养，培养介质为井水、自来水或池塘水中的任意一种，温度为30°C，pH8.0，光合细菌菌种接种量为光合细菌培养液体积的20%,光照强度为25001uX条件下培养，在4?6天能达到发酵终点，菌液浓度达到50亿/_升以上；
[0027]室外培养，采用25L的宽口径白色塑料桶培养，使用前用二氧化氯稀释液喷洒内壁，然后用培养介质洗净，PH8.0，光合细菌菌种接种量为光合细菌培养液体积的20%，培养介质为井水、自来水或池塘水中的任意一种，日平均气温25-30°C，天气晴好，3?5天能达到发酵终点，菌液浓度达到50亿/毫升以上。
[0028]实施例2每份以Ikg计
[0029]一种农用高浓度光合细菌的简易快速培养方法，所述培养方法包括如下步骤:
[0030](I)光合细菌菌种的选择
[0031]生产用的光合细菌菌种为天津农科院生物中心提供的红螺菌科红假单胞菌属的沼泽红假单胞菌 Rhodopseudomonas palustris ；
[0032](2)光合细菌菌种的培养米用室内培养或室外培养中的任意一种:
[0033]配制培养液:称取乙酸钠3500g、磷酸二氢钾200g、α -萘乙酸钠130g、复硝酸钠80g、山梨酸钾150g、氯化铵1400g、氯化钠2000g、硫酸镁250