一种磷脂酰胆碱的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种磷脂酰胆碱的制备方法，属于化学工程技术领域。
【背景技术】
[0002]磷脂酰胆碱是一种天然、安全、高效的乳化剂，可用于输液或静脉注射用乳化剂，是注射剂领域最常用、最安全的乳化剂。同时，磷脂酰胆碱由于其脂质体的特征，可作为抗癌药物和其他缓释药物的载体，显著提高药物的活性、降低毒副作用，与其它药物载体相比具有低毒高效的优点。当磷脂酰胆碱用于注射、脂质体等用途时，对磷脂酰胆碱的纯度、杂质含量、水含量均有严格要求，通常要求磷脂酰胆碱纯度大于95?98%，同时磷脂酰乙醇胺和溶血性磷脂酰胆碱的含量小于1%，水含量低于2%，同时对热原、重金属含量均有限量要求。
[0003]现有技术中常见的制备磷脂酰胆碱的方法有多种，其中有逆流萃取，萃取后纯度相对较高，但全流程的收率仍然较低，萃取剂通常为乙腈或一元醇，萃取选择性低，物料损耗严重。超临界0)2提取制得脱除中性脂肪的磷脂酰胆碱，纯度仅为70%，且普遍存在纯度低，存在收率低、设备投资大的不足。而膜分离与柱层析相结合分离磷脂酰胆碱的方法，该方法存在膜易污染、不易再生、重复性差、成本昂贵、处理量小等不足，并且分离选择性低，不能完全分离分子量相近的磷脂组分。
【发明内容】
[0004]本发明主要解决的技术问题:针对利用逆流萃取，超临界CO2提取和膜分离与柱层析相结合分离法制得的磷脂酰胆碱，收率低，纯度低，同时会设备投资大，所需成本高的问题，提供了一种磷脂酰胆碱的制备方法，本发明主要首先将菜籽饼中的油脂去除掉，并粉碎成颗粒物，并利用狗宝中的酶进行微生物发酵，发酵完成后，利用乙醇溶液淹没发酵物，并收集滤液，对其减压浓缩，取上层液，在一定条件下，加入丙酮，静置风干即可。本发明所制备的磷脂酰胆碱纯度较高，高达95%以上，同时成本较低，制备工艺步骤简单。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案:
(1)取I?2kg菜籽饼放入容器中，按固液比1:3取大豆与鸡蛋黄放入榨汁机中进行榨汁，取榨出的液体置于容器中浸泡菜籽饼，静置20?30min后，将浸泡后的菜籽饼放入粉碎机中粉碎成40?60目颗粒物；
(2)将上述所得的颗粒物放入容器中，向其中加入质量分数为I?2%的硫酸亚铁溶液淹没颗粒物I?3cm，在温度为80?90°C下，搅拌25?30min后过滤，将所得的过滤物放入发酵池内，向其中加入200?400g狗宝，搅拌均勾后，再向其中分别加入80?120g葡萄糖、300?400g牛肉膏、I?3g磷酸氢二钾及20?50g磷酸铵搅拌均匀，使用质量分数为40%的氢氧化钠调节pH为6.5?7.0，密封发酵10?15天，温度保持为40?45°C ；
(3)待上述发酵结束后，向其中加入质量分数为80?85%的乙醇溶液淹没发酵物3?5cm，在转速为2000?3000r/min下，搅拌30?40min后快速过滤，收集过滤液置于容器中；
(4)对上述容器进行减压，减压至400?600Pa，并在温度为70?80°C下，将液体浓缩至原体积的30?40%，将所得的浓缩液与丙二醇按体积比1:1进行均匀混合，静置10?30min后分层，取上层液；
(5)将所得的上层液放入容器中，在温度为80°C下，搅拌40?50min后，向其中搅拌加入温度为10?15°C的丙酮，直至无沉淀产生，再静置10?15min后过滤，将所得的过滤物放入风干机中风干即可。
[0006]本发明的应用:将上述制备的磷脂酰胆碱为原料，加入甘油或大豆油稀释后，用明胶包裹而成，制成卵磷脂胶囊，或直接以颗粒形式服用，服用该产品，能够有效促进大脑发育，增强记忆力，同时还可以去除青春痘，滋润皮肤。
[0007]本发明的有益效果是:
(1)磷脂酰胆碱纯度较高，高达95%以上；
(2)制备步骤简单，成本低。
【具体实施方式】
[0008]首先取I?2kg菜籽饼放入容器中，按固液比1:3取大豆与鸡蛋黄放入榨汁机中进行榨汁，取榨出的液体置于容器中浸泡菜籽饼，静置20?30min后，将浸泡后的菜籽饼放入粉碎机中粉碎成40?60目颗粒物；再将上述所得的颗粒物放入容器中，向其中加入质量分数为I?2%的硫酸亚铁溶液淹没颗粒物I?3cm，在温度为80?90°C下，搅拌25?30min后过滤，将所得的过滤物放入发酵池内，向其中加入200?400g狗宝，搅拌均匀后，再向其中分别加入80?120g葡萄糖、300?400g牛肉膏、I?3g磷酸氢二钾及20?50g磷酸铵搅拌均匀，使用质量分数为40%的氢氧化钠调节pH为6.5?7.0，密封发酵10?15天，温度保持为40?45°C;待上述发酵结束后，向其中加入质量分数为80?85%的乙醇溶液淹没发酵物3?5cm，在转速为2000?3000r/min下，搅拌30?40min后快速过滤，收集过滤液置于容器中；对上述容器进行减压，减压至400?600Pa，并在温度为70?80°C下，将液体浓缩至原体积的30?40%，将所得的浓缩液与丙二醇按体积比1:1进行均匀混合，静置10?30min后分层，取上层液；将所得的上层液放入容器中，在温度为80°C下，搅拌40?50min后，向其中搅拌加入温度为10?15°C的丙酮，直至无沉淀产生，再静置10?15min后过滤，将所得的过滤物放入风干机中风干即可。
[0009]实例I
首先取2kg菜籽饼放入容器中，按固液比1:3取大豆与鸡蛋黄放入榨汁机中进行榨汁，取榨出的液体置于容器中浸泡菜籽饼，静置30min后，将浸泡后的菜籽饼放入粉碎机中粉碎成60目颗粒物；再将上述所得的颗粒物放入容器中，向其中加入质量分数为2%的硫酸亚铁溶液淹没颗粒物1cm，在温度为90°C下，搅拌30min后过滤，将所得的过滤物放入发酵池内，向其中加入400g狗宝，搅拌均勾后，再向其中分别加入120g葡萄糖、400g牛肉膏、3g磷酸氢二钾及50g磷酸铵搅拌均匀，使用质量分数