计数用装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及计数用装置，尤其涉及用于对密封的培养容器内的培养液中的细胞数量进行计数的计数用装置。
【背景技术】
[0002]近年来，在医药品的生产、遗传治疗、再生医疗、免疫疗法等领域中，要求在人工环境下高效地大量培养细胞、组织、微生物等。
[0003]在这样的细胞培养中，需要在细胞增殖的同时将培养液中细胞的密度维持在适当的范围。
[0004]S卩，若培养液中的细胞密度过大，则无法向各细胞供给足够的氧、营养，细胞增殖效率降低。另外，培养液中的细胞密度过小也无法得到足够的增殖效率。
[0005]因此，在细胞培养中，为了在培养中掌握细胞密度，需要适当地计测培养容器内的培养液中的细胞数量。
[0006]例如，在专利文献I公开了一种计数用装置，其用于计测密封的容器内的液体中的计数对象物的数量，具备:载置容器的积载台；以及将容器中的包括测定对象范围的至少一部分调整为规定厚度的调整构件。
[0007]该计数用装置还具备:拍摄机构，其拍摄容器内的计数对象物；计数机构，其计测被拍摄的图像内的计数对象物的数量；以及驱动装置，其在计数机构所进行的计测的结果是计数对象物的数量不在规定范围内的情况下驱动调整构件，将容器的至少一部分调整为规定厚度，以使得使图像内的计数对象物的数量达到规定的范围内。
[0008]这里，参照图10对专利文献I的容器内的计数对象物的计数方法的原理进行说明。需要说明的是，该计数方法的原理也应用于本发明的计数用装置。
[0009]图10是示出使用显微镜直接观察培养容器内的细胞并计测其数量的状况的图，图10(a)示出不调节培养容器的厚度T地进行观测的情况。需要说明的是，通过使用比重比细胞的比重小的物质作为培养液，由此能够使细胞沉淀到培养容器的底部，适于显微镜观察。需要说明的是，也可以相反地使用比重大的培养液，将细胞聚集到容器的上部进行观察。
[0010]在图10(a)的情况下，在培养容器内的细胞数量随着增加而悬浊并静置时，逐渐产生重叠。因此，在该方法中，在大量培养细胞的情况下，难以准确地计测细胞数量。
[0011]因此，专利文献I的计数用装置在细胞数量过多而无法准确计测的情况下，如图10(b)所示，通过将培养容器的厚度减少至T’，从而使测定对象范围(观测范围)中的细胞数量减少，调整为适于计测的细胞数量。
[0012]由此，在利用培养容器大量培养细胞的情况下，通过直接观察培养容器内的细胞，也能够不开放培养系统地计测细胞数量。
[0013]另外，在培养容器内的细胞数量少而难以进行培养容器整体的密度预测的情况下，通过增大培养容器的厚度，能够增加观测范围内的细胞数量，调整为适于计测的细胞数量。
[0014]在先技术文献
[0015]专利文献
[0016]专利文献1:日本特开2011-87498号公报
[0017]然而，专利文献I所记载的计数用装置虽然无需开放培养系统，并且无论细胞密度如何都能够计测培养容器内的细胞数量，但采用厚度的调整构件将容器的包括测定对象范围(也被称作可测定范围。)的至少一部分调整为规定厚度、即作为液体厚度以及膜厚的总和的规定厚度的结构。因此，若容器的膜厚Tl (参照图10)存在偏差，则可测定范围的液体的容积与所述偏差相应地增减，因此在计算细胞密度时，存在测定精度降低的顾虑。另夕卜，在误使用仅膜厚不同的容器的情况下，存在计算出错误的细胞密度的顾虑。
[0018]另外，在使用仅膜厚不同的容器的情况下，需要考虑各容器的膜厚来调整该厚度，因此迫切期望减少或者不需要用于该调整的劳力，由此提高作业性以及可靠性。
【发明内容】
[0019]发明要解决的课题
[0020]本发明是鉴于上述情况而提出的，其目的在于提供能够提高测定精度、作业性以及可靠性的计数用装置。
[0021]用于解决课题的手段
[0022]本发明的计数用装置用于计测具有挠性的容器内的液体中的计数对象物，所述计数用装置具备:载置台，其用于载置所述容器；以及按压台，其以与所述载置台的配置所述容器的一侧对置的方式配置，所述载置台与所述按压台能够在夹持所述容器的方向上相对移动，并且，在所述载置台与所述按压台的至少一方具有面向所述容器的表面的透光孔，所述按压台在所述透光孔的周边且与所述容器对置的一侧，突出设置有一个或者多个厚度设定构件，将所述容器夹在所述厚度设定构件与所述载置台之间。
[0023]发明效果
[0024]根据本发明，即便假设容器的膜厚存在偏差，由于能够无需考虑该偏差地进行测定，因此能够防止细胞密度等的测定精度降低之类的不良情况。另外，即便在使用仅膜厚不同的容器的情况下，由于不需要考虑各容器的膜厚，因此能够提高作业性以及可靠性。
[0025]另外，由于不需要从容器取出液体，因此在液体是培养液的情况下，能够排除污染风险。此外，由于不需要计测者的娴熟度，因此能够得到客观的数据。
【附图说明】
[0026]图1是示出本发明的一实施方式的计数用装置的简要俯视图。
[0027]图2示出本发明的一实施方式的计数用装置的简要主视图。
[0028]图3示出本发明的一实施方式的计数用装置的简要左视图。
[0029]图4是本发明的一实施方式的计数用装置的主要部分的简图，(a)示出放大剖视图，(b)示出A-A向视图，(C)示出计数中的放大剖视图。
[0030]图5示出用于对本发明的一实施方式的计数用装置的可测定范围进行说明的实验I的简图。
[0031]图6示出用于对本发明的一实施方式的计数用装置的可测定范围进行说明的实验2的简图。
[0032]图7示出用于对本发明的第一实施例的计数用装置的可测定范围进行说明的计数用装置的主要部分的简图。
[0033]图8示出用于对本发明的第二实施例的计数用装置的可测定范围进行说明的计数用装置的主要部分的简图。
[0034]图9示出用于对本发明的第三实施例的计数用装置的可测定范围进行说明的计数用装置的主要部分的简图。
[0035]图10示出用于对与本发明相关的容器内的计数对象物的计数方法的原理进行说明的简图。
【具体实施方式】
[0036]以下，对本发明的实施方式进行具体说明。
[0037]在图1?3中，计数用装置I具备载置台2、按压台3、壳体4、照明机构5以及拍摄机构6等，对具有挠性的容器11内的液体中的计数对象物进行计测。
[0038]另外，在本实施方式中，容器11是由几乎透明的树脂制的膜构成的培养容器，在容器11内作为液体而密封有培养液10，计数对象物是细胞。
[0039](容器)
[0040]容器11是以软包材料作为材料并形成为袋状(袋型)的容器。这样，通过使用软包材料作为容器11的材料，能够对容器11赋予挠性以及柔软性。作为软包材料，例如能够使用日本特开2004-323077号公报(加压抽出形的袋状容器)所记载的材料等。
[0041]另外，容器11具有细胞培养所需的气体透过性，局部或整体具有透明性，以便能够确认内容物。作为满足这样的条件的培养容器的材料，例如能够列举出聚烯烃、乙烯-醋酸乙烯共聚物、苯乙烯系弹性体、聚酯系热塑性弹性体、硅酮系热塑性弹性体、硅酮橡胶等。
[0042](载置台)
[0043]载置台2是大致矩形状的平板，设置在大致立方体形状的壳体4的上部，在上表面载置容器11。如图4(c)所示，该载置台2在按压台3的透光孔31的下方形成有透光孔21，在透光孔21的上部安装有平的玻璃板22。另外，透光孔21呈大致长圆形状，此外载置台2在右侧的背面侧的边缘部形成有用于使臂构件52可移动地通过的切口 23。另外，透光孔21设置为面向容器11的表面(下表面)。
[0044]需要说明的是，在本实施方式中，透光孔21是供收容于壳体4的拍摄机构6拍摄容器11内的细胞的孔。另外，为了拍摄容器