同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种去除苯胺和氨氮的复合菌剂及其制备方法和应用，尤其是由假单胞菌Zl和不动杆菌Yl复合而成的一种用于同时去除苯胺和苯胺降解过程中释放的氨氮的复合菌剂及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]苯胺是一种无色、油状、可燃且高毒性液体，是重要的有机化工原料，被广泛应用于国防、印染、塑料、油漆、农药和医药等行业，是一类严重污染环境和危害人体健康的有害物质。近年来，对苯胺废水处理的研究日趋成熟，去除废水中苯胺类有机物的方法大致分为:物理法、化学法和生物法。但苯胺在降解过程中会释放出氨氮，氨氮是水质监测的综合指标之一，高浓度氨氮会引起水体富营养化，威胁生态环境与人体健康。因此，需要考虑去除在降解苯胺过程中释放的氨氮，尽量减少污染物及副产物的排放，这不仅对实际应用有参考价值，也对水源保护有重要意义。
[0003]由于污染物结构的复杂性与种类的多样性，选择多种微生物组成一个生物体系，让其中的各个细菌发挥其最佳功能，并利用微生物之间的协同作用来高效率降解污染物符合实践的需要。由于苯胺降解细菌在去除苯胺的过程中释放出大量氨氮，而异养硝化细菌又具有在高C/N条件下有效降解氨氮的作用，将这两类菌制成复合菌剂，可以有效地同时去除苯胺和苯胺在降解过程中积累的氨氮。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂及其制备方法和应用，该复合菌剂能够同时有效地去除严重污染环境的苯胺以及在苯胺降解过程中积累的氨氮。
[0005]本发明的目的是通过以下技术方案实现的。
[0006]—种同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂，所述复合菌剂是由苯胺降解菌和异养硝化细菌复合而构成；其中:
[0007]苯胺降解菌，属于假单胞菌属(Pseudomonas)，命名为:Pseudomonas sp.Zl ;保藏登记号为:CGMCC N0.11444 ;保藏机构为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);保藏时间为:2015年9月24日；
[0008]异养硝化细菌，属于不动杆菌属(Acinetobacter);命名为:Acinetobactersp.Yl ;保藏登记号为:CGMCC N0.6563 ;保藏机构为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);保藏时间为:2012年9月14日。
[0009]其中，假单胞菌Zl和不动杆菌Yl的菌液体积之比是1:1。
[0010]一种用于上述同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂的制备方法，所述制备方法是下列步骤进行的:
[0011](I)假单胞菌Zl的制备方法
[0012]从4°C保藏的斜面上挑取少量菌体接种到10mL液体培养基中，在120rpm、30°C下振荡培养18h，至菌悬液OD6。。值为0.6?0.8时停止培养，获得假单胞菌Zl菌液；所述假单胞菌 Zl 的培养基成分为=KH2PO4L Og/L ；K2HP041.0g/L ；NaCl 1.0g/L ；MgS040.00 5g/L ;MnSO40.0017g/L ；H3B030.00116g/L ；ZnSO4.7H20 0.00115g/L ；FeS04.7H20 0.003g/L ;苯胺0.4g/L ;pH 值为 7.0-7.2 ;
[0013](2)不动杆菌Yl的制备方法
[0014]从4°C保藏的斜面上挑取少量菌体接种到10mL液体培养基中，在120rpm、30°C下振荡培养14h，至菌悬液OD6。。值为1.0?1.2时停止培养，获得不动杆菌Yl菌液；所述不动杆菌 Yl 的培养基成分为:柠檬酸钠，4.902g/L ; (NH4)2SO4,0.472g/L ;MgS04，0.05g/L ;K2HPO4,0.2g/L ;NaCl，0.12g/L ;MnS04，0.0lg/L ；FeS04.7H20，0.0lg/L ;pH 值为 7.0-7.2 ；
[0015](3)将上述步骤制备的假单胞菌Zl和不动杆菌Yl按1:1的体积比进行混合，获得微生物复合菌剂。
[0016]—种用于上述同时去除苯胺和氨氮复合菌剂的应用，所述应用是将制备获得的微生物复合菌剂用于同时去除苯胺及其苯胺在降解过程中积累的氨氮。
[0017]其中，所述同时去除苯胺及其苯胺在降解过程中积累的氨氮是按接种量为4%的体积比，将复合菌剂接种于苯胺废水中。
[0018]所述将复合菌剂接种于苯胺废水中是将假单胞菌Zl和不动杆菌Yl按体积比为I: I接种于苯胺废水，复合菌剂同时降解苯胺和氨氮，在48h后，苯胺降解率是93.54%,COD降解率是88.41 %，氨氮剩余量为4.39mg/L。
[0019]实现本发明上述所提供的一种同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂及其制备方法和应用，与现有技术相比，本方法所述复合菌剂是由假单胞菌(Pseudomonas sp.) ZICGMCCN0.11444和不动杆菌(Acinetobacter sp.) Y1CGMCC N0.6563按1:1的菌液体积之比复合而成，按接种量4%的体积比将复合菌剂接种于苯胺废水中，此时，复合菌剂同时降解苯胺和氨氮的综合效果最好，48h后，苯胺降解率为93.54%,COD降解率为88.41 %，氨氮剩余量为 4.39mg/L。
【附图说明】
[0020]图1是本复合菌剂的苯胺降解效果和Zl降解苯胺效果的对比图。
[0021]图2是本复合菌剂的氨氮积累效果和Zl积累氨氮量的对比图。
[0022]图3是本复合菌剂的COD降解效果和Zl降解COD效果的对比图。
【具体实施方式】
[0023]以下举例进一步说明本发明的【具体实施方式】，但是并不用于限定本发明的保护范围。
[0024]【具体实施方式】I
[0025]实施一种同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂，该复合菌剂是由苯胺降解菌和异养硝化细菌复合而成。
[0026]苯胺降解菌，属于假单胞菌属(Pseudomonas)，其命名为:Pseudomonas sp.Zl ;保藏登记号为=CGMCC N0.11444 ;保藏机构为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);保藏时间为:2015年9月24日。
[0027]异养硝化细菌，属于不动杆菌属(Acinetobacter)，其命名为:Acinetobactersp.Yl ;保藏登记号为:CGMCC N0.6563 ;保藏机构为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);保藏时间为:2012年9月14日。
[0028]其中，该假单胞菌Zl和不动杆菌Yl的菌液体积之比是1:1。
[0029]【具体实施方式】2
[0030]实施一种用于上述【具体实施方式】I中所述的同时去除苯胺和氨氮的复合菌剂的制备方法，该制备方法是按下列步骤进行的:
[0031](I)假单胞菌Zl的制备方法
[0032]从4°C保藏的斜面上挑取少量菌体接种到10mL液体培养基中，在120rpm、30°C下振荡培养18h，至菌悬液OD6。。值为0.6?0.8时停止培养，获得假单胞菌Zl菌液；所述假单胞菌 Zl 的培养基成分为=KH2PO4L Og/L ；K2HP041.0g/L ；NaCl 1.0g/L ；MgS040.00 5g/L ;MnSO40.0017g/L ；H3B030.00116g/L ；ZnSO4.7H20 0.00115g/L ；FeS04.7H20 0.003g/L ;苯胺0.4g/L ;pH 值为 7.0-7.2 ;
[0033](2)不动杆菌Yl的制备方法
[0034]从4°C保藏的斜面上挑取少量菌体接种到10mL液体培养基中，在120rpm、30°C下振荡培养14h，至菌悬液0D_值为1.0?1.2时停止培养，获得不动杆菌Yl菌液；所述不动杆菌Yl的培养基成分为:柠檬酸钠4.902g/L ; (NH4)2SO40.472g/