一种用于缓解戊唑醇种衣剂药害的微生物菌株、细菌制备物及应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及微生物技术领域，具体设及一种用于缓解戊挫醇种衣剂药害的微生物 菌株、细菌制备物及应用。
【背景技术】
[0002] 玉米是我国重要的农作物，在国民经济发展进程中具有重要地位。种衣剂在防治 玉米病虫害方面起着重要的作用，且又可促进作物生长，增产，具有显著的经济和生态效 益。目前玉米种衣剂的主要成分为杀虫剂（例如：化虫嘟、毒死婢、辛硫憐等）和杀菌剂（例 如：福美双、Ξ挫类、咯菌腊等）。上述的杀虫剂和杀菌剂能起到较好的防治病虫害的作用， 但作为化学农药，其对种子的药害不容忽视，如Ξ挫类杀菌剂会不同程度抑制玉米的发芽 和生长，尤其是戊挫醇种衣剂包衣玉米种子，春耕后，若发生倒春寒，戊挫醇的药害发生率 很高，对春耕生产造成严重影响。因此，种衣剂的副作用严重制约着玉米种衣剂产业的健康 稳定发展，W及现有种衣剂在生产中的推广应用。
[0003] 鉴于此，克服W上现有技术中的缺陷，提供一种缓解戊挫醇种衣剂对玉米等农作 物的药害的制剂或方法成为本领域亟待解决的技术问题。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于针对现有技术的上述缺陷，提供一种用于缓解戊挫醇种衣剂药 害的微生物菌株。
[0005] 本发明的目的可通过W下的技术措施来实现：
[0006] -种用于缓解戊挫醇种衣剂药害的微生物菌株，所述菌株为娃酸盐细菌 度acillusmucilaginosus)SY-FX-77菌株，所述菌株的保藏号为CCTCCΜ2015434,保藏单 位：中国典型培养物保藏中屯、，保藏日期：2015年7月6日。
[0007] 进一步地，所述菌株的leSrRNA基因序列为沈QIDNo.1。
[0008] 本发明还提供了一种细菌制备物，所述细菌制备物为保藏号为CCTCCΜ2015434 的菌株的纯培养物或培养物浓缩物或细菌悬液或发酵液。
[0009] 优选地，所述细菌制备物为保藏号为CCTCCΜ2015434的菌株在发酵培养液中经 过发酵培养形成的发酵液。
[0010] 优选地，所述发酵培养液的组成为：薦糖5g，胞2册〇42g，Μ拆〇4· 7&0 0. 5g，化CI3 0. 005g，CaC〇30.Ig，侣上矿 0. 5g，水 1000ml。
[0011] 优选地，所述发酵培养液的组成为：膜蛋白腺lOg，酵母提取物5g，氯化钢lOg，水 1000血。
[0012] 优选地，所述细菌制备物是经冷冻干燥的制备物。
[0013] 本发明还提供了上述的菌株在制备缓解戊挫醇种衣剂药害的制剂中的应用。
[0014] 本发明还提供了上述的细菌制备物在制备缓解戊挫醇种衣剂药害的制剂中的应 用。
[001引本发明的微生物菌株为娃酸盐细菌度acillus mucilaginosus)，本发明的细菌制 备物能够提高农作物种子活力，在一定程度上消除或减轻戊挫醇种衣剂对农作物种子的化 学农药药害，在种衣剂产业中具有一定的应用潜力。
【具体实施方式】
[0016] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合具体实施例对本 发明作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用W解释本发明，并不用 于限定本发明。
[0017] 术语"发酵培养液"是指液体培养基；术语"发酵液"是指菌株在液体培养基中发 酵培养一段时间后所形成的液体（包括了培养液）；术语"细菌悬液"是发酵液经过离屯、处 理后收集沉淀（菌株培养物或菌体），将沉淀溶于水或缓冲液中，经过震荡或吹打使得沉淀 状的菌株培养物悬浮起来所形成的均一的悬浊液。
[0018] 本实施例提供了一种用于缓解戊挫醇种衣剂药害的微生物菌株，所述菌株为 娃酸盐细菌度acillus mucilaginosus)SY-FX-77菌株，所述菌株的保藏号为CCTCC Μ 2015434,保藏单位：中国典型培养物保藏中屯、，保藏日期：2015年7月6日。
[0019] 进一步地，所述菌株鉴定特征如下：（1)在娃酸盐细菌培养基生长，半粒玻璃球 状，凸起，无色透明，5-6天后中部有浑浊点，边缘透明，表面光滑，粘稠，弹性大，可拉成丝 状。（2)在LB培养基生长，菌体呈乳白色，圆形不透明菌落，菌落表面及边缘光滑，无凸起。
[0020] 进一步地，所述菌株的leSrRNA基因序列为SEQIDNo. 1。根据测序结果与 Genbank中16SrRNA基因序列进行同源性比较，结果表明SY-FX-77菌株属于娃酸盐细菌 度acillusmucilaginosus)。
[0021] 本发明提供的细菌制备物为上述菌株的纯培养物或培养物浓缩物或发酵液，可W 是上述菌株在固体培养基表面形成纯培养物，例如：平板固体培养基或斜面固体培养基上 形成的菌落，也可W是上述菌株在液体培养基（发酵培养液）中发酵培养后经过离屯、分离 所得的细菌悬液，还可W是上述菌株在液体培养基（发酵培养液）中生长发酵形成的发酵 液。
[0022] 具体地，本发明所提供的娃酸盐细菌SY-FX-77的培养方法包括：将所述娃酸盐 细菌于保藏培养基中，在30-37°C活化12-24h;活化后菌株于种子培养基中，于30-37°C， 100-15化/min培养1-2天，作为种子液；将所得种子液W4-8% (v/v)接种比例接种于发酵 培养基中，在30-37°C下，100-150r/min振荡培养12-3化。
[0023] 所述分离培养基、保藏培养基和种子培养基为同一种（娃酸盐细菌培养基）：薦糖 5邑，胞2册〇42g，Μ拆〇4· 7&0 0. 5g，FeCls 0. 005g，CaC〇30. 1邑，侣±矿0. 5g，水1000ml，pH 7. 0-7. 5。
[0024] 本发明的实施例中，优选WLB培养基作为发酵培养基，也可WW保藏培养基或其 他能够适合该菌株生长的培养基作为发酵培养基，所述发酵培养基（LB培养基）：膜蛋白腺 lOg/l，酵母提取物 5g/l，氯化钢lOg/l，水 1000血，pH7. 0-7. 5。
[00巧]W上述发酵培养基培养娃酸盐细菌度acillus mucilaginosus) SY-FX-77获得发 酵液，该发酵液能有效减轻戊挫醇种衣剂包衣玉米带来的低溫药害问题，有效减轻药害引 起的玉米种子发芽率低、根长和芽长生长受抑制的状况，能提高包衣玉米种子发芽率，促 进根伸长。关于娃酸盐细菌在种衣剂解药害方面的应用还未见文献报道。
[0026] 实施例1
[0027]荫株SY-FX-77的分离
[0028] 取石油污染±壤lOg，加入内装100血无菌水和玻璃珠的Ξ角瓶中，于12化/min摇 床上振荡30min，振荡结束后静置比，取上清0. 5