一种用于血管保护的柠檬苦素类化合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体设及从干燥的陈皮中分离得到的一种具有血管保 护作用的巧樣苦素类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 陈皮是芸香科植物橘（CitrusreticulataBlaneo)及其栽培变种的干燥成熟果 皮。采摘成熟果实，剥取果皮，晒干或低溫干燥。味苦、辛，性溫，具有理气健脾、燥湿化疲作 用，用于腕腹胀满，食少吐泻，咳嗽疲多。药材分为"陈皮"和"广陈皮"。一般来说，陈皮果 皮常剥成数瓣，基部相连或呈不规则碎片。外表面澄黄色或红栋色，有细皱纹及凹下的点状 油室；内表面黄白色，粗糖呈海绵状，附黄白色或黄栋色筋络状维管束，质稍硬而脆，气香， 味辛而微苦。而广陈皮果皮则多剖成3至4瓣，基部相连，形状整齐有序，厚度约1毫米。点 状油室较大，对光照视透明清晰，质较柔软。但是不管是陈皮还是广陈皮都W片大、色鲜、油 润、质软、香气浓、味甜苦辛者为佳。主产于广东、福建、四川、江苏、浙江、江西、湖南等地。
[0003] 陈皮主要含有挥发油、黄酬类、有机胺类及微量元素等成分。陈皮含挥发油约占 2%~4 %，主要成分为巧樣苦素和巧樣醒。
[0004] 现代药理学表明陈皮在屯、血管、胃肠道、呼吸道、内分泌、抗癌、抗衰老、养颜美容、 营养补虚方面具有很好作用，运为陈皮深度开发提供广阔前景。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从干燥的陈皮中分离得到的一种具有血管保护作用的 巧樣苦素类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：(a)干燥的陈皮粉碎，用 80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱和 的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步骤（a)中 乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱12 个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；（C)步骤化）中75% 乙醇洗脱物浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、55:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲 烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体 积比为20:1、15:1和10:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分 2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为80%的甲醇水溶液等度洗脱， 收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0010] 进一步地，步骤（a)中，用85%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 一种药物组合物，该药物组合物含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物（I) 和药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物（I)在制备血管保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备血管保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可W直接使用，或者W药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 W及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物W单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】 阳〇1引图1为化合物（I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023] 制备方法：（a)将干燥的陈皮（8kg)粉碎，用85%乙醇热回流提取（2化X3次）， 合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱 和的正下醇0LX3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（347g)和正下醇萃 取物；化）步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱 体积，再用75 %乙醇洗脱12个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物 浸膏（131g) ;(c)步骤化）中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1(8 个柱体积）、55:1(8个柱体积）、35:U6个柱体积）、15:1 (8个柱体积）和1:1巧个柱体积） 的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4 (29g)用正相硅胶进一步 分离，依次用体积比为20:1(8个柱体积）、15:1 (10个柱体积）和10:U6个柱体积）的二氯 甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2(Ilg)用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为80 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (233mg)。
[0024] 结构确证：白色无定形粉末；HR-ESIMS显示[M+Na] +为m/z623. 2818,结合核磁特 征可得分子式为C33H44O1。，不饱和度为12。核磁共振氨谱数据5H(ppm，DMS0-de，500MHz): H-l(7. 37,d，J= 10. 6)，H-2(6. 11，d，J= 10. 6)，H-5(2. 84,dd，J= 7. 8,2. 7)，H-6(2. 24， dd，J= 16. 6,2. 7)，H-6(2. 37,dd，J= 16. 6,7.8)，H-9(2. 89,d，J= 7.W，H-1U5. 48， dd，J= 10.8, 7.W，H-12 巧.62,d，J= 10.8)，H-15 (3. 78,s)，H-16 (I. 73,dd，J= 14. 2， 10. 9)，H-16 (2. 14,dd，J= 14. 2, 7.I)，H-17 (2. 99,dd，J= 10. 9, 7.I)，H-18 (0. 91，s)， H-19 (0..92,s)，H-21 (7. 02,br，s)，H-22 巧.08,s)，H-23 (7. 20,t，J=I. 4)，H-28 (0. 93， s)，H-29 (1.04,s)，H-30 巧.13,s)，H-30 (5. 25, 8),7-0(? (3.59,s)，Il-OAc(1.89,s)， H-2'（2. 02,m)，H-3'（0. 82,d，J= 5.6)，H-4'（0. 81，d，J= 5.6);核磁共振碳谱数据 5C(卵m，DMSO-de，125MHz) : 151.8(CH，1-C)，125.I(CH，2-C)，203.6(C，3-C)，45. 7(C，4-C)， 44.6(CH，5-C)，30.8(細2,6-C)，173. 5(C，7-C)，136. 2(C，8-C)，52. 3(CH，9-C)，41. 5(C， 10-C)，70. 7(CH，11-C)，74.I(CH，12-C)，45. 0(C，13-C)，92.6(C，14-C)，78.I(CH，15-C)， 35. 3 (細2, 16-C)，37. 2(CH，17-C)，13.I(細3, 18-C)，20. 7 (細3, 19-C)，121.