作为metap2(2型蛋氨酸氨肽酶)抑制剂的吡唑并二氮杂萘二酮衍生物的制作方法
【专利说明】作为METAP2 (2型蛋氨酸氨肽酶）抑制剂的吡唑并二氮杂萘 二酮衍生物
[0001] 本发明涉及吡唑并二氮杂萘二酮衍生物、其制备及其治疗用途。
[0002] 本发明化合物为2型蛋氨酸氨肽酶（MetAP2)的可逆和选择性抑制剂。
[0003]MetAP2为多肽代谢中涉及的普遍存在的基于胞质的金属蛋白酶。
[0004]MetAP2催化位于由细胞新合成的蛋白质的N末端蛋氨酸残基的裂解（Bradshaw R.A.等，TIBS，1998, 23, 263-267)。N端蛋氨酸残基的裂解是许多蛋白质和多肽成熟中的重 要步骤。其能够使细胞继续通常的翻译后修饰（肉豆蔻酰化，棕榈酰化等），然后降解所述 同一蛋白质。然而，MetAP2仅可在第二残基尺寸更小且不带电的条件下裂解该残基。
[0005] 当活性位点含有两个二价金属原子例如Co(II)或Mn(II)时MetAP2为活性的 (LiX.，ChangΥ·H.，Biochem.Biophys.Res.Commun. 227, 1996, 152-159)。此外，研究已使 得可确定人类MetAP2极有可能使用猛作为生理学金属离子（WangJ.等，Biochemistry 2003, 42, 5035-5042)。
[0006]MetAP2的另一功能是防止蛋白翻译因子eIF2(真核起始因子2)磷酸化（Datta 等，1988 ;Li和Chang, 1996)。已显示eIF2的磷酸化导致真核细胞中全部蛋白质合成 受到抑制。通过结合至蛋白翻译因子（elF2)，MetAP2保护α亚基免受抑制性磷酸化 (Datta, 2000 ;Kimball, 1999;Pestova等，2001)。然而，MetAP2 活性抑制剂不影响MetAP2 阻断elF2磷酸化的能力（Griffith, 1997)，这表明两个功能是独立的。
[0007] 存在MetAP2同工型：MetAPl。这两种同工型区别在于一个MetAP2的C末端内存 在约60个残基的额外螺旋结构域的。真核细胞具有两种形式。这两种形式的突变对于真 核细胞是致命的。该结果加强了对于识别对MetAP2具有选择性的抑制剂的兴趣。另一方 面，当仅有一种同工型突变时，观察到生长减少（LiX.和ChangY.H.，Proc.Natl.Acad. Sci. 1995,92, 12357-12361)。这些结果证实了蛋氨酸氨肽酶（MAP)功能对于细胞生长是必 需的并且该活性不能通过一个独立于MetAP的途径来接替。
[0008] 同样存在两种类型的MetAP2抑制剂：可逆抑制剂和不可逆抑制剂。某些已知的 不可逆抑制剂为烟曲霉素（fumagillin)、TNP-470和卵假散囊菌素（ovalicin)。在分子 水平上，正如烟曲霉素和卵假散囊菌素，TNP-470共价且不可逆结合至MetAP2(Griffith E.C.等，Chem.Biol. 1997, 4, 461-471)。
[0009]MetAP2已被确认为是衍生自烟曲霉素的抗血管生成剂家族（描述为有效不可逆 MetAP2抑制剂）的靶标。MetAP2抑制和由此产生的内皮细胞增殖和新生血管形成的抑制 之间的因果联系已清晰地建立（GriffithE.C.等，Chem.Biol. 1998, 95, 15183-15188)。
[0010] 在细胞水平上，MetAP2的靶标蛋白质目前仍鲜为人知。其中之一为甘油醛-3-磷 酸酯脱氢酶。已在用TNP-470处理内皮细胞期间观察到该酶合成中的一个缺陷。近期的研 究支持以下的假设：TNP-470的抗-MetAP2活性为其抗血管生成活性的来源。
[0011] 已显示不可逆MetAP2抑制剂在肺和肝纤维化治疗中发挥作用。纤维化是组织损 伤之后伤痕组织异常形成并导致受侵袭器官的慢性和进行性损伤，其可导致受侵袭器官的 严重功能紊乱。可存在许多纤维化原因，但大多数情况下，病痛原因不明并且损伤难以检 测。活化的成纤维细胞和肌成纤维细胞的聚集体发展，其构成了大量纤维化病灶的开始。当 形成损伤，它们是不可逆且不可消除的。因此，治疗针对的是疾病进展的减缓和改善症状。 在这种情况下，不可逆MetAP2抑制剂已在体内模型上显示了肺和肝纤维化的减少。然而， 已证明了这些不可逆抑制剂的显著毒性（KrugerE.A.，Exp.OpinionInvest.Drugs, 2000; Satchi-FainaroR.等，NatureMedicine, 2004)〇
[0012] 本发明提供了式（I)化合物
[0013]
[0014]其中：
[0015] X表示CH或氮原子，
[0016] Y表示CH或氮原子，其中X或Y为氮原子，
[0017] &表示未经取代或经一个或多个卤素原子取代的（C1-C4)烷基，
[0018] R2表示芳基或杂芳基，其未经取代或经一个或多个独立地选自以下的取代基取 代：
[0019]-卤素原子，
[0020] -(C1-C4)烷基，其中烷基为未经取代的或经一个或多个独立地选自以下的取代基 取代：卤素原子、杂环基、（C1-C4)烷氧基或羟基或NHR3
[0021] -0-R4
[0022] _(C0)NR5R5,
[0023]-未经取代或经一个或多个（C1-C4)烷基取代的杂环基
[0024] -环烷基
[0025]-氰基
[0026] -NR6R6.
[0027] -S02NR6R6,
[0028] -NHS02R7
[0029] -NH(CO)R7
[0030]_(C0)R8,和
[0031]-杂芳基，
[0032]R3表示（C1-C4)烷基或环烷基，
[0033]R4表示氢原子或（C1-C4)烷基，其中烷基为未经取代或经一个或多个卤素原子或 杂环基取代，
[0034] 1?5和R5,独立地表示氢原子、（C1-C4)烷基或芳基，
[0035] &和R6,独立地表示氢原子或（C1-C4)烷基，
[0036]R7表示（C1-C4)烷基，和
[0037]Rs表示（C1-C4)烷基、（C1-C4)烷氧基、环烷基或羟基。
[0038] 式（I)化合物可包含一个或多个不对称碳原子。因此，它们可以对映异构体或非 对映异构体的形式存在。这些对映异构体和非对映异构体，及其混合物，包括外消旋混合 物，形成了本发明的一部分。
[0039] 式（I)化合物还可以互变异构体形式存在并且为本发明的一部分。
[0040] 式（I)化合物可以碱或与酸或碱的加成盐（特别是药用盐）的形式存在。这些盐 形成了本发明的一部分。
[0041] 这些盐有利地以药用酸诸如盐酸制备，但是用于例如纯化或分离式（I)化合物的 其他酸的盐也形成了本发明的一部分。
[0042] 在本发明的上下文中，某些术语具有以下定义：
[0043]-卤素原子：氟、氯、溴或碘原子；
[0044]-烷基：直链或支链饱和脂族基团。实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基等；
[0045] -环烷基：环状（C3-C6)烷基。实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基，等；
[0046]_烷氧基：_0_烷基，其中烷基如上定乂。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙 氧基，等；
[0047] -氰基：基团CN;
[0048] -羟基：基团0H;
[0049]-芳基：包含5至10个碳原子的环状芳香族基团。芳基的实例包括苯基；
[0050] -杂芳基：包含5至10个碳原子并包含1至5个杂原子诸如氮和氧的单环芳香族 或双环芳香族基团。杂芳基的实例包括吡啶基、2-吡啶基、4-吡啶基、3-吡啶基、吡唑基、嘧 啶基和喹啉基；
[0051] -杂环基：未经取代的或桥接的环状烷基，其包含4至9个成环原子，其中1或2个 为杂原子，诸如氧或氮。杂环基的实例包括吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基和二氮杂环庚 烷基。
[0052] 在作为本发明主题的式（I)化合物中，第一组化合物包括其中X表示氮原子且Y 表不CH的化合物。
[0053] 在作为本发明主题的式（I)化合物中，第二组化合物包括其中X表示CH且Y表示 氮原子的化合物。
[0054] 在作为本发明主题的化合物中，第三组化合物包括其中R1表示未经取代或经一 个或多个氟原子取代的（C1-C4)烷基（更优选三氟乙基）的式（I)化合物。
[0055] 在作为本发明主题的式（I)化合物中，第四组化合物包括其中R2表示未经取代或 经一个或多个独立地选自以下的取代基取代的芳基的化合物：
[0056]-卤素原子
[0057] -((；_(；)烷基，其中烷基为未经取代或经一个或多个独立地选自以下的取代基取 代：卤素原子、杂环基、（CfC4)烷氧基或羟基或NHR3
[0058] -羟基
[0059] -0_R4，
[0060] -(C0)NHR5，
[0061] -未经取代或经（Q-Q)烷基取代的杂环基
[0062] -NR6R6'，
[0063] -S02NR6R6，
[0064] -NHS02R7，
[0065] -NH(CO)R7,
[0066] _(C0)R8,和
[0067] -杂芳基。
[0068] 在第四组化合物中，可提及其中R2表示苯基的式（I)化合物。
[0069] 在作为本发明主题的式（I)化合物中，第五组化合物包括其中R2表示未经取代或 经一个或多个独立地选自以下的取代基取代的杂芳基的化合物：
[0070] -卤素原子
[0071] _(C「C4)烷基，其中烷基为未经取代或经一个或多个独立地选自以下的取代基取 代：卤素原子、杂环基、（CfC4)烷氧基或羟基或NHR3，
[0072] -0-R4
[0073] -未经取代或经（C「C4)烷基取代的杂环基
[0074] -环烷基
[0075] -氰基
[0076] -NR6R6，，和
[0077] _(C0)Rs〇
[0078] 在第五组化合物中，可提及其中R2表示包含1或2个氮原子的杂芳基的式（I)化 合物。
[0079] 在后一组化合物中，可提及其中R2表示吡啶基、嘧啶基或喹啉基的式（I)化合物。
[0080] 在作为本发明主题的式（I)化合物中，可特别提及呈其碱、对映异构体、非对映异 构体、互变异构体包括外消旋混合物以及与酸的加成盐的形式的下列化合物：
[0081] 化合物编号1 :7_ (2_氣-吡啶_3_基）_5_ (2, 2, 2_二氣-乙基）_1，5_二氛-P比 唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0082] 化合物编号2 :7-吡啶-2-基-5- (2, 2, 2-三氟-乙基）-1，5-二氢-吡唑并 [4,3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0083] 化合物编号3 :7_[2- (4-甲基-哌嗪-1-基）-吡啶-4-基]-5- (2, 2, 2-三氟-乙 基）-1，5-二氢-吡唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0084] 化合物编号4 :7-(4-氣-苯基）-5_(2, 2, 2_二氣-乙基）_1，5_二氛-吡唑并 [4,3-c][1，6]二氮杂萘-4-酮
[0085] 化合物编号5 :7_邻甲苯基-5-(2, 2, 2-三氟-乙基）_1，5-二氢-吡唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0086] 化合物编号6 :5_(2, 2, 2_二氣-乙基）-7-(2-二氣甲基-苯基）_1，5_二氛-P比 唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0087] 化合物编号7 :7_(2_氣-苯基）-5_(2, 2, 2_二氣-乙基）_1，5_二氛-吡唑并 [4,3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0088] 化合物编号8 :7_吡啶-4-基_5-(2, 2, 2-三氟-乙基）_1，5-二氢-吡唑并 [4,3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0089] 化合物编号9 :7-喹啉-8-基-5-(2, 2, 2-三氟-乙基）-1,5-二氢-吡唑并 [4,3_c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0090] 化合物编号10 :5_(2, 2, 2_二氣-乙基）-7-(2-二氣甲氧基-苯基）_1，5_二氛-P比 唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0091] 化合物编号11 :2-[4_氧代-5-(2,2,2-三氟-乙基）-4,5_二氢-1H-吡唑并 [4,3-c][l，6]二氮杂萘-7-基]-苯甲酰胺
[0092] 化合物编号12 :7_ (4-吗啉-4-基-苯基）-5- (2, 2, 2-三氟-乙基）-1，5-二氢-吡 唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0093] 化合物编号13 :7_(6_氛基-吡啶_3_基）-5_(2, 2, 2_二氣-乙基）_1，5_二氛-P比 唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0094] 化合物编号14 :7- (2-氣甲氧基-苯基）(2, 2, 2-二氣-乙基）-1，5- _. 氢-吡唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0095] 化合物编号15 :4_[4-氧代-5- (2, 2, 2-三氟-乙基）-4, 5-二氢-1H-吡唑并 [4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-7-基]-N-苯基-苯甲酰胺
[0096] 化合物编号16 :2_氟-N-甲基-5-[4-氧代-5-(2,2,2-三氟-乙基）-4,5-二 氢-1H-吡唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-7-基]-苯甲酰胺
[0097] 化合物编号17 :7-(2-吗啉-4-基甲基-苯基）-5-(2, 2,2_三氟-乙基）-1,5-二 氢-吡唑并[4, 3-c] [1，6]二氮杂萘-4-酮
[0098] 化合物编号18