一株促进固态发酵糟醅产乙酸乙酯的酵母及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及白酒酵母技术领域，尤其涉及一株促进固态发酵糟醅高产乙酸乙酯的 特殊酵母及其应用。
【背景技术】
[0002] 中国浓香型白酒由为多菌种固态发酵，其风味取决于生产环境、曲药、窖泥内众多 微生物的代谢产物、高分子化合物的降解产物及它们之间相互反应产物的种类、含量及协 调的比例。在这些物质中，"四大酯"（乙酸乙酯、己酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯）被认为是 浓香型白酒的主体呈香物质，酵母作为浓香型白酒发酵的主要菌种之一，对上述主体呈香 物质的代谢有重要影响。与其他生态环境中分离到的酵母相比，分离自浓香型白酒大曲生 产过程中的酵母用于浓香型白酒酿造具有两个方面的优势，一是对现有浓香型白酒微生物 生态环境的影响较小，二是菌株已经在长期的制曲生产中得到驯化，因此，其生长适应能力 及应用效果可能更好。
【发明内容】
[0003] 本发明提供了一种白酒酵母及其制备方法和促进固态发酵糟醅高产乙酸乙酯的 用途。
[0004] 本发明采用如下技术方案：
[0005] 本发明的白酒酵母为SNYH2,分类命名为汉逊德巴利酵母Debaryomyces hansenii;保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No.10695。
[0006] 具体保藏信息如下：
[0007] 分类命名：汉逊德巴利酵母Debaryomyceshansenii;
[0008] 保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC);
[0009] 保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；
[0010] 保藏日期：2015年04月07日；
[0011] 保藏编号：CGMCCNo. 10695。
[0012] 所述的白酒酵母是从浓香型白酒大曲中分离到。
[0013] 本发明的酵母菌株可以促进固态发酵糟醅高产乙酸乙酯。
[0014] 本发明的酵母菌株在WL固体培养基（采用成都科龙试剂厂出产的生物级试 剂配置，配方为：酵母浸粉0.5%，胰蛋白胨0.5%，葡萄糖5%，琼脂2%，磷酸二氢钾 0. 055 %，氯化钾0. 0425 %，氯化钙0. 0125 %，氯化铁0. 00025 %，硫酸镁0. 0125%，硫酸锰 0? 00025%，溴甲酚绿 0? 0022%，琼脂 1. 7%，pH6. 5,121°C灭菌 20min)上 28°C，培养 48 小 时后，形成直径大小的扁平白色菌落，中心颜色略带灰绿色；菌落呈草帽状，表面 有放射状皱褶，湿润，易挑起，不能使WL培养基变黄。400倍显微镜下可见其细胞近圆形，出 芽生殖。其 26SrDNA序列与DebaryomyceshanseniistrainATCC60978(Genebank序列 号GQ458041. 1)相似性为99 %。
[0015] 本发明的积极效果如下：
[0016] 本发明的白酒酵母能够使浓香型白酒混菌发酵糟醅中的乙酸乙酯生成量提高1. 5 倍，同时不影响乙醇的生成，不增加杂醇油的生成。
[0017] 所述的白酒酵母的DNA序列如下：
[0018] GCTTAGTACGGCGAGTGAGCGGCAAAGCTCAAATTTGAAATCTGGCACCTTCGGTGTCCGAGTTGTAAT TTGAAGAAGGTAACTTTGGAGTTGGCTCTTGTCTATGTTCCTTGGAACAGGACGTCACAGAGGGTGAGAATCCCGTG CGATGAGATGCCCAATTCTATGTAAAGTGCTTTCGAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAATGCAGCTCTAAGTGGGTGGTA AATTCCATCTAAAGCTAAATATTGGCGAGAGACCGATAGCGAACAAGTACAGTGATGGAAAGATGAAAAGAACTTTG AAAAGAGAGTGAAAAAGTACGTGAAATTGTTGAAAGGGAAGGGCTTGAGATCAGACTTGGTATTTTGCGATCCTTTC CTTCTTGGTTGGGTTCCTCGCAGCTTACTGGGCCAGCATCGGTTTGGATGGTAGGATAATGACTAAGGAATGTGGCT CTACTTCGGTGGAGTGTTATAGCCTTGGTTGATACTGCCTGTCTAGACCGAGGACTGCGTCTTTTGACTAGGATGTT GGCATAATGATCTTAAGCCACCCGTCTT。
【附图说明】
[0019] 图1是本发明的白酒酵母在YPD固体培养基上的菌落形态。
【具体实施方式】
[0020] 下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。
[0021] 实施例1 :利用该酵母提高固态发酵糟醅乙酸乙酯含量
[0022] 将本发明的酵母菌株纯培养物在YPD固态培养基（配方为：葡萄糖2%，蛋白胨 2%，酵母浸粉1%，琼脂1. 5%，pH值自然，121°C灭菌20min，试剂为成都科龙试剂厂生产） 上划线活化（28°C) 36h后，挑取单菌落，接种至1LYH)液体培养基（配方为：葡萄糖2%，蛋 白胨2%，酵母浸粉1 %，pH值自然，121 °C灭菌20min，试剂为成都科龙试剂厂生产）中28°C 培养2天后，3000rpm离心5min去除上清液，添加等体积无菌水，重新悬浮，3000rpm离心 5min去除上清液，再次添加等体积无菌水，在向粮糟中加量水的同时加入到入窖粮糟中，混 匀，入窖发酵70d，糟醅中可检测到的乙酸乙酯含量为0. 82g/L，为对照的2. 5倍，同时不减 少糟醅中乙醇的生成（添加酵母发酵的糟醅乙醇含量为对照的103. 8% )，不增加不良副产 物如高级醇的含量，添加酵母发酵的糟醅高级醇含量为空白的95. 2 %。
[0023] 实施实例2 :利用该酵母提高麸曲酯化能力
[0024] SNYH2酵母菌株纯培养物在YPD固体培养基上划线活化（28°C) 36h后，挑取单菌 落，接种至ILYro液体培养基中28°C培养2天后，3000rpm离心5min去除上清液，添加等 体积无菌水，重新悬浮，3000rpm离心5min去除上清液，再次添加无菌水1L，在麸曲干燥过 程中喷洒到麸曲表面，40°C烘干，制成强化麸曲，按3%添加量加入黄水中发酵5天，其总酯 含量为6. 700g/L，比发酵前增加3. 851g/L，其中乙酸乙酯含量为1. 595g/L，比发酵前增加 0. 611g/L，未添加酵母的常规麸曲按相同接种量接种黄水后，其总酯含量仅增加0. 114g/L， 乙酸乙酯仅增加0. 269g/L。
[0025] 尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以 理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换 和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
[0026] 〈110>四川蜀南远航生物科技有限公司
[0027] 〈120> -株促进固态发酵糟醅产乙酸乙酯的酵母及其应用
[0028] <160>1
[0029] <210>1
[0030] <211>559
[0031] <212>DNA
[0032] <213>Debaryomyceshansenii
[0033] <220>
[0034] <221>gene
[0035] 〈222>
[0036] <400>1
[0037] GCTTAGTACGGCGAGTGAGCGGCAAAGCTCAAATTTGAAATCTGGCACCTTCGGTGTCCGAGTTGTAAT TTGAAGAAGGTAACTTTGGAGTTGGCTCTTGTCTATGTTCCTTGGAACAGGACGTCACAGAGGGTGAGAATCCCGTG CGATGAGATGCCCAATTCTATGTAAAGTGCTTTCGAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAATGCAGCTCTAAGTGGGTGGTA AATTCCATCTAAAGCTAAATATTGGCGAGAGACCGATAGCGAACAAGTACAGTGATGGAAAGATGAAAAGAACTTTG AAAAGAGAGTGAAAAAGTACGTGAAATTGTTGAAAGGGAAGGGCTTGAGATCAGACTTGGTATTTTGCGATCCTTTC CTTCTTGGTTGGGTTCCTCGCAGCTTACTGGGCCAGCATCGGTTTGGATGGTAGGATAATGACTAAGGAATGTGGCT CTACTTCGGTGGAGTGTTATAGCCTTGGTTGATACTGCCTGTCTAGACCGAGGACTGCGTCTTTTGACTAGGATGTT GGCATAATGATCTTAAGCCACCCGTCTT
【主权项】
1. 一株促进固态发酵糟醅产乙酸乙酯的酵母，其特征在于：所述的酵母为SNYH2,分类 命名为汉逊德巴利酵母Debaryomyces hansenii ;保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 10695。2. 如权利要求1所述的酵母，其特征在于：所述的白酒酵母的DNA序列如下： GCTTAGTACGGCGAGTGAGCGGCAAAGCTCAAATTTGAAATCTGGCACCTTCGGTGTCCGAGTTGTAATTT GAAGAAGGTAACTTTGGAGTTGGCTCTTGTCTATGTTCCTTGGAACAGGACGTCACAGAGGGTGAGAATCCCGTGC GATGAGATGCCCAATTCTATGTAAAGTGCTTTCGAAGAGTCGAGTTGTTTGGGAATGCAGCTCTAAGTGGGTGGTAA ATTCCATCTAAAGCTAAATATTGGCGAGAGACCGATAGCGAACAAGTACAGTGATGGAAAGATGAAAAGAACTTTGA AAAGAGAGTGAAAAAGTACGTGAAATTGTTGAAAGGGAAGGGCTTGAGATCAGACTTGGTATTTTGCGATCCTTTCC TTCTTGGTTGGGTTCCTCGCAGCTTACTGGGCCAGCATCGGTTTGGATGGTAGGATAATGACTAAGGAATGTGGCTC TACTTCGGTGGAGTGTTATAGCCTTGGTTGATACTGCCTGTCTAGACCGAGGACTGCGTCTTTTGACTAGGATGTTG GCATAATGATCTTAAGCCACCCGTCTT。3. 如权利要求1或2所述的酵母在促进固态发酵糟醅高产乙酸乙酯的用途。
【专利摘要】本发明公开了一株促进固态发酵糟醅产乙酸乙酯的酵母及其应用，本发明的酵母为SNYH2，分类命名为汉逊德巴利酵母Debaryomyces？hansenii；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC？No.10695。本发明的酵母能够使浓香型白酒混菌发酵糟醅中的乙酸乙酯生成量提高1.5倍，同时不影响乙醇的生成，不增加杂醇油的生成。CGMCC No.1069520150407
【IPC分类】C12P7/62, C12N1/16
【公开号】CN105132298
【申请号】CN201510392432
【发明人】余泳, 王涛, 游玲, 余雨柚, 胡先强
【申请人】四川蜀南远航生物科技有限公司
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年7月6日