一种从花生种皮提取原花青素的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物加工科学领域，特别是一种从花生种皮提取原花青素的方法。
【背景技术】
[0002]原花青素具有抗氧化、清除自由基、增强细胞抗氧化的生理活性，且具有抗心血管疾病、抗衰老、抗溃疡等诸多药理作用，可防治80多种因自由基而引起的心脏病、癌症等疾病。目前原花青素主要从葡萄籽中提取。
[0003]我国花生资源极其丰富，是世界花生产量最高、出口量最多的国家，占世界总量的1/3。花生种皮作为花生加工的副产物，花生油生产企业大多做为丢弃物。而花生红衣中含有许多原花青素，国内目前对此研究报道较少，没有实际生产应用。因此，对从花生红衣中提取原花青素的研究具有非常重要的意义，对充分利用花生资源、提高花生产品附加值具有良好的经济和社会效益。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是克服现有提取方法的不足，提出一种利用酶制剂结合溶剂从花生种皮中提取原花青素的方法。此方法所得到的原花青素产品可用于医药保健及化妆品等行业。
[0005]本发明的一种从花生种皮提取原花青素的方法，原料为花生种皮，试剂有果胶酶(30000IU)，纤维素酶(15000IU)，95%乙醇(食品级)，柠檬酸(食品级)，磷酸氢二钠(食品级)。
[0006]本发明的一种从花生种皮提取原花青素的方法，由以下步骤组成:
(1)备料:将脱脂花生种皮进行恒温减压干燥，粉碎称量后，40目过筛，得到原料干粉备用;
(2)配制缓冲溶液:将0.lmol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1:1.5?2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液:
(3)配制酶液:混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按原料干粉重量(kg):缓冲溶液体积(L)=l:15?30的比例计算果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1?0: 3g果胶酶与0.1?0.3g纤维素酶；
(4)投料:按原料干粉重量(kg):缓冲溶液体积(L)=l:15?30的比例，将原料干粉加入酶液中；
(5)酶解:将原料干粉与酶液搅拌均匀后，在50?55°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3-4h，生成酶解液和残渣的混合物；
(6)提取:按每kg原料干粉加入15?30L的50?70%乙醇的方法，将50?70%乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在55?65°C条件下提取2?3h，经过滤，得到提取液； (7)纯化:采用AB-8树脂对提取液纯化，上样流速0.5?1.5 mL/min、解吸流速0.5?1..5 mL/min、依次采用20%、30%、50%浓度的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液；
(8)冻干:将洗脱液于冷冻真空干燥后，制得原花青素精制品粉末，冷藏保存。
[0007]本发明的一种从花生种皮提取原花青素的方法，以花生种皮为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取原花青素，其优点是原青花素产品安全性好、质量佳，原青花素提取率较醇提取法高30?40%，酶制剂的用量少，而且工艺简单，操作方便，效率高，适合工业化生产。使用果胶酶和纤维素酶可以破坏植物原料中以纤维素为主的细胞壁结构及其细胞间相连的果胶物质，使提取传质阻力减小，使内容物原青花素成分易于溶出。乙醇溶液作为醇溶性原青花素的提取溶剂。柠檬酸?磷酸缓冲溶液起到调节溶液pH值的作用。按本发明的方法配制的缓冲溶液，经检测其pH=6，可以保证酶制剂作用的最佳效果。纯化采用AB-8树月旨，最佳工艺为上样流速1 mL/min、解吸流速2 mL/min、依次采用20%、30%、50%浓度的乙醇溶液进行洗脱，得到的原花青素的含量分别为75.26%,84.50%和90.18%。
【具体实施方式】
[0008]为了充分公开本发明的一种从花生种皮提取原花青素的方法，下面结合实施例加以说明。
[0009]实施例:一种从花生种皮提取原花青素的方法取采收期的花生种皮为原料，提取方法包括以下步骤:
(1)置脱脂花生种皮于65°C烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40日过筛，得到原料干粉备用。
[0010](2)取0.lmol/L柠檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液。
[0011](3)取250ml的缓冲溶液，加入0.05g果胶酶与0.075g纤维素酶，搅拌使其完全溶解，形成均匀的酶液。
[0012](4)在上述的酶液中加入10g的原料干粉。
[0013](5)搅拌均匀后于50°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3h，生成酶解液和残渣的混合物。
[0014](6)在酶解液和残渣的混合物中加入250ml60%乙醇，于57°C条件下提取2h，经过滤得提取液；
(7)采用AB-8树脂对提取液纯化，上样流速1mL/min、解吸流速2 mL/min、依次采用20%,30%,50%浓度的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液；
(8)将洗脱液于冷冻真空干燥后，制得原花青素精制品粉末。
[0015]经检测，在纯化工艺过程中依次采用20%、30%、50%浓度的乙醇溶液进行洗脱，得到的原花青素的含量分别为75.26%,84.50%和90.18%。
【主权项】
1.一种从花生种皮提取原花青素的方法，其特征在于由以下步骤组成: (1)备料:将脱脂花生种皮进行恒温减压干燥，粉碎称量后，40目过筛，得到原料干粉备用; (2)配制缓冲溶液:将0.lmol/L柠檬酸溶液与0.2mol/L磷酸氢二钠溶液按1:1.5?2的体积比混合，再加水稀释2倍，配制成缓冲溶液； (3)配制酶液:混合缓冲溶液、果胶酶和纤维素酶，并充分搅拌使其完全溶解，从而形成均匀的酶液；缓冲溶液的用量按原料干粉重量(kg):缓冲溶液体积(L)=l:15?30的比例计算果胶酶和纤维素酶的用量为每L的缓冲溶液加入0.1?0: 3g果胶酶与0.1?0.3g纤维素酶； (4)投料:按原料干粉重量(kg):缓冲溶液体积(L)=l:15?30的比例，将原料干粉加入酶液中； (5)酶解:将原料干粉与酶液搅拌均匀后，在50?55°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3-4h，生成酶解液和残渣的混合物； (6)提取:按每kg原料干粉加入15?30L的50?70%乙醇的方法，将50?70%乙醇加入上述酶解液和残渣混合物中，在55?65°C条件下提取2?3h，经过滤，得到提取液； (7)纯化:采用AB-8树脂对提取液纯化，上样流速0.5?1.5 mL/min、解吸流速0.5?1..5 mL/min、依次采用20%、30%、50%浓度的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液； (8)冻干:将洗脱液于冷冻真空干燥后，制得原花青素精制品粉末，冷藏保存。2.根据权利要求1所述的一种从花生种皮提取原花青素的方法，其特征在于由以下步骤组成: (1)置脱脂花生种皮于65°C烘箱中烘干，用高速组织捣碎机粉碎，40目过筛，得到原料干粉备用； (2)取0.lmol/L柠檬酸溶液160ml，0.2mol/L磷酸氢二钠溶液320ml，混合并稀释定容至1000ml，配制成缓冲溶液； (3)取250ml的缓冲溶液，加入0.05g果胶酶与0.075g纤维素酶，搅拌使其完全溶解，形成均匀的酶液； (4)在上述的酶液中加入10g的原料干粉； (5)搅拌均匀后于50°C的恒温水浴锅内避光保温，每30min搅动一次，酶解3h，生成酶解液和残渣的混合物； (6)在酶解液和残渣的混合物中加入250ml60%乙醇，于57°C条件下提取2h，经过滤得提取液； (7)采用AB-8树脂对提取液纯化，上样流速1mL/min、解吸流速2 mL/min、依次采用20%,30%,50%浓度的乙醇溶液进行洗脱，得洗脱液； (8)将洗脱液于冷冻真空干燥后，制得原花青素精制品粉末。
【专利摘要】一种从花生种皮提取原花青素的方法，以花生种皮为主要原料，采用酶制剂结合溶剂提取原花青素。制备方法包括以下步骤：备料、配制缓冲溶浓、配制酶液、投料、酶解、提取、纯化和冻干。利用本发明的方法制备的原花青素，产品安全性好、质量佳，酶制剂的用量少，而且工艺简单，操作方便，效率高，适合工业化生产。
【IPC分类】C07D311/62
【公开号】CN105254607
【申请号】CN201510668975
【发明人】李锂, 邓小玲, 宁成刚
【申请人】重庆都好生物科技有限公司
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年10月18日