一种从高粱外种皮提取原花青素的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物加工科学领域，特别是一种从高粱外种皮提取原花青素的方法。
【背景技术】
[0002]原花青素(Procyanidins，简称0PC)又被称为低聚黄烧酮类，是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。
[0003]原花青素是自然界酚类化合物中最丰富的种类，原花青素因在酸介质下发生典型氧化降解反应产生有色的花青素而得名。在各类原花青素中二聚体是分布最广、研究最多的一类原花青素。国内外已经报道了很多关于原花青素的药理学作用，例如清除自由基、强抗氧化性、抗肿瘤以及抗动脉硬化等功能；原花青素也已经用来防止糖尿病患者白内障手术后的并发症；此外原花青素在植物防御捕食者和微生物机理方面也起到了重要作用。鉴于原花青素具有如此广泛的作用，其提取方法也受到了国内外研究人员的极大关注。
[0004]现在已发现多种富含原花青素的资源，其中尤以对葡萄皮、籽中的原花青素的研究最深入、最广泛、最成功，取得了突破性的进展。而对高粱外种皮中的原花青素的研究少有文献报道。
[0005]我国幅员辽阔，高粱的种植面积和产量都居世界前列，高粱外种皮中富含原花青素，这一富含原花青素资源未被有效利用。现代生物学和药理学研究表明，原花青素具有很多生理活性和药理活性。如原花青素具有很强的抗氧化能力、能清除各种自由基和抗肿瘤、延缓衰老、抗炎症等多种药理活性，现已在临床医学和日用化工领域得到应用，同时毒理学研究表明原花青素没有任何毒副作用。
[0006]利用高粱外种皮提取原花青素，有利于提高高粱这种农作物的附加值，为原花青素的进一步研究和应用提供原料，因而具有广泛的经济效益和社会效益。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是克服现有提取方法的不足，提出一种从高粱外种皮中提取原花青素的方法。此方法所得到的原花青素产品可用于医药保健及化妆品等行业。
[0008]本发明的一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，原料为高粱外种皮，试剂有果胶酶(30000IU)，纤维素酶(15000IU)，95%乙醇(食品级)，柠檬酸(食品级)，磷酸氢二钠(食品级)。
[0009]本发明的一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，由以下步骤组成:
(1)备料:将高粱进行恒温减压干燥，碾磨粉碎，40目过筛，得到高粱外种皮粉末备用；
(2)配制缓冲溶液:将0.lmol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1:1.5?2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液: (3)配制酶液:混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按高粱外种皮粉末重量(kg):缓冲溶液体积(L)=1:15?30的比例计算果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1?O: 3g果胶酶与0.1?0.3g纤维素酶；
(4)投料:按高粱外种皮粉末重量(kg):缓冲溶液体积(L)=1: 15?30的比例，将高粱外种皮粉末加入酶液中；
(5)酶解:将高粱外种皮粉末与酶液搅拌均匀后，在50?55°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3-4h，生成酶解液和残渣的混合物；
(6)提取:按每kg高粱外种皮粉末加入15?30L的75?95%乙醇的方法，将75?95%乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在60?65°C条件下提取2?3h，经过滤，得到提取液；
(7)成品:置提取液于60?70°C的烘箱中烘至恒重，得到原花青素。
[0010]本发明的一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，以高粱外种皮为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取原花青素，其优点是原青花素产品安全性好、质量佳，原青花素提取率较醇提取法高30?40%，酶制剂的用量少，而且工艺简单，操作方便，效率高，适合工业化生产。使用果胶酶和纤维素酶可以破坏植物原料中以纤维素为主的细胞壁结构及其细胞间相连的果胶物质，使提取传质阻力减小，使内容物原青花素成分易于溶出。乙醇溶液作为醇溶性原青花素的提取溶剂。柠檬酸?磷酸缓冲溶液起到调节溶液PH值的作用。按本发明的方法配制的缓冲溶液，经检测其pH=6，可以保证酶制剂作用的最佳效果。
[0011]具体实施例:为了充分公开本发明的一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，下面结合实施例加以说明。
[0012]实施例:一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，其方法包括以下步骤:
(I)置高粱于65°C烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40日过筛，得到高粱外种皮粉末备用。
[0013](2)取0.lmol/L柠檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液。
[0014](3)取250ml的缓冲溶液，加入0.05g果胶酶与0.075g纤维素酶，搅拌使其完全溶解，形成均匀的酶液。
[0015](4)在上述的酶液中加入1g的高粱外种皮粉末。
[0016](5)搅拌均匀后于50°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3h，生成酶解液和残渣的混合物。
[0017](6)在酶解液和残渣的混合物中加入250ml95%乙醇，于60°C条件下提取2h，经过滤得提取液。
[0018](7)置提取液于65°C的烘箱中烘至恒重，得到原花青素。
【主权项】
1.一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，其特征在于由以下步骤组成: (1)备料:将高粱进行恒温减压干燥，碾磨粉碎，40目过筛，得到高粱外种皮粉末备用； (2)配制缓冲溶液:将0.lmol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1:1.5?2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液； (3)配制酶液:混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按高粱外种皮粉末重量(kg):缓冲溶液体积(L)=1:15?30的比例计算果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1?O: 3g果胶酶与0.1?0.3g纤维素酶； (4)投料:按高粱外种皮粉末重量(kg):缓冲溶液体积(L)=1: 15?30的比例，将高粱外种皮粉末加入酶液中； (5)酶解:将高粱外种皮粉末与酶液搅拌均匀后，在50?55°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3-4h，生成酶解液和残渣的混合物； (6)提取:按每kg高粱外种皮粉末加入15?30L的75?95%乙醇的方法，将75?95%乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在60?65°C条件下提取2?3h，经过滤，得到提取液； (7)成品:置提取液于60?70°C的烘箱中烘至恒重。2.根据权利要求1所述的一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，其特征在于由以下步骤组成: (1)置新鲜的高粱于65°C烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40目过筛，得到高粱外种皮粉末备用； (2)取0.lmol/L柠檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液； (3)取250ml的缓冲溶液，加入0.05g果胶酶与0.075g纤维素酶，搅拌使其完全溶解，形成均匀的酶液； (4)在上述的酶液中加入1g的高粱外种皮粉末； (5)搅拌均匀后于50°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3h，生成酶解液和残渣的混合物； (6)在酶解液和残渣的混合物中加入250ml95%乙醇，于60°C条件下提取2h，经过滤得提取液； (7)置提取液于65°C的烘箱中烘至恒重。
【专利摘要】一种从高粱外种皮提取原花青素的方法，以高粱外种皮为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取原花青素。制备方法包括以下步骤：备料、配制缓冲溶浓、配制酶液、投料、酶解、提取和成品。得到的原花青素产品，可应用于天然色素食品添加剂、具有抗氧化作用的医药保健品及化妆品等行业。
【IPC分类】C07D311/62
【公开号】CN105153098
【申请号】CN201510667895
【发明人】宁发子, 张娜, 诸敏
【申请人】重庆都好生物科技有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年10月16日