用于一次性袋子的壁的包含接触层的膜的制作方法
【专利说明】用于一次性袋子的壁的包含接触层的膜 发明领域
[OOOU 本发明设及用于一次性（single-use)袋子的壁的膜，所述一次性袋子可用于制 备、储存或输送细胞介质或细胞培养物，W及生产该膜的方法。
[0002] 本发明特别设及包含接触层的膜，所述接触层适于与生物制药产品接触而不使所 述生物制药产品降解。优选，本发明膜为单层膜。
[0003] 本发明还设及由该多层膜生产的一次性袋子及其生产方法。
[0004] 宜量
[0005] 一次性袋子广泛用于细胞培养物的领域，例如用于一次性生物反应器或者用于储 存或输送细胞流体，例如细胞介质或细胞培养物。
[0006] 该类袋子可包含彼此密封的两个大的壁。当膨胀时，它们具有有限的容积并保持 为较薄的，该证明了它们通常称为2D袋值为维数）该一事实。还已知包含2个末端壁和 一个侧壁的3D袋，所述壁可W为扁平折叠或者未折叠地展开着，彼此密封，其中容积能够 达到3, 000升，甚至更多。该类3D袋描述于文件W000/04131中并W商标FLEXEL? 3D由Sartorius公司出售。
[0007] 一次性袋子的壁通常包含多层膜，所述多层膜包含与填充袋子的介质接触的接触 层、屏障层和与袋的外部环境接触的外层，=个层借助粘结层相互连接。
[000引如果将袋子用生物制药产品填充，则接触层应由可与该生物制药产品接触而不导 致膜和生物制药产品降解的材料制成。此外，它必须本身可密封。为此，材料通常选自聚締 姪，例如聚己締。
[0009] 屏障层提供气体如氧气、二氧化碳通过的屏障，且通常由己締醇巧V0H)制成。
[0010] 外层贡献于袋壁的机械强度。为此，它必须是足够提性的W经得起高机械应力，但 不应是太过可拉伸的，W防止在将它用产品填充时袋子变形。
[0011] 在生物反应器领域中，各种系统的主要区别是它们的揽拌模式，其可设及摆动运 动、轨道运动或轴向运动。因此，机械应力从一个系统至另一个系统明显变化。在液体输送 领域中，机械应力也可能是非常高的。在两个领域中，不能经得起该些机械应力的膜可导致 产品泄漏到袋子的外部。
[0012] 因此，需要能够经得起各种机械应力W便可用于宽范围的应用中的膜，例如用于 生物反应器中而不管揽拌模式，用于通过液体/液体或固体/液体揽拌而制备溶液，用于在 2D或3D袋中储存或输送小或大容积的流体。
[0013] 此外，在生物制药领域中，在使用W前将一次性袋子灭菌。灭菌通常通过丫福射 或者通过氧化己締处理而进行。因此，用于组成袋子的各个膜中使用的材料应当能够经得 起丫福射或氧化己締处理而不使它们的物理性能劣化。
[0014] 在其接触膜由聚己締制成的袋子的情况下，本专利申请的申请人发现当使用丫 福射将袋子灭菌时，可能减慢在该袋子中制备的细胞培养物的细胞生长，特别是由于细胞 培养开始时发生的停滞阶段。
[0015] 在广泛的试验W后，本申请的申请人进一步发现该停滞阶段部分是由于接触膜释 放到培养基中的化合物，所述化合物由所述接触膜的抗氧化剂在袋子的丫福射期间降解 而产生。
[0016] 因此，还需要对进一步通过丫福射灭菌的培养基的细胞生长不具有或者具有有 限影响的膜。特别地，需要在进一步丫福射下不释放显著量的降解化合物的膜，所述降解 化合物能够干扰细胞生长。
[0017] 发巧概巧
[001引本发明通过提供用于一次性袋子的膜而满足所有该些需要，所述膜显示出显著的 机械性能，由此容许宽范围的应用，此外，其对进一步通过丫福射灭菌的细胞生长不具有 或者具有有限的影响，由此使得它特别适于制备、储存或输送细胞介质。
[0019] 本发明的一个目的为用于生产袋子的膜，所述膜包含接触层，所述接触层包含单 独（A)具有0.870g/cm3至0.910g/cm3的密度的己締和a-締姪的共聚物，或者与炬）具有 0. 910g/cm3至0. 940g/cm3的密度的聚締姪的混合物，所述接触层包含小于0. 10重量％，优 选小于0. 07重量％添加剂，所述添加剂能够进一步在25kGy-50kGy的丫福射下释放可减 慢或延缓细胞生长的降解化合物。
[0020] 在一个实施方案中，进一步在丫福射下能够释放可减慢或延缓细胞生长的降解 化合物的添加剂为抗氧化剂。
[0021] 在一个实施方案中，所述抗氧化剂为亚磯酸醋抗氧化剂。
[0022] 在一个实施方案中，所述抗氧化剂为亚磯酸S (2, 4-二叔了苯基）醋。
[0023] 在一个实施方案中，共聚物（A)为具有4-8个碳原子的塑性体聚締姪，特别是由使 用金属茂催化剂的方法制备的己締和辛-1-締的线性低密度共聚物。
[0024] 在一个实施方案中，聚締姪炬）为己締的均聚物，特别是己締的低密度聚合物。 [002引在一个实施方案中，接触层包含质量比炬)/(A)小于或等于95/5,优选 5/95-95/5,更优选0.2-5,甚至更优选0.2-2的（A)和炬）的混合物。
[0026] 在一个实施方案中，本发明膜为单层。
[0027] 在一个实施方案中，本发明膜为多层膜，其除接触层外，还包含一个或几个层，特 别是能够提供气体如氧气或二氧化碳通过屏障的核屯、层，外层，其中接触层和核屯、层与第 一粘结层构成整体，且外层和核屯、层与第二粘结层构成整体。
[002引本发明的另一目的是生产本发明膜的方法，所述方法包括将接触层挤出。
[0029] 本发明的另一目的是生产本发明多层膜的方法，所述方法包括将接触层、第一粘 结层、核屯、层、第二粘结层和外层流延共挤出。
[0030] 本发明的另一目的是其壁包含本发明膜的一次性袋子。
[0031] 本发明的另一目的是包含本发明一次性袋子的生物反应器。
[00扣]发巧详巧
[0033] 除非另外提到，本申请中提及的聚合物的密度如根据标准试验方法ASTMD792-08 测量。
[0034] 根据本发明，表述"与…构成整体"意指两个层直接或间接地，即借助一个或几个 中间层结合在一起。因此，如果适用的话，本发明膜可进一步包含在如上文所定义的膜的任 何两个层之间的一个或几个中间层。该类中间层可包含选自W下聚合物中的一种的聚合物 或者其混合物：
[003引-半结晶热塑性聚締姪，例如聚己締牌）、聚丙締肿）、聚甲基戊締（PMP)或聚了 締-l(PB-l);
[0036] -弹性体聚締姪，例如聚异了締（PIB)、己締-丙締巧PR或EPM)或者己締-丙 締-二締单体脚DM);
[0037] -聚异了締（PIB);
[003引-包含己締作为共聚单体的聚合物，例如；
[0039] -己締-己酸己締醋巧VA);
[0040] -己締共聚物-丙締酸醋，例如己締-丙締酸甲醋（EMA)、己締-丙締酸己醋 勉A);
[0041] -己締-丙締酸醋-马来酸酢巧EAMA);或 [00创-己締-聚己締醇（EVOH)。
[0043] 根据本发明，表述"包含X的层"意指所述层包含任何量的X或者基本由X组成。
[0044]接M房
[0045] 根据本发明，接触层包含单独（A)具有0. 870g/cm3至0. 910g/cm3的密度的己締和 a-締姪共聚物，或者与做具有0. 910g/cm3至0. 940g/cm3的密度的聚締姪的混合物。
[0046] 优选，共聚物（A)具有0. 890g/cm3至0. 905g/cm3的密度，优选0. 895g/cm3至 0. 905g/cm3的密度。
[0047] 优选，聚締姪炬）具有0. 915g/cm3至0. 935g/cm3的密度，优选0. 920g/cm3至 0. 930g/cm3的密度。
[0048] 如先前所提到的，接触层应由可与生物制药产品接触而不导致膜和生物制药产品 降解的材料制成。
[0049] 此外，它本身必须是可密封的。为此，密度为0. 870g/cm3至0. 910g/cm3的己締和 a-締姪的共聚物（A)可选自聚締姪塑性体。该些树脂通过单点或Ziegler-natta催化方法 制备。它们可特别选自己締与一种或多种具有至少3个碳原子，优选4个碳原子至8个碳原 子的a-締姪，例如了 -1-締、己-1-締或辛-1-締的共聚物，更特别地选自己締和辛締、己 締和己締、己締和了締或己締和丙締的共聚物。己締和a-締姪的共聚物（