一种维生素b6衍生物的合成方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药品技术领域，尤其涉及一种维生素B6衍生物的合成方法。
【背景技术】
[0002]口服多肽蛋白类药物主要受两方面的局限：一是肠胃中的蛋白酶和肽酶极易降解药物；二是该类药物一般分子量比较大，并且在小肠上皮细胞上没有特定的吸收途径。针对上述限制，现阶段有处方组成、包囊技术、大分子复合以及化学修饰等方法，用来改善多肽蛋白质类药物口服吸收。这些方法都可以提高口服蛋白药物的生物利用度，但各有不足。处方组成中的脂肪酸微乳会改变肠胃黏膜表面的完整性，包囊技术中的多糖类结构在吸收效率上还有待提高，大分子复合物以及化学修饰会改变多肽蛋白质类药物的分子结构形态。维生素B6在肠壁内有特定的吸收途径，由于其分子量比较大（135f5Da)，不能通过简单的扩散作用被肠胃吸收。在肠胃中，维生素B6能与内生因子（intrinsic factor, IF)形成复合物，该复合物能被在小肠上皮细胞识别并吸收。被小肠上皮细胞吸收后，在血液中，IF会与维生素B6分离，并释放维生素B6。因此，可以将维生素B6与多肽类药物直接或者与纳米载体连接，利用其吸收途径，达到口服多肽的给药效果。
[0003]但是与之相应的维生素B6衍生物的合成方法还不完善，合成较为困难且合成条件要求较高。
【发明内容】
[0004]本发明就是针对上述问题，提供一种方便合成且合成条件要求低的一种维生素B6衍生物的合成方法。
[0005]为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案。
[0006]一种维生素B6衍生物的合成方法包括下步骤。
[0007](1 )、取0. 6mg维生素B6溶解于5ml DMS0中，在装有温度计、回流冷凝管、干燥管的500mL三颈瓶中加入新制铜粉6. 6g, 0. 103mol，喹啉72mL，N2保护反应加热至200° C，搅拌3h ;投入4~8倍摩尔当量的⑶I ;在30°C下，超声水浴反应半小时后，加入300ul DIEA及900ul腐胺；在301：下，超声水浴反应2h，加入20ml乙酸乙酯终止反应，8000r/min离心5min，去上清；使用氮吹仪吹干沉淀物，得到维生素B6-羰基-腐胺的合成样品；
(2)、冰浴下将三乙胺1.8mL，12.8mmol缓慢滴入8mL丙酮中，溶液澄清，再加入11. 0g, 3. 2mmol和戊二酸酐1. 37g, 12mmol，使反应温度保持在15oC，搅拌，将样品溶解在甲醇溶液中，浓度为5mg/ml ;使用娃胶粒径为5um-10um的玻璃基薄板层析，薄板的娃胶层厚度为3mm ;薄板裁制成5cm*10cm的规格，置于110°C的烘箱中鼓风活化干燥12h ;将45%的正丁醇、30%的异丙醇、25%去离子水按对应的体积比混合均匀，并加入2%的氨水溶液，配制层析液；在30°C下，层析分离lh后，计算各组分的Rf值；
(3)、将5um-10um的硅胶粉于110°C，高温活化12h;取45ml正丁醇、30ml异丙醇、25ml60去离子水置于平底烧瓶中混合，洗脱前，加入2%的氨水混合静置5min，得到硅胶柱层析洗脱液；称取干燥的合成样品，溶解于未加入氨水的洗脱液，浓度为10mg/ml ;称取
3.8g 75um-100um的娃胶粉,加入研钵中，再加入13ml的正丁醇溶液，搅勻并装入层析柱中，形成lcm*5cm的硅胶层析柱；取1ml样品上样，上样后立即洗脱，因为维生素B6及其衍生物呈现显著的红色，所以直接根据洗脱液的颜色分别收集；洗脱后，收集各分离组分，既得。
[0008]作为一种优选方案，取0. 2mg维生素B6溶解于5ml DMS0中，投入6倍摩尔当量的CDI ;在301：下，超声水浴反应半小时后，加入300ul DIEA及900ul腐胺。
[0009]本发明有益效果：
本发明建立了维生素B6-羰基-腐胺的合成和检测方法，通过羰基唑类化合物活化维生素120 B6的核糖5-0H，再与腐胺反应生成维生素B6-羰基-腐胺。通过超声水浴辅助反应进行，该反应合成所需要的时间大幅度减少。通过TLC检测维生素B6-羰基-腐胺的合成产物，显示目的产物的灰度值占比超过80%，说明该合成方法可以较好的得到目的产物。最后，通过硅胶柱层析对合成产物进行了分离纯化，纯化后目的产物在TLC检测中的灰度值占比超过95%，说明通过硅胶柱层析成功将维生素B6-羰基-腐胺的合成产物进行了分离纯化。
【具体实施方式】
[0010]一种维生素B6衍生物的合成方法包括下步骤。
[0011](1)、取0.6mg维生素B6溶解于5ml DMS0中，在装有温度计、回流冷凝管、干燥管的500mL三颈瓶中加入新制铜粉6. 6g, 0. 103mol，喹啉72mL，N2保护反应加热至200° C，搅拌3h ;投入4~8倍摩尔当量的⑶I ;在30°C下，超声水浴反应半小时后，加入300ul DIEA及900ul腐胺；在301：下，超声水浴反应2h，加入20ml乙酸乙酯终止反应，8000r/min离心5min，去上清；使用氮吹仪吹干沉淀物，得到维生素B6-羰基-腐胺的合成样品；
(2)、冰浴下将三乙胺1.8mL，12.8mmol缓慢滴入8mL丙酮中，溶液澄清，再加入
11.Og, 3. 2mmol和戊二酸酐1. 37g, 12mmol，使反应温度保持在15oC，搅拌，将样品溶解在甲醇溶液中，浓度为5mg/ml ;使用娃胶粒径为5um-10um的玻璃基薄板层析，薄板的娃胶层厚度为3mm ;薄板裁制成5cm*10cm的规格，置于110°C的烘箱中鼓风活化干燥12h ;将45%的正丁醇、30%的异丙醇、25%去离子水按对应的体积比混合均匀，并加入2%的氨水溶液，配制层析液；在30°C下，层析分离lh后，计算各组分的Rf值；
(3)、将5um-10um的硅胶粉于110°C，高温活化12h;取45ml正丁醇、30ml异丙醇、25ml60去离子水置于平底烧瓶中混合，洗脱前，加入2%的氨水混合静置5min，得到硅胶柱层析洗脱液；称取干燥的合成样品，溶解于未加入氨水的洗脱液，浓度为10mg/ml ;称取
3.8g 75um-100um的娃胶粉,加入研钵中，再加入13ml的正丁醇溶液，搅勻并装入层析柱中，形成lcm*5cm的硅胶层析柱；取1ml样品上样，上样后立即洗脱，因为维生素B6及其衍生物呈现显著的红色，所以直接根据洗脱液的颜色分别收集；洗脱后，收集各分离组分，既得。
[0012]取(λ 2mg维生素B6溶解于5ml DMS0中，投入6倍摩尔当量的CDI ;在30°C下，超声水浴反应半小时后，加入300ul DIEA及900ul腐胺。
[0013]维生素B6分子式为C63H88CoN14014P，对应分子质量为135?a ;维生素B6-羰基-腐胺的分子式为C68H98CoN16015P，对应分子质量为1469Da。⑶I是咪唑的衍生物，其咪唑结70构中具有一个闭合的大31键，且其中一个N原子的未成键的sp2轨道上有一对孤对电子。CDI在与不同官能团的反应过程中表现出不同的活性，相对于仲醇，