一株蜡样芽孢杆菌及其作为农业生物制剂的用图

文档序号:9270955阅读:951来源:国知局
一株蜡样芽孢杆菌及其作为农业生物制剂的用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及一株蜡样芽抱杆菌及其在农业领域的用途。
【背景技术】
[0002] 农药在农业生产中的重要地位不言而喻,据联合国粮农组织统计,如不使用农药 全世界每年平均因病、虫、草害造成的损失约占农作物产量的37%,年损失高达1260亿美 元。有机磯农药作为一类高效、广谱的杀虫剂,是中国用量最大的农药种类。据中国农药工 业协会资料显示,2012年我国农药总产量为112万吨,比2011年上涨11%,其中有机磯占 到总量70%,原药产量达万吨W上的品种12个,杀虫剂11个、除草剂1个。
[0003] 尽管从2002年起农业部公告第199号就明确规定,甲胺磯、甲基对硫磯、甲拌磯 等19种高毒农药不得用于蔬菜、果树、茶叶、中草药材上。然而,由于监控乏力,含有上述高 毒性农药的制品仍在市场上自由流通,种植者仍在大量使用,致使目前有机磯农药的污染 成为了农业生产环境中最严重的污染源之一。研究表明,有机磯农药具有诱变性和致崎胎 性,哺乳动物的神经和免疫系统疾病大多与有机磯农药相关,该些疾病包括疯牛病、海湾战 争综合症、帕金森综合症等。有机磯农药在±壤中发生积累迁移,导致农产品中农药残留超 标,引发食品安全问题,也制约了我国农产品的出口。
[0004] 对于有机磯农药残留目前采用微生物法、光化学法和物理化学法。与微生物法相 比,光化学法和物理化学法存在降解效率低下,降解不彻底,分解产物仍污染环境等问题, 因此,目前采用微生物法降解残留的有机磯农药是最佳选择。但用于降解有机磯农药的微 生物工程菌株也存在功能单一的问题;如果喷洒或施加其它功能制剂,容易发生括抗作用, 导致微生物的有机磯降解率降低;若不如此又无法全面满足农业生产的需要。

【发明内容】

[0005] 本发明是为了解决目前降解有机磯农药的微生物工程菌株功能单一的问题,而提 供的一株蜡样芽抱杆菌及其作为农业生物制剂的用途。
[0006]本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05,保藏在中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中屯、,保藏号为CGMCCNo. 10605。
[0007]蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05作为农业生物制剂使用。
[000引本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05为杆状、末端方,成短或长链,长 为(1. 0~1. 2)X(3. 0~5. 0)微米;单个或链状排列,无英膜,有芽抱,芽抱圆形或柱形,中 生或近中生(如图1所示)。本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05在牛肉膏蛋 白腺培养基上表面粗趟,不透明,微闪光,蔓延,为污白色。本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05为革兰氏阳性菌,VP反应为阳性、MR反应为阳性、嘲噪试验为阳性、蛋白 酶为阳性、明胶液化为阳性;能利用鼠李糖、葡萄糖、麦芽糖、果糖和阿拉伯糖作为碳源,对 D-甘露糖、甘露醇、木糖、山梨糖、乳糖利用效果不好,不能利用巧樣酸钢;能利用硝酸钟、 蛋白腺、牛肉膏和酵母粉作为氮源,不能利用硫酸锭和脈。
[0009] 本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05具有营养促生作用,能作为肥料 生产菌,可将难溶态磯酸盐转化为作物可吸收利用的速效磯。
[0010] 本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus) WSW-P05能够降解氧乐果、乐果、辛硫磯、 敌百虫等有机磯农药。
[0011] 本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus) WSW-P05生长速度快,活化后培养化即 进入生长的对数期,培养16h即达到稳定期。
[001引本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus) WSW-P05具有耐酸性,在抑值为3. 5~ 8. 5的范围内均能正常生长繁殖。
[001引本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05对尖抱镶刀菌(F'usarium (Mysporum)、拟枝抱镶刀菌(F'usarium sporotrichiodes)、基生根串珠霉(Thielaviopsis basicola),灰葡萄抱菌属炬otiytis cinerea)、椿抱菌属(Coiynespora)和炭痘菌属 (Colletotrichum)均表现出强抑制作用。
[0014] W本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05作为农业生物制剂,不仅能促 进农作物生长,提高作物产量;降解作物及±壤中的有机磯农药;具有耐酸性;还能够抑制 多种病原菌,兼具多种功能。
[0015] 本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05为蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus),属于芽胞杆菌属炬acillus);保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中屯、,保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为2015年3月11日,保 藏号为CGMCCNo.10605。
【附图说明】
[0016] 图1是本发明蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05的2000倍显微镜观察图。
[0017] 图2是蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05在实施例5培养条件下的生长 曲线图。
【具体实施方式】
[0018] 本发明技术方案不局限于W下所列举【具体实施方式】,还包括各【具体实施方式】间的 任意组合。
【具体实施方式】 [0019] 一;本实施方式蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05,保藏在 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、,保藏号为CGMCC No. 10605。
[0020] 本实施方式蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05采用微生物平板稀释法、溶 磯透明圈定性筛选方法分离自黑龙江黑河五大连池地域的大豆根际±壤。
[0021] 本实施方式蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05按W下步骤筛选获得:
[0022] 将黑龙江黑河五大连池地域采集的大豆根际±壤风干、研碎、过筛,取其中10.Og 过筛±壤放于带有玻璃珠的lOOmL无菌水中制成样品菌悬液,在恒温振荡器上W18化/min 充分震荡30min,W此菌悬液为母液;从该母液中取5mL加入到45mL的无菌水S角瓶中稀 释成10倍,再W同样的方法进行10倍的梯度稀释,直至稀释1000倍为止;取其中稀释10 倍、100倍和1000倍的菌悬液各0.ImL接种于葡萄糖-天口冬酷胺培养基(磯细菌分离培 养基)在30°C恒温培养,观察颜色变化及透明圈大小,进行初筛获得单菌落,然后接种于 含有氧乐果的无机盐培养基中,选择具有降解功能的菌株,从而得蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05。其中,无机盐培养基由 0. 2g化C1、0. 5gM拆〇4、0. 5g馬5〇4、0. 2gCaC〇3、 0. OOlgFeS〇4和 1000ml的H2O组成。
[002引蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05采用肉汤-蛋白腺培养基斜面培养, 采用糖蜜-玉米浆培养基进行发酵培养(繁殖)。肉汤-蛋白腺培养基由3.Og的牛肉膏、 1. Og的蛋白腺、0. 5g的化C1、和100ml的&0组成;液体摇瓶培养采用糖蜜-玉米浆培养基 配方即1.0~1.5g糖蜜、0. 3~0. 5g玉米浆、0. 01旨(畑4)3?04和100ml的H20组成。
[0024] 本实施方式蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05通过16SrDNA序列比对 分析及参照《伯杰细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》鉴定认定为蜡样芽抱杆菌 (Bacilluscereus)。
【具体实施方式】 [0025] 二;本实施方式蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05作为农 业生物制剂使用。
[0026] 实施例1
[0027] 分别W卵磯脂作为有机磯源,W化3(P04)2为无机磯源,进行菌株解磯性能的测定 (测定方法参见农业行业标准NY412-2000)。
[0028] 本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05W0.5%的接种量分别接种于 有机磯液体培养基和无机磯液体培养基中,在温度为30°C、转速为18化/min的条件下振荡 培养72h;取振荡培养液10ml加入Ig无磯活性炭脱色,然后120(K)r/min、低温、离屯、20min, 取5ml上清液,采用钢铺轨比色法,Lambda20分光光度计680nm进行速效磯含量的测定。
[0029] 测定结果为无机磯液体培养液中速效磯含量为0.873%;有机磯液体培养液中速 效磯含量为1.59%。实验结果说明本发明蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus)WSW-P05具有 降解有机磯及降解无机难溶性磯为植物可吸收利用速效磯的功能,可为农作物提供磯素营 养,有利于农作物对磯的吸收利用。
[0030] 实施例2
[0031] 在实验室条件下,选择健康的种子表面消毒后,W蜡样芽抱杆菌炬acillus cereus)WSW-P05的菌悬液稀释液(稀释液中WSW-P05的浓度是活菌数每ml在5X1〇7~ 8X107cfu)浸种。每个处理3次重复,大豆每30粒种子用4. 5ml菌液浸种,水稻每50粒种 子用1. 0ml菌液浸种,玉米每20粒种子用3. 5ml菌液,浸种时间都为4~化;浸种后用清 水反复冲洗种子3次,温箱中26°C-28°C放置催芽,测定种子的发芽数、根长,求平均值。并 W清水浸种4她处理为对照(CK),测定种子的发芽率与根长。发芽率检测结果如表1所示, 根长检测结果如表2所示。
[00对表1
[0033]
[0034]表2
[0035]
[0036] 试验结果表明:同清水浸种(CK)相比,经过蜡样芽抱杆菌炬acilluscereus) WSW-P05的菌液浸种玉米发芽率提高8. 3%,大豆发芽率提高8. 9 %,水稻发芽率提高 12. 5% ;同时经蜡样芽抱杆菌炬acilluscer
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1