卡他球菌提取物的制备方法及该方法所获的提取物及应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及制药领域，具体而言，涉及卡他球菌提取物的制备方法及该方法所获的提取物及应用。
【背景技术】
[0002]抗生素(antib1tics)是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。
[0003]抗生素的发现和应用为感染性疾病的医治开辟了新篇章，挽救了无数垂危的生命，功不可没。可是，随着抗生素的广泛使用，甚至是滥用，大大的促进了细菌的变异、其抗药性不断的增强，造成了大量耐药菌株的严重泛滥，而新抗生素的研制还远远跟不上耐药菌的变异速度。目前，世界上研制一个新抗生素需要十几年的时间，而滥用抗生素3-5年即可导致其失效。
[0004]例如，青霉素问世后，抗生素成了人类战胜病菌的神奇武器。然而，人们很快发现虽然新的抗生素层出不穷，但是，抗生素奈何不了的耐药菌也越来越多，耐药菌的传播令人担忧。2003年的一项关于幼儿园儿童口腔卫生情况的研究发现，儿童口腔细菌中约有15%是耐药菌，97%的儿童口腔中藏有耐4-6种抗生素的细菌，虽然这些儿童在此前3个月中都没有使用过抗生素。
[0005]从某种意义上说，现代医学正在为它的成功付出代价。抗生素的普遍使用有力的抑制了普通细菌，客观上减少了微生物世界的竞争，因而促进了耐药性细菌的增长抗生素的普遍使用有力的抑制了普通细菌，客观上减少了微生物世界的竞争，因而促进了耐药性细菌的增长。
[0006]细菌耐药基因的种类和数量增长速度之快，是无法用生物的随机突变来解释的。细菌不仅在同种内，而且在不同的物种之间交换基因，甚至能够从已经死亡的同类散落的DNA中获得基因。事实上，这些年来，每一种已知的致病菌都已或多或少的获得了耐药基因。研究人员对一株耐万古霉素肠球菌的分析表明，它的基因组中，超过四分之一的基因，包括所有耐抗生素基因，都是外来的。耐多种抗生素的鲍氏不动杆菌也是在与其他菌种交换基因中获得了大部分耐药基因。
[0007]研究人员正在梳理链霉菌之类土壤微生物的DNA，他们对近500个链霉菌品系的每个菌种都检测了对多种抗生素的耐药性。结果，平均每种链霉菌能够耐受七八种抗生素，有许多能够耐受十四五种。对于试验中用到的21种抗生素，包括泰利霉素和利奈唑胺这两种全新的合成抗生素，研究人员在链霉菌中都发现了耐药基因。研究发现，这些耐药基因与致病菌中耐药基因有着细微的差异。有证据表明，耐药基因在从土壤到危重病人的旅途中，经过了许多次转移。
[0008]世界卫生组织呼吁，为防止滥用抗生素而导致细菌产生抗药性，欧盟决定从2006年I月起，全面禁止将抗生素作为生长促进剂。鉴于此，出于从生物安全角度出发，开辟新的抗菌、消炎药物或者途径已迫在眉睫。
[0009]有鉴于此，特提出本发明。
【发明内容】
[0010]本发明的第一目的在于提供一种卡他球菌提取物的制备方法，所述的制备方法通过培养、热浸提取以及离心等操作实现了卡他球菌提取物的制备，该提取物对多种感染病毒或者感染菌具有抑制效果，可作为新型的抗菌、杀毒或者消炎药物的有效成分。
[0011]本发明的第二目的在于提供一种所述的制备方法制成的卡他球菌提取物，该卡他球菌提取物可长期保存，并通过皮内注射的方式实现给药，给药方便。
[0012]本发明的第三目的在于提供所述的卡他球菌提取物的用途，以充分实现该提取物的应用价值。
[0013]为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案:
[0014]本发明提供了一种卡他球菌提取物的制备方法，包括以下步骤:
[0015]I)、将纯培养的卡他球菌接种在培养基上，置于35?37°C环境内培养18?20小时；
[0016]其中，所述培养基中，包括牛肉、蛋白胨、氯化钠和蒸馏水；
[0017]2)、将菌苔用生理盐水洗下，并用生理盐水稀释成每毫升含菌体250?350亿的菌液；
[0018]3)、将所述菌液置于60?65°C的水环境内进行热浸30?40分钟，得到热浸液；
[0019]4)、将所述热浸液冷却至常温，并以2800?3200转/分的转速离心30?40分钟，剔除死菌体沉淀，吸出上清液；
[0020]5)、将所述上清液高压蒸汽灭菌后自然冷却至常温，即得卡他球菌提取物。
[0021]上述的方法中，将经过纯培养的卡他球菌于特定的培养基继续培养，培养后，旺盛菌苔利用生理盐水洗脱，并且稀释成每毫升含菌体250?350亿的菌液，于特定的温度下热浸特定的时间，热浸的过程中，菌体被灭活，而活性成分析出，所得热浸液经过离心剔除死菌体，所得上清经过灭菌、冷却后即为最终产物。该方法选择经过纯培养的卡他球菌，并且利用含有牛肉、蛋白胨、氯化钠的培养基，且在热浸提取的过程中具体温度限定为60?650C，时间限定为30?40分钟，该三个条件共奏，缺一不可；此外，在培养基培养的过程中，温度和时间也经过特定选择，以保证菌体大量繁殖，在离心的过程中，转速和时间也是特定的，以充分去除死菌体，且尽可能多地保留上清液。
[0022]因此，本发明提供的这种卡他球菌提取物的制备方法，对经过纯培养的卡他球菌，经过特定的培养，热浸以及离心分离的操作，才实现了具有药效的提取物的制备，该提取物还通过提高机体的非特异性免疫发挥医疗效果。
[0023]可选的，在步骤I)中，所述的培养基按照重量份数计，包括以下组份:
[0024]牛肉450?550份、蛋白胨8?12份、氯化钠8?12份和蒸馏水980?1100份。
[0025]具有上述配比的肉浸液培养基，其可以满足卡他球菌生长所需的大量的营养所需，为旺盛菌苔的生长提供了保障。
[0026]可选的，在步骤I)中，所述的培养基按照重量份数计，包括以下组份:
[0027]牛肉480?500份、蛋白胨9?11份、氯化钠9?11份和蒸馏水980?1000份。
[0028]可选的，所述培养基中，还包括琼脂I?2份。
[0029]为了后续洗菌苔方便，优选采用固体培养基培养卡他球菌，因此，在培养基的组份中还包括琼脂，冷却后的琼脂可以使得培养基各组份凝固，进而为倒平板培养卡他球菌提供了保障。
[0030]可选的，所述培养基的制备方法包括:
[0031]a)、将按照重量配比，将去掉脂肪、肌腱和筋膜后的牛肉切碎绞细，并加入蒸馏水，于I?4°C静置过夜；
[0032]b)、将静置后的蒸馏水和牛肉混合煎煮后压滤，得到第一煎煮液；
[0033]C)、将所述第一煎煮液继续煮沸，得到第二煎煮液，且所述第二煎煮液的质量为所述第一煎煮液质量的1/2?5/6 ;
[0034]d)、在所述第二煎煮液中加入既定重量的蛋白胨和氯化钠，并补加蒸馏水，再调节PH后过滤，并对所得滤液灭菌，得到培养基。
[0035]在该制备方法中，牛肉去脂肪、肌腱和筋膜后再切碎绞细，使其所含的营养充分释放，然后加入蒸馏水，并于I?4°C静置过夜，该过程为牛肉浸提过程，牛肉中的大量水溶性养分会溶于水中，而且该温度为I?4°C，一些对温度敏感的营养成分可以得到有效的保护。煎煮的过程为进一步提取牛肉所含养分的操作，而且通过两次煎煮提取，使得营养物质提取完全。最后经过补充蒸馏水之后，即可加入蛋白胨和氯化钠，灭菌后即得培养基。
[0036]具体的，在步骤a)中，所述静置的时间不少于36小时；在步骤b)中，煎煮的时间不少于20分钟。
[0037]静置时间不少于36小时，且在煎煮的过程中煎煮的时间至少为20分钟，这样肉浸液养分提取完全，利于卡他球菌的大量增殖和扩繁。
[0038]可选的，在步骤d)中，采用质量浓度为15%的氢氧化钠调节pH。
[0039]利用15%的氢氧化钠调节酸碱度，一方面利于操作，另一方面该浓度的氢氧化钠对卡他球菌及其代谢物基本没有抑制作用，进一步保证了卡他球菌的正常代谢水平。
[0040]所述的制备方法提取的卡他球菌提取物。
[0041]所述的卡他球菌提取物在制备治疗提高机