一种光合细菌培养基及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种细菌培养基及其制备方法，具体设及一种光合细菌培养基及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 光合细菌是一类能够进行光合作用而不产氧的特殊微生物群，广泛分布于海洋、 河流、湖泊和±壤中，能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨 等作为供氨体兼碳源进行光合作用，光合细菌富含蛋白质、生物高聚物、抗生素、类胡萝h 素、泛酸W及一些药用物质，现已广泛用于养殖业，种植业、污水处理等。基于W上优势，本 应加大光合细菌推广力度，但由于用于培养光合细菌的培养基具有平均富集时间较长、培 养基成分种类多W及成本较高等不足，限制了光合细菌在生产上的广泛应用。
[0003] 根据研究现状表明，传统RCVBN培养基成分种类多，配制工艺复杂，光合细菌培养 周期为3~5天，因此关于光合细菌培养基的研究逐渐受到重视，已有多位学者对其进行了 优化，通过对培养基优化，减少了用量，提高了光合细菌的产量，如张伟研究出的光合细菌 推荐培养基，操玉涛等研究出的改良71#培养基，刘军义等研究出的光合细菌计数培养基， 刘昆等对光合细菌成产配方的优化研究等。但W上培养基成分种类仍较多，其中含有酵母 膏和T.M储液等，生产成本高，不利于光合细菌的大规模工业化成产，因此亟需提供一种组 成成分简单、成本低W及培养周期短的培养基。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种组成简单的光合细菌培养基，解决了现有光合细菌培养 基存在现有光合细菌培养基平均富集时间较长、培养基成分种类多W及成本较高等技术问 题。
[0005]本发明所提供的光合细菌培养基，其组成为：
[0006] 每L所述光合细菌培养基的组成为：
[0007]S水合乙酸钢4~lOg，硫酸锭1~5g，碳酸氨钢1~5g，憐酸二氨钟0. 2~0.8邑， 硫酸儀0. 2~0. 8g，W及余量的水。
[0008] 进一步地，每L所述光合细菌培养基的组成可为：
[0009]S水合乙酸钢6~lOg，硫酸锭2~5g，碳酸氨钢2~5g，憐酸二氨钟0. 2~0.8邑， 硫酸儀0.2~0.8g，W及余量的水。
[0010] 上述的光合细菌培养基的抑值可为5. 5~8. 5,具体可为7. 5。
[0011] 上述的光合细菌培养基的具体组成为：
[0012] 每L所述光合细菌培养基的组成为水合乙酸钢6g，硫酸锭2g，碳酸氨钢2g，憐 酸二氨钟0. 4g，硫酸儀0. 4g，W及余量的水；或，
[0013] 每L所述光合细菌培养基的组成为水合乙酸钢lOg，硫酸锭5g，碳酸氨钢5g， 憐酸二氨钟0. 8g，硫酸儀0. 8g，W及余量的水。
[0014] 本发明光合细菌培养基可通过如下方法进行制备：
[0015] 将所述=水合乙酸钢、所述硫酸锭、所述碳酸氨钢、所述憐酸二氨钟和所述硫酸儀 溶解于水中，经定容后即得所述培养基。
[0016] 上述的制备方法中，还包括对所述培养基进行抑值调控的步骤。
[0017] 上述的制备方法中，利用氨氧化钢和盐酸调控所述培养基的抑值。
[001引本发明提供的培养基可用于培养细菌，如光合细菌。
[0019] 本发明提供的光合细菌培养基，其组成简单，仅由常规的5种化合物组成，未选用 现有的培养基中的酵母膏和T.M储液等高价格物质，因此降低了生产成本，如与RCVBN培养 基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省最高达85%;本发明的配制工艺简单易行，可 操作性强；采用本发明培养基培养，光合细菌浓度高，ODee。高达2. 2。
【附图说明】
[0020] 图1为本发明实施例1培养基培养光合细菌时的菌体生长情况。
[0021] 图2为本发明实施例2培养基培养光合细菌时的菌体生长情况。
【具体实施方式】
[0022] 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0023] 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0024] 实施例1、制备光合细菌培养基 阳0巧]称取如下组分：6gS水合乙酸钢、2g硫酸锭、2g碳酸氨钢、0. 4g憐酸二氨钟、0. 4g硫酸儀。
[0026] 按照如下方法进行配制：
[0027] 量取约500ml去离子水，准确称量6gS水合乙酸钢加入水中溶解，准确称量2g硫 酸锭加入水中溶解，准确称量2g碳酸氨钢加入水中溶解，准确称量0. 4g憐酸二氨钟加入水 中溶解，准确称量0.4g硫酸儀加入水中溶解。然后向溶液中补充去离子水至约990ml，揽拌 均匀。使用氨氧化钢及盐酸调节溶液抑至7. 5。最后将溶液定容至1L。 阳02引本发明培养基与RCVBN培养基的成本比较，如表1和表2所示：
[0029] 表1本发明实施例1培养基的成本
[0030]
[003引对比表1和表2中的数据可W得出，本发明培养基显著降低了生产成本；与RCVBN培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省85%。
[0034] 利用上述制备的培养基进行光合细菌的培养：
[0035] 取一定体积配制好的培养基于锥形瓶中，按照30%光合细菌成品菌液（其中光 合细菌为红螺菌、红假单胞菌、外硫沼泽红假单胞菌；购自北京渔经生物技术有限责任公 司）：70%培养基（体积比）接种。。接种后使用透氧封口膜将锥形瓶封口，置于60W白识 灯光下静置或摇床振荡培养，光照强度控制在30001UX，溫度控制在26~30°C。培养2~ 3天即能得到成品菌。
[0036] 上述培养过程中，菌体生长情况如图1所示，由图1可W看出，本发明培养基培养 的光合细菌的浓度高，ODee。高达2. 1，达到甚至超过RCVBN培养基所得的菌体浓度（为1.8 左右，其培养方案与本发明培养基的培养方案相同）。
[0037] 实施例2、制备光合细菌培养基
[0038] 称取如下组分：称取如下组分：10gS水合乙酸钢、5g硫酸锭、5g碳酸氨钢、0.8g 憐酸二氨钟、〇.8g硫酸儀。
[0039] 按照如下方法进行配制：
[0040] 量取约500ml去离子水，准确称量lOgS水合乙酸钢加入水中溶解，准确称量5g 硫酸锭加入水中溶解，准确称量5g碳酸氨钢加入水中溶解，准确称量0. 8g憐酸二氨钟加入 水中溶解，准确称量0. 8g硫酸儀加入水中溶解。然后向溶液中补充去离子水至约990ml，揽 拌均匀。使用氨氧化钢及盐酸调节溶液抑至7. 5。最后将溶液定容至1L。
[0041] 本发明培养基与RCVBN培养基的成本比较，如表3和表2所示：
[0042] 表3本发明实施例2培养基的成本
[0043]
W44]对比表3和表2中的数据可W得出，本发明培养基显著降低了生产成本；与RCVBN 培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省约70%。
[0045] 利用上述制备的培养基进行光合细菌的培养：
[0046] 取一定体积配制好的培养基于锥形瓶中，按照30%光合细菌成品菌液（其中光 合细菌为红螺菌、红假单胞菌、外硫沼泽红假单胞菌；购自北京渔经生物技术有限责任公 司）：70%培养基（体积比）接种。其中光合细菌为红螺菌、红假单胞菌、外硫沼泽红假单 胞菌。接种后使用透氧封口膜将锥形瓶封口，置于60W白识灯光下静置或摇床振荡培养，光 照强度控制在30001UX，溫度控制在26~30°C。培养2~3天即能得到成品菌。
[0047] 上述培养过程中，菌体生长情况如图2所示，由图2可W看出，本发明培养基培养 的光合细菌的浓度高，ODee。高达2. 2,达到甚至超过RCVBN培养基所得的菌体浓度（为1. 8 左右，其培养方案与本发明培养基的培养方案相同）。
【主权项】
1. 一种光合细菌培养基，其特征在于：每L所述光合细菌培养基的组成为： 三水合乙酸钠4~10g，硫酸铵1~5g，碳酸氢钠1~5g，磷酸二氢钾0. 2~0. 8g，硫 酸镁0. 2~0. 8g，以及余量的水。2. 根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：每L所述光合细菌培养基的组成为： 三水合乙酸钠6~10g，硫酸铵2~5g，碳酸氢钠2~5g，磷酸二氢钾0. 4~0. 8g，硫 酸镁0. 4~0. 8g，以及余量的水。3. 根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于：所述光合细菌培养基的pH值为 5. 5 ~8. 5〇4. 根据权利要求2或3所述的培养基，其特征在于：每L所述光合细菌培养基的组成 为下述1)或2): 1) 三水合乙酸钠6g，硫酸铵2g，碳酸氢钠2g，磷酸二氢钾0. 4g，硫酸镁0. 4g，以及余量 的水； 2) 三水合乙酸钠10g，硫酸铵5g，碳酸氢钠5g，磷酸二氢钾0. 8g，硫酸镁0. 8g，以及余 量的水。5. 根据权利要求1-4中任一项所述的培养基，其特征在于：所述光合细菌培养基的pH 值为7. 5。6. 权利要求1-5中任一项所述培养基的制备方法，包括如下步骤：将所述三水合乙酸 钠、所述硫酸铵、所述碳酸氢钠、所述磷酸二氢钾和所述硫酸镁溶解于水中，经定容后即得 所述培养基。7. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述方法还包括对所述培养基进行 pH值调控的步骤。8. 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：利用氢氧化钠和盐酸调控所述培养 基的pH值。9. 权利要求1-5中任一项所述培养基在培养细菌中的应用。10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述细菌为光合细菌。
【专利摘要】本发明公开了一种光合细菌培养基及其制备方法。每L所述光合细菌培养基的组成为：三水合乙酸钠4～10g，硫酸铵1～5g，碳酸氢钠1～5g，磷酸二氢钾0.2～0.8g，硫酸镁0.2～0.8g，以及余量的水。所述光合细菌培养基的pH值为5.5～8.5。配制所述培养基时，将所述组分溶解于水中，然后调配pH值后定容即可。本发明提供的光合细菌培养基，其组成简单，仅由常规的5种化合物组成，未选用现有的培养基中的酵母膏和T.M储液等高价格物质，因此降低了生产成本，如与RCVBN培养基相比，产出1千克菌体培养基的费用能节省最高达85％；本发明的配制工艺简单易行，可操作性强；采用本发明培养基培养，光合细菌浓度高，OD660高达2.2。
【IPC分类】C12N1/20
【公开号】CN105199993
【申请号】CN201510691293
【发明人】张光明, 彭猛, 王航瑶, 孟帆, 杨光, 王欣甜
【申请人】中国人民大学
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年10月22日