二苯基咪唑类抗癌药物的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药化学领域，具体涉及二苯基咪唑类抗癌药物4-(3, 5-二甲氧苯 基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸盐的制备方法。
【背景技术】
[0002] 4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯二钠 （Cl 18P)是 一个已知的化合物，具有如下结构：
[0003]
[0004] 该化合物在CN201110422678. 5中已公开，该篇文献以其全部内容引入本文作为 参考。CN201110422678. 5报道了 4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑 磷酸酯二钠具有微管蛋白聚合抑制活性。4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯 基）咪唑磷酸酯二钠为康普瑞汀（Combretastatin A4)衍生物，作为肿瘤血管破坏剂，特异 性地作用于肿瘤新生血管，对肿瘤血管的选择性强，对其他组织器官的影响很小，可以避免 传统细胞毒性药物的一些严重不良反应。
[0005] 关于4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯二钠的制备 方法在CN201110422678. 5中已经公开，不过该方法制备的C118P收率和纯度均较低。
[0006] 因此，还需要开发新的4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑 磷酸酯盐的制备方法，从而在保证原料及试剂易得，价格较低，方法简单的前提下，又能获 得较高的成品收率和纯度，满足工业规模生产。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷 酸酯盐的制备方法。本发明的制备方法包括以下步骤：
[0008] 1)在-30°C至20°C的温度下，无水条件下，在四氢呋喃（THF)和N，N-二异丙基乙 胺（DIEA)存在下，使4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑与磷酰化剂 反应；
[0009] 2)使步骤1)获得的反应物与成盐用碱试剂反应。
[0010] 本发明的发明人发现，在低温、无水条件下，使用四氢呋喃和N，N-二异丙基乙胺 作为反应溶剂和酰化用碱用于制备4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪 唑磷酸酯盐，能够使得反应速度快，反应完全，反应后产物分解少，获得优异的收率和产品 纯度。
[0011] 优选地，在本发明的制备方法中，所述的磷酰化剂为三氯氧磷或三溴氧磷。
[0012] 优选地，在本发明的制备方法中，所述的成盐用碱试剂选自氢氧化钠、甲醇钠、碳 酸氢钠、氨水、甲醇钾、氢氧化钾和叔丁醇钾，更优选地，所述的成盐用碱试剂选自氢氧化钠 和氨水。
[0013] 优选地，在本发明的制备方法中，所述4- (3, 5-二甲氧苯基）-5- (3-羟基-4-甲氧 基苯基）咪唑磷酸酯盐包括其碱金属盐、碱土金属盐或氨丁三醇盐。
[0014] 优选地，根据本发明的制备方法，在步骤1)中，反应时间通过经HPLC监测 4-(3, 5-二甲氧苯基）-5_ (3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的残留量少于约5% (w/w)来确定。 更优选地，根据本发明的制备方法，在步骤1)中，反应时间通过经HPLC监测4- (3, 5-二甲 氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的残留量少于约l%(w/w)来确定。
[0015] 优选地，根据本发明的制备方法，在步骤1)中，磷酰化剂和4-(3, 5-二甲氧苯 基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的摩尔比为大于1.4:1，例如约5~1.4:1，更优选 地，磷酰化剂和4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的摩尔比为2~ 1. 4:1，最优选地，磷酰化剂和4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的 摩尔比为1. 6~1. 4:1。
[0016] 优选地，根据本发明的制备方法，在步骤1)中，四氢呋喃和4_(3, 5-二甲氧苯 基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的体积（ml):质量（g)比为约5~1:1，更优选地， 四氢呋喃和4-(3,5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的体积（ml):质量 (g)比为约3~1:1，最优选地，磷酰化剂和4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基 苯基）咪唑的体积（ml):质量（g)比为约1. 5~1:1。
[0017] 优选地，根据本发明的制备方法，在步骤1)中，N，N-二异丙基乙胺和磷酰化剂的 摩尔比为约3~1:1，更优选地，N，N-二异丙基乙胺和磷酰化剂的摩尔比为约2~1:1，最 优选地，N，N-二异丙基乙胺和磷酰化剂的摩尔比为约1: 1。
[0018] 优选地，根据本发明的制备方法，进一步包括将4_(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟 基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯盐重结晶的步骤。进一步优选地，根据本发明的制备方法， 所述重结晶在选自水、四氢呋喃、甲醇、丙酮、异丙醇、乙腈中的一种或多种溶剂中进行。
[0019] 在一个优选的实施方案中，根据本发明的制备方法，所述4-(3,5-二甲氧苯 基）-5- (3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯盐为4- (3, 5-二甲氧苯基）-5- (3-羟基-4-甲 氧基苯基）咪唑磷酸酯的钠盐、单氨丁三醇盐、钾盐、镁盐、钙盐或氨盐。优选地，根据本发 明的制备方法，所述4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯盐为 4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯二钠盐。
[0020] 本发明的发明人发现，在制备4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基） 咪唑磷酸酯盐中，先将C118和三氯氧磷悬浮于四氢呋喃中，然后滴加 N，N-二异丙基乙胺， 反应更完全。在一个优选的实施方案中，本发明的制备方法包括以下步骤：
[0021] a)将4-(3,5_二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑、四氢呋喃、三氯氧 磷加入反应器中，保持温度在约-20°C至KTC之间，优选在-KTC至5°C之间；
[0022] b)在约-KTC至15°C，优选-5至KTC的温度下，向步骤a)的反应器中加入 N，N-二异丙基乙胺，反应完全后，用水洗涤，过滤，获得滤饼；
[0023] c)将取出的步骤b)的滤饼转移入纯水中，加入成盐用碱试剂，过滤，得滤液；
[0024] d)向步骤c)的滤液中加入有机溶剂结晶，然后析晶并干燥。
[0025] 优选地，根据本发明的上述制备方法，三氯氧磷、N，N-二异丙基乙胺和C118的摩 尔比为约1. 4~2:1. 4~2:1。
[0026] 优选地，根据本发明的上述制备方法，在步骤b)中缓慢加入N，N-二异丙基乙 胺，并控制反应温度在约-5 °C至10 °C，反应时间通过经HPLC监测4-(3, 5-二甲氧苯 基）-5- (3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑的残留量少于约5%，优选小于约1%确定，反应完全 后，通过将反应液倒入碎冰中并同时搅拌进行充分洗涤。
[0027] 优选地，根据本发明的上述制备方法，在步骤d)中缓慢加入成盐用碱试剂并搅 拌，调节PH9-10,然后加入异丙醇/丙酮溶液进行结晶。
[0028] 优选地，根据本发明的上述制备方法，进一步包括将4_(3, 5-二甲氧苯 基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯盐重结晶的步骤。进一步优选地，根据本发 明的上述制备方法，所述重结晶在选自丙酮、异丙醇、四氢呋喃、水中的一种或多种溶剂中 进行。更优选地，所述重结晶在选自丙酮、异丙醇、异丙醇/丙酮、水/丙酮的溶剂中进行。
[0029] 本发明的发明人发现，根据本发明的制备4_(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟 基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯盐的方法，通过在低温、无水条件下，在四氢呋喃和N，N-二 异丙基乙胺存在下，使4-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑与磷酰化 剂如三氯氧磷反应，然后使获得的反应物与适宜的成盐用碱试剂反应，能够获得高收率和 高纯度的产物，同时该方法较简便，原料和试剂试剂容易获得，价格较低。
[0030] 除非另有说明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技 术人员通常理解的相同的含义。
[0031] 如本文所用，所述4_(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸 酯盐包括它们的晶型、水合物、溶剂合物和前药。
[0032] 根据本发明的方法制备的4-(3, 5-二甲氧苯基）-5_ (3-羟基-4-甲氧基苯基）咪 唑磷酸酯盐具有较高的收率和纯度，能够满足工业规模的生产和应用。
【具体实施方式】
[0033] 下面结合实施例对本发明作进一步详细阐述，但本发明不限于这些实施例。 4-(3,5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑（C118)如CN201110422678.5中 所公开的方法制备，其他原料和试剂均商购获得。
[0034] 实施例14-(3, 5-二甲氧苯基）-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基）咪唑磷酸酯二钠盐 制备中所用试剂的选择
[0035] I. 1反应溶剂的研究
[0036] 测试了 THF、丙酮、二氯甲烷和2-甲基四氢呋喃作为溶剂对反应的影响。上述溶 剂各lml，C1185g，P0Cl39. 4g，三乙胺6. 2g，反应温度控制在(TC左右，TLC进行检测，检测条 件：甲醇：乙酸乙酯=1:10, CllSRf值0.5,后处理方法为使用碎冰进行淬灭。结果显示在 表1中。
[0037] 表1 :反应溶剂的选择
[0038]
[0039] 实验结果显示，二氯甲烷和2-甲基四氢呋喃疏水溶剂在后处理中，淬灭过程放热 剧烈，导致部分产物分解，重新生成原料Cl 18,使得反应不完全，而水溶性溶剂THF反应速 率远优于丙酮，因此选用THF做为反应溶剂。
[0040] 之后对THF的用量进行了考察，使用C1185g，P0C134. 7g，三乙胺3. lg，温度约(TC， 反应时间2h，TLC进行检测，检测条件：甲醇：乙酸乙酯=l:10，C118Rf值0.5。结果显示在 表2中。
[0041]表 2:THF 用量
[0042]
[0043] V*表示THF与Cl 18的体积（ml):质量（g)比，即Ig Cl 18所使用的THF的ml数。
[0044] 实验表明，随着THF用量的增加反而降低了反应速率，且THF使用量越少对后续操 作越有利，因此选择THF用量为1~5V