一种灯盏花乙素二水合物结晶Ⅱ及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学技术领域，特别涉及一种灯盏花乙素二水合物结晶II和制备 该结晶的方法。
【背景技术】
[0002] 灯盖花素（Breviscapine)经临床验证其对脑梗死、椎基底动脉供血不足、冠心病 心绞痛、糖尿病并发症等疗效显著，其主要含灯盖花甲素（Apigenin-7-O-glucuronside， CAS号为29741-09-1)和灯盏花乙素（Scutellarin，又名野黄芩苷，CAS号为27740-01-8)。 灯盏花甲素结构式如下所示：
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[0004] 灯盏花乙素结构式如下式所示：
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[0006] 中国专利CN201010277395. 1公开了通过植物提取获得的灯盏花乙素水合物的制 备方法和用途，其分子式为C21H1S012 ·ηΗ20,η= 1. 7~2. 2,但未提及灯盏花乙素水合物晶 型，且该灯盏花乙素水合物是经植物提取分离获得，灯盏花乙素二水合物的结构式如下式 所示：
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[0008] 以化学合成法制备灯盏花乙素已有的文献和公开的专利分别为：何正 有，刘君焱等，一种合成5, 6, 4' -三羟基黄酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的方法（申请 号：200910059139. 2, 200910059140. 5);杨健等，一种制备灯盏花乙素的方法（申 请号：200910140214. 8);李鹏辉等，一种制备5, 6, 4' -三羟基黄酮-7-0-D-葡 萄糖醛酸的方法（【申请号】201210114758. 9,201210114894. 8);崔建梅等，Total synthesis of scutellarin-7-〇-Glucuronide, Journal of Asian Natural Products Reasearch2005, 7 (4) :655-660 ;崔建梅等《天然产物研究与开发》，2003,15, 3, 255-258)。 张伟等，一种灯盏花乙素结晶I及其制备方法（【申请号】200910164855. 7)公开了有关灯盏 花乙素晶型I，并认为灯盏花乙素存在多晶现象。到目前为止，国内外尚没有公开合成途径 获得灯盏花乙素二水合物的结晶报道。
【发明内容】
[0009]本发明的目的是提供一种灯盏花乙素二水合物结晶II，本发明所述灯盏花乙素二 水合物结晶II，使用Cu-κα辐射，λ= 1. 5405A，以2Θ角度表示的X-射线粉末衍射光谱 特征如下：
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[0012] 所述灯盏花乙素二水合物结晶II的DSC分析吸热转变温度为120-124°c。
[0013] 所述灯盏花乙素二水合物结晶II的熔融分解温度为208-212°C。
[0014] 所述灯盏花乙素二水合物结晶II的TGA分析熔融分解时伴有17% -22%的质量衰 减。
[0015] 本发明还提供所述灯盏花乙素二水合物结晶II的制备方法，包括以下步骤：
[0016] 步骤1 :灯盏花乙素粗品悬浮于有机溶剂和水的混合溶剂中，加热回流后冷却至 室温结晶，抽滤洗涤滤饼，减压干燥，得灯盏花乙素精制品1 ;
[0017] 步骤2:步骤1所得的灯盏花乙素精制品1悬浮于有机溶剂和水的混合溶剂中，滴 加无机碱水溶液将灯盏花乙素碱化成盐，抽滤，滤液滴加无机酸水溶液至pH为4~2,结晶 析出；抽滤洗涤滤饼，减压干燥，得灯盏花乙素精制品2 ;
[0018] 步骤3 :步骤2所得的灯盏花乙素精制品2悬浮于有机溶剂和水的混合溶剂中，回 流后冷却至室温，静置使充分析晶，抽滤洗涤滤饼，减压干燥，即得灯盏花乙素二水合物结 晶II。
[0019] 作为优选，步骤1中所述结晶温度为0_40°C，更优选0-30°C。
[0020] 作为优选，步骤1、2中所述有机溶剂为丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、N，N_二甲 基甲酰胺、N，N_二甲基乙酰胺、二甲基亚砜等中的之一或两种以上的混合物。
[0021] 作为优选，步骤2中灯盏花乙素碱化成盐的温度是0_45°C。
[0022] 作为优选，步骤2中所述无机碱溶液的物质的量浓度为1~4mol/L，更优选 2-3mol/L〇
[0023] 作为优选，步骤2中所述无机碱为氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸 钾、碳酸锂等中的一种或是几种。
[0024] 作为优选，步骤2中所述无机酸为盐酸、乙酸、硫酸、甲酸、硝酸、磷酸中的一种或 是几种。
[0025] 作为优选，步骤3中所述有机溶剂为四氢呋喃、乙腈、异丙醇、N，N-二甲基甲酰胺、 N，N_二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、甲醇、乙醇、丙酮等中的之一或两种以上的混合物。
[0026] 作为优选，步骤1、2、3中灯盏花乙素与所述混合溶剂的质量体积比以g/ml计为 1 : 10 ~1 : 100,更优选为 1 : 20 ~1 : 80。
[0027] 优选的，步骤1中灯盏花乙素粗品与所述混合溶剂的质量体积比（g/ml)为 1 : 20~1 : 60,有机溶剂和水的体积比为1:1~2:1。
[0028] 步骤2中灯盏花乙素精制品1与所述混合溶剂的质量体积比（g/ml)为1 : 20~ 1 : 80,有机溶剂和水的体积比为1:1~2:1。
[0029] 步骤3中灯盏花乙素精制品2与所述混合溶剂的质量体积比（g/ml)为1 : 20~ 1 : 80,有机溶剂和水的体积比为1:1~2:1。
[0030] 作为优选，步骤1、2、3混合溶剂中有机溶剂和水的体积比为1:1~3:1，最优选 1:1 ~2:1。
[0031] 本发明所述灯盏花乙素二水合物结晶II的制备方法，操作简单，采用的结晶溶剂 较现有结晶方法使用的结晶溶剂量少，生产成本低，易工业化生产，纯度高达99%以上。
[0032] 与不含结晶水的植物提取灯盏花乙素和已经报道的灯盏花乙素结晶I比较，本发 明所述灯盏花乙素二水合物结晶II具有以下优点：
[0033] 1、纯度高，色谱纯度为99 %以上；
[0034] 2、稳定性好，稳定性实验显示灯盏花乙素二水合物结晶II在高温和高湿条件下较 灯盏花素和灯盏花乙素结晶I更稳定；
[0035] 3、低引湿性；
[0036] 4、在水和乙醇中的溶解性好；
[0037] 5、无潮解现象。
【附图说明】
[0038] 图1 :灯盏花乙素二水合物结晶II的X-射线粉末衍射图；
[0039] 图2 :灯盏花乙素二水合物结晶II的DSC图；
[0040] 图3 :灯盏花乙素二水合物结晶II的TG-DTA图；
[0041 ] 图4 :灯盏花乙素二水合物结晶II的HPLC图；
[0042] 图5 :灯盏花乙素结晶I的X-射线粉末衍射图；
[0043] 图6 :灯盏花乙素对照品的X-射线粉末衍射图；
[0044] 图7 :灯盏花素的X-射线粉末衍射图；
[0045] 图8 :灯盏花乙素二水合物结晶II样的恒温TGA分析。
【具体实施方式】
[0046] 本发明公开了一种灯盏花乙素二水合物结晶II及其制备方法，本领域技术人员可 以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本 领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品、方法及应用 已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
【发明内容】
、精神和范围内对 本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
[0047] 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对 本发明作进一步的详细说明。
[0048] 下面的实施例是本发明的进一步的举例说明，而不是限定。
[0049] 实施例1
[0050] 1、灯盏花乙素精制品1的制备
[0051] 取全合成灯盏花乙素粗品（色谱纯度95%以上）500g，加入15L水和35L乙醇的 混合溶剂，体系加热回流4小时后降至室温。20°C下静置7小时后抽滤，滤饼用适量乙醇洗 涤，收集滤饼，60°C下干燥至恒重后，得455g灯盏花乙素精制品1，收率91 %。
[0052] 灯盏花乙素精制品2的制备
[0053] 取500g灯盏花乙素精制品1，加入15L水和25L异丙醇的混合溶剂。20°C搅拌下 滴加2mol/L的氢氧化钾水溶液至体系pH为约9,继续搅拌至体系为溶液状态。抽滤，滤液 20°C搅拌下滴加2mol/L的盐酸水溶液至pH约为2. 5,有大量黄色结晶析出。抽滤，滤饼用 适量乙醇洗涤，收集滤饼，60°C下干燥至恒重后，得435g灯盏花乙素精制品2,收率87%。
[0054] 灯盏花乙素二水合物结晶II的制备
[0055] 取500g灯盖花乙素精制品2,加入15L水和15L异丙醇的混合溶剂，体系加热回 流3小时后降至室温。20°C下静置7小时后抽滤，滤饼用适量乙醇洗涤，收集滤饼，60°C下 干燥至恒重后，得445g灯盖花乙素二水合物结晶II,收率89%。色谱纯度为99%以上，如 图4所示。
[0056] 实施例2
[0057] 1、灯盏花乙素精制品1的制备
[0058] 取全合成灯盏花乙素粗品（色谱纯度96%以上）500g，加入15L水和20L甲醇的 混合溶剂，体系加热回流5小时后降至室温。20°C下静置5小时后抽滤，滤饼用适量乙醇洗 涤，收集滤饼，60°C下干燥至恒重后，得460g灯盏花乙素精制品1，收率92%。
[0059] 2、灯盏花乙素精制品2的制备
[0060] 取500g灯盏花乙素精制品1，加入15L水和20L丙酮的混合溶剂。20°C搅拌下滴 加2. 5mol/L的氢氧化钠水溶液至体系pH为约9,继续搅拌至体系为溶液状态。抽滤，滤液 20°C搅拌下滴加冰乙酸至PH约为3,有大量黄色结晶析出。抽滤，滤饼用适量乙醇洗涤，收 集滤饼，60°C下干燥至恒重后，得425g灯盏花乙素精制品2,收率85%。
[0061] 3、灯盏花乙素二水合物结晶II的制备
[0062] 取500g灯盏花乙素精制品2,加入15L水和20L四氢呋喃的混合溶剂，体系加热回 流2小时后降至室温。20°C下静置7小时后抽滤，滤饼用适量乙醇洗涤，收集滤饼，60°C下 干燥至恒重后，得455g灯盖花乙素二水合物结晶II,收率91 %。色谱纯度为99 %以上。
[0063] 实施例3
[0064] 1、灯盏花乙素精制品1的制备
[0065] 取全合成灯盏花乙素粗品（色谱纯度96%以上）500g，加入20L水和30L异丙醇 的混合溶剂，体系加热回流4小时后降至室温。20°C下静置8小时后抽滤，滤饼用适量乙醇 洗涤，收集滤饼，60°C下干燥至恒重后，得440g灯盏花乙素精制品1，收率88%。
[0066] 2、灯盏花乙素精制品2的制备
[0067] 取500