一株防治甜菜根腐病并且促进甜菜生长的芽孢杆菌菌株的制作方法

文档序号:9270952阅读:781来源:国知局
一株防治甜菜根腐病并且促进甜菜生长的芽孢杆菌菌株的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一株防治甜菜根腐病并且促进甜菜生长的芽抱杆菌菌株。
【背景技术】
[0002] 甜菜根腐病是甜菜生产上发生的严重病害,由多种真菌和细菌分别或混合侵染造 成。甜菜根腐病在我国甜菜主产区均有发生,连作地块发病较重,一般减产10%~40%, 严重可导致绝产。我国甜菜根腐病的优势致病菌是镶刀菌(化sarium),其次为丝核菌 巧hizoctonia)致病菌。国内外研究表明,抗病品种的选育和应用是防治甜菜根腐病的最 有效途径,在我国目前尚无高抗甜菜根腐病品种可供生产应用的情况下,生物防治和化学 防治均是控制甜菜根腐病发生和危害的有效技术措施,国内化学防治主要应用福美双、± 菌消等,而生物防治具有无毒,无污染的特点,受到了广泛重视。
[0003] 芽抱菌属炬acillusSP.)是植物病害生防微生物的重要组成部分,具有显著的生 防潜力,能产生耐热抗逆的芽抱,利于生防菌剂的生产、剂型加工及在环境中存活、定殖与 繁殖。在稳定性、与化学农药的相容性等方面,明显优于非芽抱杆菌和真菌生防菌剂,芽抱 杆菌在括抗病原菌的过程中有一到几种机制参与。其中,主要包括括抗作用,竞争作用,诱 导植物获得系统抗性,促进植物生长等。抗菌物质主要包括抗生素或细菌素类,抗菌肤类和 产生几了质酶。
[0004] 尽管目前化学农药在防治植物病害中仍占主导地位,但芽抱杆菌杀菌剂对多种植 物病原菌有很强的括抗作用,具有环境兼容性好,抗逆性强,对人畜安全,不易产生抗药性 等优点,更符合现代社会对农业生产及有害生物综合防治的需求。芽抱杆菌不但可W单独 使用,还可W与化学农药或植物源杀菌剂复配,实现优势互补,减少用量,增强防效,也可与 其他括抗菌混合使用,实现多种抗生菌功能互补,兼防多种病害,作用持久的协同防治效 果。因此,芽抱杆菌作为生防菌剂,同其他微生物相比表现出更大的发展潜力和更广阔的应 用前景。

【发明内容】

[0005] 本发明所要解决的技术问题是提供一株可用于防治甜菜根腐病并且可提高甜菜 块根产量的芽抱杆菌。
[0006] 本发明所提供的芽抱杆菌为蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA,其在中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、的保藏编号为CGMCCNo. 7566。该菌株在本申 请中简称LHITBA。
[0007] 含有所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA的菌剂也属于本发明的保护范 围。
[000引所述菌剂可为下述1)-3)中任一的菌剂:
[0009] 1)用于防治甜菜根腐病和提高甜菜产量的菌剂;
[0010] 2)用于防治甜菜根腐病的菌剂;
[0011] 3)用于提高甜菜产量的菌剂。
[0012] 所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA在制备下述1)-3)中任一的菌剂中 的应用也属于本发明的保护范围:
[0013] 1)用于防治甜菜根腐病和提高甜菜产量的菌剂;
[0014] 2)用于防治甜菜根腐病的菌剂;
[0015] 3)用于提高甜菜产量的菌剂。
[0016] 含有所述蜡状芽抱杆菌炬acillus cereus)LHTYBA或所述的菌剂的生物有机肥也 属于本发明的保护范围。
[0017] 其中,所述菌剂的活性成份可为所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA,也 可还含其他物质,如其他防治甜菜根腐病和/或提高甜菜产量的菌剂菌株。所述菌剂还可 包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。所述固体载体为矿物材料、生物材料或高分 子化合物;所述矿物材料为粘±、滑石、高岭±、蒙脱石、白碳、沸石、娃石、草炭±和娃藻± 中的至少一种;所述生物材料为各类作物的枯杆、松壳、稻草、花生壳、玉米粉、豆粉、淀粉、 草炭和动物的粪便中的至少一种;所述高分子化合物为聚己締醇和/或聚二醇。所述液体 载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水;所述有机溶剂为癸烧和/或十二烧。所述菌剂中, 所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA可被培养的活细胞、活细胞的发酵液、细 胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。所述菌剂的剂型可为多种剂型,如液 剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
[0018] 培养所述蜡状芽抱杆菌炬acillus cereus)LHTYBA的方法和制备所述菌剂的方法 也属于本发明的保护范围。
[0019] 本发明所提供的培养所述蜡状芽抱杆菌任acillus cereus)LHTYBA的方法,包括 将所述蜡状芽抱杆菌炬acillus cereus)LHTYBA在用于培养芽抱杆菌的培养基中培养的步 骤。
[0020] 本发明所提供的所述菌剂的制备方法,包括如下步骤:将所述的蜡状芽抱杆菌 炬acillus cereus) LHTYBA作为活性成分,得到所述菌剂。
[0021] 所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA或所述菌剂在栽培甜菜中的应用也 属于本发明的保护范围。
[0022] 利用所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA栽培甜菜的方法也属于本发明 的保护范围。
[0023] 本发明所提供的栽培甜菜的方法,包括向栽培甜菜的±壤中施入所述蜡状芽抱杆 菌炬acilluscereus)LHTYBA或所述的菌剂。
[0024] 上述栽培甜菜的方法中,所述蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA或所述 菌剂的用量为每亩施入l〇iic化-l〇i2c化(如5Xl〇iic化)所述蜡状芽抱杆菌炬acillus cereus)LHTYBA〇
[0025] 田间实验证明,蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus)LHTYBA对甜菜根腐病的防治效 果可达86. 7%,可使甜菜增产46. 00%。本发明所提供的蜡状芽抱杆菌炬acilluscereus) LHTYBA,能够在作物根际定殖,用于甜菜生产增产效果显著,在微生物菌剂和生物有机肥生 产应用中具有广阔前景。
[00%] 保藏说巧
[0027] 菌种名称;蜡状芽抱杆菌
[002引 拉了名:炬acilluscereus)
[0029]菌株编号;LHTYBA
[0030] 保藏机构:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、
[0031] 保藏机构简称;CGMCC
[0032] 地址;北京市朝阳区北辰西路1号院3号 [003引保藏日期;2013年5月7日
[0034] 保藏中屯、登记入册编号;CGMCCNo.7566
【具体实施方式】
[0035] 下面结合【具体实施方式】对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐 明本发明,而不是为了限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为 常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
[0036] 下述实施例中的甜菜根腐病菌-立枯丝核菌巧hizoctoniasolani)(我国甜菜根 腐病病原立枯丝核菌的初步研究,中国植物病理学会2011年学术年会论文集)由中国农业 大学植物病理学系吴学宏教授实验室提供,公众可从中国农业大学获得,该生物材料只为 重复本发明的相关实验所用,不可作为其它用途使用。
[0037] 下述实施例中的苏云金芽抱杆菌炬acillus thuringiensis)菌株LHTXYB(简称 LHTXYB)(杜娟.甜菜根腐病生防细菌的筛选及作用机制初探.中国农业大学硕±学位论 文.2013年6月)公众可从中国农业大学获得,该生物材料只为重复本发明的相关实验所 用,不可作为其它用途使用。
[003引下述实施例中的培养基如下:
[0039]LB液体培养基;lOgTryptone(Oxoid公司产品),lOgNaCl,5g化ast Extract(Oxoid公司产品),用水定容至IL,pH7. 2~7. 4,高压蒸气灭菌20min。
[0040] LB固体培养基海升LB液体培养基中加入15g琼脂粉,高压蒸气灭菌20min。
[0041] 牛肉膏固体培养基(NA);大豆蛋白腺7g,化Cl5g,牛肉膏3g,琼脂20g,用水定容 至1L,pH7. 2~7. 4,高压蒸气灭菌20min。
[004引牛肉膏液体培养基;大豆蛋白腺7g,化C1 5g,牛肉膏3g,用水定容至lL,pH7. 2~ 7. 4,高压蒸气灭菌20min。
[00创 PDA培养基:上豆200g,葡萄糖20g,1L&
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