依洛昔巴特的结晶修饰物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及关于N-{(2R)-2-[({[3,3-二丁基_7_(甲硫基）-1，1-二氧化-5-苯 基-2, 3, 4, 5-四氢-1，5-苯并噻庚因-8-基]氧基}乙酰基）氨基]-2-苯基乙醇基}甘 胺酸（依洛昔巴特（elobixibat))的结晶修饰物、更具体而言结晶修饰物I、IV、MeOH-1、 EtOH-1、1-PrOH-l及2-PrOH-l。本发明还涉及关于制备这些结晶修饰物的方法及包含结晶 修饰物IV的药物组合物。
【背景技术】
[0002] W0 02/50051公开了化合物1，1-二氧基-3, 3-二丁基-5-苯基-7-甲硫 基-8-(N-{(R)-r-苯基(羧甲基）氨基甲酰基]甲基}氨基甲酰基甲氧 基）-2,3,4,5_四氢-1，5-苯并噻庚因（依洛昔巴特；IUPAC名称：N-{(2R)-2-[({[3,3-二 丁基-7-(甲硫基）-1，1-二氧化-5-苯基-2, 3, 4, 5-四氢-1，5-苯并噻庚因-8-基]氧基} 乙酰基）氨基]-2-苯基乙醇基}甘胺酸）。此化合物涉及回肠胆汁酸转运体（IBAT)抑制剂， 其可用于治疗或预防诸如异常血脂症、便秘、糖尿病及肝病等疾病。根据W0 02/50051的实 验部分，制备依洛昔巴特中的最后合成步骤涉及由在酸性条件下水解叔丁氧基酯组成。藉 由在减压下蒸发反应混合物并藉由制备型HPLC使用乙腈/乙酸铵缓冲液（50:50)作为洗 脱剂纯化残余物来获得粗制化合物（实例43)。在冷冻干燥产物后，未鉴别出结晶物质。
[0003] 期望发现在稳定性方面足够适于配制为药物的依洛昔巴特形式。
[0004] 在形成本发明的基础的结晶研究中，使用X射线粉末衍射（XRPD)技术观察到依洛 昔巴特藉由在结构中纳入溶剂分子可自许多溶剂或溶剂混合物结晶，藉此形成特定溶剂合 物或混合型溶剂合物。因此，在许多溶剂或溶剂组合中获得依洛昔巴特的不同结晶修饰物。 当使用相同溶剂时甚至还可获得不同结晶修饰物。此外，使用热重分析（TGA)可推断出，相 同结晶修饰物的不同试样可含有不同量的溶剂。当自结晶溶剂合物蒸发所纳入的有机溶剂 分子时可获得依洛昔巴特的其它结晶修饰物。因此，支持本申请案的实验工作发现，依洛昔 巴特的许多结晶修饰物不稳定，及/或观察到其转化为其它结晶修饰物。因此，藉由重复类 似实验难以获得一致结果。
[0005] 可藉由以下揭露不同的溶剂化结晶修饰物：使用极快X射线检测器并自欲至试样 架上分析的固体材料浆液提取湿试样，将试样保持在实验温度下且然后在试样干燥时迅速 且重复分析该试样。此技术可显示初始形成的溶剂合物或混合型溶剂合物、去溶剂化修饰 物或两者的混合物。若存在一种以上部分或完全去溶剂化的结晶修饰物，则XRH)数据甚至 更可能发生变化。因此，仅获得纯结晶修饰物的XRro数据涉及另一挑战。
[0006] 各种结晶修饰物可能具有众多缺点，包括结晶度易变及处置与配制困难。因此，业 内需要稳定性、散装处置及溶解性方面的性质有所改良的稳定的依洛昔巴特结晶修饰物。 因此，本发明的目标涉及提供稳定且高度结晶的依洛昔巴特结晶修饰物。
【发明内容】
[0007] 本发明提供依洛昔巴特（elobixibat)的各种结晶修饰物。在一方面中，结晶修饰 物涉及依洛昔巴特的单水合物。单水合物包括与每摩尔依洛昔巴特结晶结合的〇. 9-1. 1摩 尔水。此处所计算水的量不包括吸附至晶体的表面的水。在某些实施方式中，单水合物稳 定至少一年，例如至少17个月。
[0008] 在与第一方面相关的另一方面中，本发明提供依洛昔巴特的结晶单水合物，其中 该结晶形式通过以下来制备：形成依洛昔巴特单醇化物，将单醇化物充分地转化为非溶剂 合物并将非溶剂合物暴露于水蒸气。单醇化物可为甲醇化物、乙醇化物、1-丙醇化物、2-丙 醇化物或这些醇的混合物。在某些实施方式中，在不形成单醇化物作为中间体的情形下不 可形成单水合物。
[0009] 本发明还包括其它结晶修饰物（包括结晶修饰物I及结晶修饰物IV)以及用于制 备这些结晶修饰物的中间体。
[0010] 本发明进一步提供治疗本文所描述病症的方法及本文所描述的结晶修饰物在治 疗本文所描述病症及制备用于治疗本文所描述病症的药剂中的用途。
【附图说明】
[0011] 图1显示结晶修饰物IV的X射线粉末衍射图。
[0012] 图2显示结晶修饰物EtOH-1的X射线粉末衍射图。
[0013]图3显示结晶修饰物EtOH-1(实线，底部）与IV(虚线，顶部）的X射线粉末衍射 图间的比较。
[0014] 图4显示结晶修饰物I的X射线粉末衍射图。
[0015] 图5显示结晶修饰物IV在TGA分析前（底部）及后（顶部）的X射线粉末衍射 图。
[0016] 图6显示由甲醇、乙醇、1-丙醇及2-丙醇获得的结晶修饰物IV的X射线粉末衍射 图（来自底部）。
[0017] 图7显示自甲醇、乙醇、1-丙醇及2-丙醇获得的结晶修饰物MeOH-1、EtOH-1、 1-PrOH-l及2-PrOH-l的X射线粉末衍射图（来自底部）。
[0018] 图8显示结晶修饰物MeOH-1的X射线粉末衍射图。
[0019] 图9显示结晶修饰物1-PrOH-l的X射线粉末衍射图。
[0020] 图10显示结晶修饰物2-PrOH-l的X射线粉末衍射图。
[0021] 图11显示结晶修饰物IV的DVS质量改变图形。该两个曲线显示％RH改变（右 侧y轴）及试样重量％反应（左侧y轴）。在图表的最左侧显示预干燥步骤。
[0022] 图12A及12B显示水吸收随结晶修饰物IV的％RH变化的图形。图12A中所使用 的试样由以实验室规模产生的物质获得，且图12B中所使用的试样由以中间工厂规模产生 的GMP物质获得。
[0023] 图13显示结晶修饰物I的DVS质量改变图形。该两个曲线显示％RH改变（右侧 y轴）及试样重量％反应（左侧y轴）。在图表的最左侧显示预干燥步骤。
[0024] 图14显示水吸收随结晶修饰物I的％RH变化的图形。
[0025]图15显示在略微不交叉的偏振器与使用10倍物镜的获得的结晶修饰物IV的显 微图。
[0026]图16显示在略微不交叉的偏振器与使用10倍物镜的间拍下的结晶修饰物I的显 微图。
[0027]图17显示结晶修饰物I及结晶修饰物IV的高分辨率X射线粉末衍射图。
[0028]图18显示结晶修饰物I、包含结晶修饰物I的片剂及安慰剂片剂的高分辨率X射 线粉末衍射图。
[0029] 图19显示结晶修饰物I、于40°C、75%相对湿度下储存8周后的包含结晶修饰物 I的片剂及安慰剂片剂的高分辨率X射线粉末衍射图。
[0030] 图20显示结晶修饰物IV、包含结晶修饰物IV的片剂及安慰剂片剂的高分辨率X 射线粉末衍射图。
[0031] 图21显示结晶修饰物IV、于40°C、75 %相对湿度下储存8周后的包含结晶修饰物IV的片剂及安慰剂片剂的高分辨率X射线粉末衍射图。
【具体实施方式】
[0032] 在第一方面中，本发明涉及依洛昔巴特的结晶修饰物IV。已惊奇地发现，可自初 始认为最稳定的干燥形式（结晶修饰物I)起始获得此极稳定的依洛昔巴特的结晶修饰物。 在I期及II期临床试验中使用结晶修饰物I作为药物物质。当在约〇°C至70°C之间（例如 在约0°C至25°C之间）的温度下在乙醇或乙醇与水的混合物中浆液化此结晶修饰物I时， 逐渐获得另一结晶修饰物，即乙醇溶剂合物EtOH-1。已证实此溶剂合物为单乙醇化物。在 (例如）减压及升高的温度下干燥此溶剂合物后，EtOH-1失去其溶剂合物分子且变为部分 结晶的非溶剂合物。当随后将非溶剂合物暴露于来自空气的水分时，其易于吸收一当量水。 在该两相转化期间，或多或少地保存结晶结构。发现所得单水合物（在下文称作结晶修饰 物IV)在（例如）环境开放条件下可稳定的储存至少上达至17个月。另外，此结晶修饰物 较结晶修饰物I及依洛昔巴特的其它较少结晶形式具有更好的热力学稳定性及更高更一 致的结晶度。
[0033] 此后发现依洛昔巴特在室温下在其它醇（例如甲醇、1-丙醇及2-丙醇）或醇与水 的50:50体积混合物中的表现类似。在这些条件下，可自浆液获得与EtOH-1大体上等结构 的溶剂合物MeOH-1、1-PrOH-l及2-PrOH-l。由此形成的醇溶剂合物的表现与EtOH-1的类 似的处在于，其在其开始失去其溶剂合物分子时形成中间体，且然后当充分地蒸发掉醇时， 其吸收水并转化为修饰物IV。图6显示自不同醇获得的修饰物IV的X射线粉末衍射数据。
[0034] 此稳定结晶修饰物IV的分离不那么直截。尽管结晶修饰物IV涉及单水合物，但 其不可直接自粗制依洛昔巴特或结晶修饰物I获得，因为当在水与醇的混合物中搅拌这些 时，形成醇溶剂合物（MeOH-1、EtOH-l、l-PrOH-l或2-PrOH-l)。相信醇溶剂合物在这些条 件下为热力学上更稳定的结晶修饰物。有趣地，如果不首先通过（例如）干燥自溶剂合物 的结晶结构去除醇分子，则醇溶剂合物即使在暴露于100%相对湿度时还不能自发地转化 为结晶修饰物IV。
[0035] 在一个实施方式中，本发明涉及具有利用CuKa1辐射获得且在° 2 0位置 6. 3±0. 2及/或19. 4±0. 2处具有至少特定峰的X射线粉末衍射（XRPD)图案的结晶修饰 物IV。
[0036] 在另一实施方式中，本发明涉及具有利用CuKa1辐射获得且在° 2 0位置 6. 3±0. 2及19. 4±0. 2处具有特定峰且具有一个或多个以下特征峰的XRPD图案的结晶修 饰物IV:10. 2±0. 2、10. 5±0. 2、9. 4±0. 2、9. 5±0. 2、12. 5±0. 2、14. 6±0. 2、15. 6±0. 2 及 23. 3±0. 2〇
[0037] 在另一实施方式中，本发明涉及具有利用CuKal辐射获得且在以下° 2 0位置 处具有特定峰的XRPD图案的结晶修饰物IV:6. 3±0. 2、19. 4±0. 2、10. 2±0. 2、10. 5±0. 2、 9. 4±0. 2 及 9. 5±0. 2。
[0038] 在另一实施方式中，本发明涉及具有利用CuKal辐射获得且在以下° 2 0位置 处具有特征峰的XRPD图案的结晶修饰物IV:6. 3±0. 2、19. 4±0. 2、10. 2±0. 2、10. 5±0. 2、 9. 4±0. 2、9. 5±0. 2、12. 5±0. 2、14. 6±0. 2、15. 6±0. 2、23. 3±0. 2 及一个或多个以下 位置：8. 3±0. 2、11. 3±0. 2、13. 4±0. 2、13. 9±0. 2、16. 3±0. 2、16. 6±0. 2、18. 2±0. 2、 18. 8±0. 2、19. 1±0. 2、19. 3±0. 2、19. 7±0. 2、19. 8±0. 2、20. 5±0. 2、21. 0±0. 2、 21. 3 ±0. 2、21. 4 ±0. 2、22. 6 ±0. 2、22. 9 ±0. 2、23. 1±0. 2、23. 9 ±0. 2、24. 5 ±0. 2、 24. 7 ±0. 2、25. 0±0. 2、25. 2 ±0. 2、25. 4 ±0. 2、25. 7 ±0. 2、26. 7 ±0. 2、26. 9 ±0. 2、 28. 3±0. 2 及 28. 9±0. 2。
[0039] 根据一个实施方式，本发明涉及具有利用CuKal辐射获得且在以下° 2 0位置 处具有特征峰的XRPD图案的结晶修饰物IV:6. 3±0. 2、8. 3±0. 2、9. 4±0. 2、9. 5±0. 2、 10. 2 ±0