一种利用南极磷虾提取生物碱的废液制备dbp的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种利用南极磷虾提取生物碱的废液制备DBP的方法，属化学、医药和食品领域。
技术背景
[0002]邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl Phthalate，DBP)是邻苯二甲酸酯类中的一种，主要用作硝化纤维、醋酸纤维、聚氟乙烯、聚苯乙烯等的增塑剂。可赋予聚氯乙烯、聚苯乙烯制品良好的柔软性。由于其相对价廉且加工性能良好，在国内使用非常广泛。该品是硝酸纤维素的优良增塑剂，凝胶能力强。用于硝酸纤维素涂料，有很好的软化作用。稳定性、耐挠曲性、粘着性和防水性皆优。此外，该品还可用作聚乙酸乙酯、醇酸树脂、乙基纤维素以及氯丁橡胶、天然橡胶的增塑剂、还可用于制造油漆、粘接剂、人造革、印刷油墨、安全玻璃、燃料、杀虫剂、香料溶剂、植物润滑剂等。
[0003]在塑胶制品包装中人们常会接触到邻苯二甲酸二丁酯，在生活中有很多食物在加工、加热、包装、盛装的过程里可能会造成邻苯二甲酸二丁酯的溶出且渗入食物中。
[0004]塑胶玩具、覆盖食物微波加热的保鲜膜、盛装食物的塑胶容器、吃食物或医疗用的塑胶手套或输血袋等，都含有邻苯二甲酸二丁酯。
[0005]含有邻苯二甲酸二丁酯的软塑料玩具及儿童用品和孩子们有长时间接触就会导致邻苯二甲酸二丁酯的溶出量超过安全水平，会危害儿童的肝脏和肾脏，也可引起儿童性早熟。
[0006]邻苯二甲酸二丁酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用，可干扰内分泌，使男子精液量和精子数量减少，精子运动能力低下，精子形态异常，严重的会导致睾丸癌，是造成男子生殖问题的“罪魁祸首”。
[0007]在化妆品中，指甲油的邻苯二甲酸二丁酯含量最高，很多化妆品的芳香成分也含有该物质。化妆品中的这种物质会通过女性的呼吸系统和皮肤进入体内，如果过多使用，会增加女性患乳腺癌的几率，还会危害到她们未来生育的男婴的生殖系统。
[0008]南极磷虾是一种生活在南极洲水域的甲壳动物，以群集方式生活，有时密度高达I万?3万只/M3，它们可能是地球上最成功的动物物种，据统计大约有5?50亿吨(因统计方法不一样有较大差异)。
[0009]目前南极磷虾渔业每年约10万吨，其中80%由日本捕获，由于南大洋以磷虾为主食物的须鲸也被歼捕殆尽。有关科学家曾根据旺盛时期鲸类对磷虾类的摄食量估计大约每年有1.5亿吨由于鲸类资源的衰退而剩余的磷虾可供捕获。世界上每年全部的渔业产量为0.99亿吨，这标志着南极磷虾有较大的可利用空间。我国正在试探捕南极磷虾以完善南极磷虾的捕捞和相关海上技术。南极磷虾的大量捕捞标志着深加工技术的开始。在日本南极磷虾大多作为料理，而在其他国家则主要作为渔业的饲料和鱼的铒料。南极磷虾高附加值的研究是其深加工的研究核心。
[0010]南极磷虾含无机氟，氟有毒，不能直接食用。因此，人们将捕捞后的南极磷虾加工成油脂(如南极磷虾虾油)或将其体内对人类有益的活性成分提取出来，进行精加工利用。本发明的申请人长期从事南极磷虾活性物质的提取，在研究过程中发现，南极磷虾生物碱提取后的残余废液还有多种有效成分。如果能对这些成分进行充分利用，不仅有利于环保，而且还可延长产品链，提高产品的附加值。
【发明内容】
[0011]本发明的目的就是为了提供一种利用南极磷虾提取生物碱的废液制备DBP的方法。
[0012]为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
[0013]—种利用南极磷虾提取生物碱的废液制备DBP的方法，步骤如下:
[0014](I)向南极磷虾提取生物碱的废液中加入乙酸乙酯，混匀，静置分层，得上层乙酸乙酯层和下层水溶液，乙酸乙酯每次的加入量与废液的体积比为(1-1.5):4 ；
[0015](2)向下层水溶液中加入正丁醇萃取，混匀，静置分层，分离出正丁醇层，浓缩，得膏状物，正丁醇每次的加入量与下层水溶液的体积比为(1-2):4;
[0016](3)向活化后的硅胶中加入石油醚-乙酸乙酯混合液，拌匀，装柱，将步骤(2)的膏状物作为样品上样，硅胶用量为上样的样品质量的30-35倍，分别用体积比为3:1-1:3的石油醚-乙酸乙酯混合液作为洗脱液进行洗脱，流速l_2ml/min，收集石油醚-乙酸乙酯=1:3的洗脱液旋蒸，得含邻苯二甲酸二丁酯的膏状物；
[0017]具体的，步骤⑴中，所述南极磷虾提取生物碱的废液，是指南极磷虾由含5% (体积分数)乙酸的乙醇溶液提取，提取液浓缩后得浸膏，浸膏中加入H2SOjK溶液，再加入石油醚进行萃取，静置分层后的下层水溶液经加氨水和氯仿再分层后的上层水溶液即为提取生物碱后的废液。
[0018]优选的，步骤(I)中，加入乙酸乙酯提取的次数为2-4次，乙酸乙酯每次的加入量与废液的体积比为1:4。乙酸乙酯的提取次数选为2-4次，不仅有效分离出南极磷虾提取生物碱的废液中的邻苯二甲酸二丁酯，还能尽量减少提取次数的增加所带来的能源浪费。
[0019]优选的，步骤(2)中，加入正丁醇萃取的次数为4-6次，正丁醇每次的加入量与下层水溶液的体积比为1:4。
[0020]优选的，步骤(3)中，硅胶的活化采用的方法是将硅胶在110°C条件下活化12h。
[0021]优选的，步骤(3)中，所述硅胶的目数为200-300目。本发明选择的硅胶目数为200-300目，分离效果较好，而且洗脱速度适中，二者达到了有效的平衡。
[0022]优选的，步骤(3)中，所述石油醚-乙酸乙酯混合液中，石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:1。
[0023]优选的，步骤(3)中，所述石油醚-乙酸乙酯混合液与活化后的硅胶加入量的比为lg:(l-2)ml。本发明采用湿法装柱，先将活化后的硅胶用适当溶剂(石油醚-乙酸乙酯混合溶液)拌匀后，再填入柱子；硅胶与溶剂的加入量直接影响湿法装柱的效果，本发明经条件优化后，石油醚-乙酸乙酯混合液与活化后的硅胶加入量的比为Ig: (l_2)ml，该条件下填充的柱子比较结实，而且没有气泡。
[0024]优选的，步骤(3)中，洗脱采用的洗脱液分别为:
[0025]体积比为3:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶液，洗脱液的用量与上样的样品质量的比为 0.5L:2g ；
[0026]体积比为1:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶液，洗脱液的用量与上样的样品质量的比为 0.5L:2g ；
[0027]体积比为1:3的石油醚-乙酸乙酯混合溶液，洗脱液的用量与上样的样品质量的比为 1.0L:2go
[0028]洗脱液和洗脱条件选择对于柱层析的分离效果来说是非常关键的，本发明采用石油醚-乙酸乙酯作为洗脱液，能够有效的将邻苯二甲酸二丁酯分离出来。
[0029](7)将步骤(6)得到的膏状物溶于乙腈，溶液用0.45μπι微孔滤膜过滤，在制备型HPLC上C18反向半制备柱(YMC-pack 0DS-A, 10 μm, 1mmX250mm)上分离，流动相为80%乙腈-水体系洗脱，流速为3.0ml/min，进样量为2ml/次，检测波长210nm，收集保留时向为4.145mm峰，该峰为邻苯二甲酸二丁酯(DBP)。收集液体用N2吹干。经分析型HPLC检测，DBP纯度为97%以上。经过以上过程，200g干南极鳞虾可分离DBP约5mg。
【附图说明】
[0030]图1为是实施例1纯化后产物的的高效液相色谱图。
[0031]本发明的有益效果: