一种am菌根真菌mw21及其生防菌剂及应用

文档序号:9245880阅读:1309来源:国知局
一种am菌根真菌mw21及其生防菌剂及应用
【技术领域】
[0001] 本发明植物保护领域,涉及一种AM菌根真菌MW21及其生防菌剂及应用。
【背景技术】
[0002] 木本植物病害主要有52种,其中叶部病害32种,枝干病害9种,根部病害5种、花 果病害6种。其病源有真菌、细菌、病毒、类菌质体、线虫、寄生性种子植物以及非侵染性因 素。虽对病害防治做了一些工作,但总的看重视不够,轻的使树木生长衰弱,降低观赏价值, 重则死亡,造成不可弥补的社会、生态及经济效益损失。如地上部病害炭疽病是世界范围内 农业生产中发生普遍且危害较重的植物病害,对许多林木、果树、茶树、银杏等造成严重的 经济损失,主要危害叶片和嫩梢;地下部病害根部病害白纹羽病,为害海棠、芍药、苹果、葡 萄、梅、桃等。植物染病后,树势衰弱,叶片自上而下变黄,凋萎,枝叶干枯,最后全株枯死。
[0003] 因此,对木本植物病害防治刻不容缓。目前,已有一些防治方法:选用抗病品种,移 除病株、集中处理,加强田间管理等物理措施;施用甲基硫菌灵、井闪霉素、百菌清、多菌灵 等化学农药。由于化学农药对环境以及人类健康的危害已日益明显,近年来,出现了一些生 物防治手段,如利用生防菌株或天然代谢产物等进行生物防治,取得了一定的成果,但是其 效果不稳定等缺陷限制了其进一步的推广。因此高效、稳定的防治木本植物病害的生防菌 株及其制剂的研发是迫切需要的。
[0004] 随着气候的变化日益剧烈,不良环境对木本植物的生长造成造成植株矮小、生长 不良,易产生生理性病害等严重后果,不良环境包括干旱、洪涝、高温、寒冷等恶劣天气。
[0005] 另外,木本植物在移栽时,遇到移栽存活率低下,以及移栽后生长势弱,是制约木 本植物栽培的重要因素。目前,在生产上主要通过选用具有良好排水性和透气性的基质配 方、加强移栽后的管理以及利用植物激素,以提高其存活率以及移栽后生长势。但是,这些 应用的提高并不十分显著、稳定。
[0006]AM菌根真菌(arbuscularmycorrhizalfungi,以下简称AM真菌)可以在植物根 系定植,建立共生体。AM真菌的菌丝从环境中吸收营养物质,转运至寄主植株,类似于以菌 丝代替活体植物的根的部分功能,为寄主提供一定的营养物质。且AM真菌还能够调节寄主 体内激素的平衡,如生长素、细胞分裂素等,提高光合作用速率,促进寄主的生长,提高其存 活率。AM菌还能够抑制病原菌、促进有益菌生长的作用,可与其他拮抗菌结合。生防菌AM 真菌诱导抗性及诱导系统抗性,即AM菌侵染植物根系后,诱导植物体内酚酸类代谢产物增 加,使植物产生局部或系统防御反应。并且还能诱导木本植物的抵抗逆境的能力。

【发明内容】

[0007] 本发明的目的是针对木本植物上现有技术的上述不足,提供一种AM菌根真菌 MW21〇
[0008] 本发明的目的是提供该AM菌根真菌MW21制备的生防菌剂。
[0009]本发明的又一目的是提供该AM菌根真菌丽21及其生防菌剂在木本植物上的应 用。
[0010] 本发明的目的可通过如下技术方案实现:
[0011] -种AM菌根真菌MW21,该菌株为微白巨孢囊霉(Gigasporaalbida),于2014年 11月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC No.10058。
[0012] 本发明所述的丛枝菌根真菌MW21在制备防治木本植物病害、促进木本植物生长、 提高果实产量和质量、提高木本植物抗逆性的制剂中的应用。
[0013] 其中,所述的木本植物优选鹅掌楸、苹果树、葡萄树、银杏;所述的病害优选真菌、 细菌、病毒病害,进一步优选白纹羽病或炭疽病;所述的抗逆能力优选抗寒、抗寒、耐热或耐 涝能力,进一步优选抗旱能力;所述的促进生长优选包括提高种子发芽率、幼苗移栽存活 率,或促进地上部枝叶、根部生长。
[0014] 用本发明所述的AM菌根真菌丽21制备的生防菌剂。
[0015] 所述的生防菌剂优选将含有本发明所述的AM菌根真菌丽21孢子的土按照一定 比例与高岭土混合,烘干后粉碎,并加入1 %的阿拉伯胶,以及添加磷酸二氢钠将pH调整至 7. 0,过300目筛,并烘干至3 %的含水量,制成浓度为40 - 60个孢子/g的粉剂;或者经造 粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。
[0016] 本发明所述的生防菌剂的制备方法,包括以下步骤:
[0017] 1)将含有本发明所述的浓度为40 - 60个丽21孢子/g的土按体积比1:80 - 120 的比例与培养基质均匀混合,所述培养基质配方:泥炭土与经过至少2h热气蒸过的粗砂体 积比1:0. 5 - 3混合;
[0018] 2)将混合好含MW21孢子的基质装入灭菌后的盆钵,并种上寄主植物,保证孢子能 很充分的跟高粱接触到,4个月后,将盆钵内的土壤和寄主植物根系一块取出,烘干,粉碎, 保持干燥,制得含菌根真菌MW21孢子的土壤,备用;所述的寄主植物优选高粱或三叶草;
[0019] 3)制剂:将步骤2)制得的含菌根真菌丽21孢子的土壤与高岭土混合,烘干后粉 碎,粉碎过程中加入质量比1 %的阿拉伯胶,并添加磷酸二氢钠将pH调整至7. 0,过300目 筛,再次烘干至含水量为3%,最终制成浓度为40 - 60个孢子/g的生防菌MW21粉剂;或者 经造粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。
[0020] 本发明所述的生防菌剂的制备方法,优选包括以下步骤:
[0021] 1)将含有本发明所述的菌株丽21孢子的土按体积比1:80 - 120的比例与培养基 质均匀混合,所述培养基质配方:泥炭土与经过至少2h热气蒸过的粗砂体积比1:0. 5 -3混 合;
[0022] 2)将混合好含孢子的基质装入灭菌后地盆钵,并种上高粱,每个盆钵50-60颗种 子,保证孢子能很充分的跟高粱接触到,4个月后,将盆钵内的土壤和高粱根系一块取出,烘 干,粉碎至800目,保持干燥,制得含菌根真菌孢子的土壤,备用;
[0023] 3)制剂:将步骤2)制得的含菌根真菌孢子的土壤与高岭土混合,烘干后粉碎至 300目,粉碎过程中加入质量比1 %的阿拉伯胶,并添加磷酸二氢钠将pH调整至7. 0,过300 目筛,再次烘干至含水量为3%,最终制成浓度为40 - 60个孢子/g的生防菌MW21粉剂;或 者经造粒制成颗粒剂或经压片制成片剂。
[0024] 本发明所述生防菌剂MW21在防治木本植物病害、促进木本植物生长、提高果实产 量和质量、提高木本植物抗逆性中的应用。
[0025]其中,所述的木本植物优选鹅掌楸、苹果树、葡萄树、银杏;所述的病害优选真菌、 细菌、病毒病害,进一步优选白纹羽病或炭疽病;所述的抗逆能力优选抗寒、抗寒、耐热或耐 涝能力,进一步优选抗旱能力;所述的促进生长优选包括提高种子发芽率、幼苗移栽存活 率,或促进地上部枝叶、根部生长。
[0026]所述的生防菌剂优选撒在移栽苗木根部,按照每株2g的用量进行应用。
[0027]有益效果:
[0028]本发明提供了一株对木本植物具备促生、防病、抗逆作用的AM菌根真菌MW21。利 用该菌株制备的生防菌剂是针对提高对木本植物根部病害以及地上部病害的生物防治效 果以及促生和抗逆的制剂。由于是生物制剂,完全没有因化学农药的使用所带来的一系列 问题,因而能有效保护生态系统,实施农业的可持续发展,且在生产上对环境无污染。撒在 移栽苗木根部的处理方式,可减少化学药剂的大量使用。
[0029]温室试验表明,AM真菌粉剂高对木本植物根部病害以及地上部病害有显著的生防 效果,且对木本植物如苹果、葡萄、鹅掌楸有明显的促生作用,增加苗木的株高、茎粗、上下 部鲜干重、叶绿素a、叶绿素b以及总叶绿素含量。
[0030]该菌根真菌MW21粉剂,可室温保存6个月-1年。该制剂对木本植物的白纹羽病 等各种土传病害的防治效果达到60%以上,对炭疽病等各种地上部病害的防治效果达到 52. 29%以上;在温室条件下木本植物的移栽存活率达92. 36%以上;AM真菌处理的木本植 物在叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量、株高、茎粗、上下部鲜干重显著提高,对其具有一定 的促生作用。
【附图说明】
[0031]图1、AM菌剂处理对木本植物耐旱性的影响
[0032]生物材料保藏信息
[0033] 生防菌AM菌根真菌MW21,为微白巨孢囊霉(Gigasporaalbida),于2014年11 月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏号为CGMCC NO. 10058,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研宄所。
【具体实施方式】
[0034] 实施例1
[0035]-种生防制剂AM菌根真菌丽21粉剂,含微生物成分:AM菌根真菌丽21 (保藏号CGMCCNo.10058)由贵州省烟草根围土壤中分离得到。
[0036]AM菌根真菌MW21的分离、鉴定方法:用湿筛倾注-蔗糖离心法分离AM真菌孢子, 称取l〇〇g土样于离心管中,加水至离心管2/3处,3000rpm离心3min中后去掉上清液,加入 45%-50%的蔗糖溶液,搅匀后迅速1500印111离心1.51^11,过400目筛,并用水轻轻冲洗筛 子上面的孢子和孢子果,用生理盐水收集于培养皿中,在显微镜下统计孢子数目并观察孢 子形态。
[0037] 丽21形态学特征:孢子土中单生,球形,白色,143 - 330 ( - 350)ym,偶见椭圆形, 233 -252X234 -250ym。孢壁由不可分的多个亚层组成,厚4-12ym。鳞茎状柄样细胞无 色至黄色,24 - 55ym。孢壁轻压易碎,连孢菌丝有隔有分支。MW21经形态学鉴定为微白巨 孢囊霉(Gigasporaalbida),送交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏, 菌种保藏号为CGMCCNO. 10058。
[0038] 实施例2丽21粉剂工艺
[0039] 该AM真菌丽21粉剂的制备方法如下:
[0040] 1)将含有所述的菌株丽21孢子的土壤按体积1:80 - 120的比例与培养基质均匀 混合,基质配方:泥炭土(购买于南京栖霞区大理花丼销售中心)与经过至少2h热气蒸过 的粗砂(购买于南京栖霞区大理花丼销售中心)1 :〇. 5 - 3混合;
[0041] 2)将混合好含孢子的基质装入灭菌后地盆钵(直径15cm,高19cm),并种上高粱, 每个盆钵50-60颗种子,保证孢子能很充分的跟高粱接触到。4个月后,将盆钵内的土壤和 高粱根系一块取出,烘干,粉碎至800目,保持干燥,制得含菌根真菌孢子的土壤,备用;
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