一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种吸附剂的制备方法，特别是一种应用于普那霉素分离的吸附剂的 制备方法。
【背景技术】
[0002] 普那霉素主要用于治疗由革兰氏阳性菌包括耐药菌引起的感染。普那霉素经过化 学修饰得到的水溶性衍生物哇奴普下/达福普下对耐药性革兰氏阳性菌具有很强的杀菌 作用，且有较长的抗生素后效应和不易产生耐药性等优点，是目前治疗由耐药的革兰氏阳 性菌引起的感染最有效的抗生素之一。
[0003] 普那霉素IA的分子骨架是由1个3-径基化晚簇酸残基和k苏氨酸、D-氨基下 酸、k脯氨酸、4-二甲基氨基-k苯丙氨酸、4-酬-k六氨化晚簇酸和k苯甘氨酸等6个 氨基酸残基聚合而成的环状结构。PIA大环的第5位的L-DMPAPA残基被4-甲基氨基-k苯 丙氨酸残基替换就形成PIB，而PIB的第3位D-氨基下酸残基被D-丙胺酸残基替换后又形 成PIC分子。
[0004] US3154475公开了普那霉素的传统提取方法。发酵液调PH至3,过滤分离得到滤 液，用稀碱调滤液PH至7,然后用有机溶剂二氯甲烧直接萃取滤液，得到含有目的物的萃取 液，真空浓缩，用石油酸处理即得到普那霉素粗品，粗品用二氯甲烧溶解，上粉末状活性炭 柱层析，二氯甲烧洗脱，收集中央部分，石油酸处理得到沉淀，洗涂干燥后得到纯品，提取总 收率约50%。
[0005] CN102558302公开了一种分离纯化普那霉素的方法，属于生物技术领域。该方法 的主要步骤为：吸附树脂洗脱、纳滤浓缩、溶媒结晶、浓缩干燥后获得普那霉素成品。
[0006] CN102465164公开了一种普那霉素的制备方法，发酵液经酸化后，固液分离得到 滤液；滤液经大孔树脂脱色；脱色液用大孔吸附树脂富集后解析；解析液再用活性炭脱色 后浓缩、萃取、碱洗；结晶，碱洗液结晶得到普那霉素粗品；粗品再经过重结晶得到普那霉 素精粉。
[0007] 目前文献中所报道的分离纯化方法收率较低，不能W足够稳定和可重现的质量进 行批量生产。由于市售的吸附树脂与普那霉素相容性差，吸附能力收到限制，所W需要发明 一种新型的吸附树脂，提高对普那霉素的吸附能力。
【发明内容】
[0008] 目的在于针对从普那霉素发酵液分离纯化普那霉素对吸附分离材料的要求，本发 明提供一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法，同时公开其制备方法。通过W下步 骤实现：
[000引步骤1.水相的配制
[0010] 按重量份计，在压力反应蓋中内加入100份纯水0. 5-2份有机化学分散剂，揽拌均 匀；
[0011] 所述化学分散剂选自聚乙締醇、明胶或径甲基纤维素；
[001引步骤2.油相的配制
[0013] 按重量份计，将100份苯乙締、30-100份二乙締基苯、3-10份甲基丙締酸二甲氨基 乙醋，0. 05-0. 05份1-乙氧基-3-二氣甲基-1，3-下二締，0. 05-0. 05份1-甲氧基-3-二 甲基娃氧基-1，3-下二締混合，再加入0. 5-3份过氧化物引发剂、10-40份致孔剂，揽拌均 匀；
[0014] 步骤3.悬浮聚合反应
[0015] 将步骤2烧杯中配好的油相溶液加到步骤1中装有已配制水相的压力反应蓋中， 在70-115°C反应8-20h，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂抽提干净， 得到产品。
[0016] 步骤2所述的甲基丙締酸二甲氨基乙醋为市售产品。如上海顺强生物科技有限公 司生产的产品。
[0017]步骤2所述的1-乙氧基-3-S氣甲基-1，3-下二締，结构式见式（2)，为市售产 品，如上海御略化工有限公司生产的产品。
[0018]
[0019] 步骤2所述的1-甲氧基-3-S甲基娃氧基-1,3-下二締，结构式见式（3)，为市售 产品，如郑州阿尔法化工有限公司生产的产品。
[0020]
[0021] 步骤2所述的过氧化物引发剂优选过氧化苯甲酯。
[0022] 步骤2所述的致孔剂是良溶剂或非良溶剂或混合溶剂，如白油，溶剂油，甲苯等， 优选甲苯。
[0023] 本发明的有益效果：
[0024] 本发明在聚合中引入少量甲基丙締酸二甲氨基乙醋作为共聚单体，W提高树脂与 含有氨基糖巧结构的普那霉素的相容性，从而提高了普那霉素的收率；1-乙氧基-3-=氣 甲基-1，3-下二締，1-甲氧基-3-=甲基娃氧基-1，3-下二締的二締基团带给聚合物支链 结构，可W提高吸附能力。
【具体实施方式】
[0025] W下实施例仅仅是进一步说明本发明，并不是限制本发明保护的范围。
[0026] 实施例1
[0027] 步骤1.水相的配制
[0028] 按重量份计，在压力反应蓋内加入100份纯水，0. 5份明胶，揽拌均匀。
[002引步骤2.油相的配制
[0030] 将W下比例的油相组分在烧杯中混合，揽拌均匀；
[0031] 组分 重量份 苯立婦 100 二乙婦苯 50 甲基丙帰酸二甲氨基己醋 6 1-石氧基-3-H氣甲基-1，3-T二婦 0. 2 1-甲氧基-3-H甲基桂氧基-1,3-了二帰0.2 甲苯 30 过氧化苯甲醜 2
[0032] 步骤3.悬浮聚合反应
[0033] 将步骤2中配好的油相溶液加到步骤1中装有已配制水相的压力反应蓋中，在 90°C反应16h，反应结束后放料，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂抽提 干净，得到产品.编号为W-I
[0034] 实施例2
[003引步骤1.水相的配制
[0036] 按重量份计，在压力反应蓋内加入100份纯水，1. 5份聚乙締醇，揽拌均匀。
[0037] 步骤2.油相的配制
[0038] 将W下比例的油相组分在烧杯中混合，揽拌均匀；
[0039] 组分 重量份 苯乙婦 100 二乙婦苯 30 甲基丙婦酸二甲氨基古醋 3
[0040] 1-乙氧基-3-H氣甲基-1，3-了二締 0. 05 1-甲氧基-3-H甲基插氧基-1，3-T二締0.05 白油 40 过氧化苯甲酯 0.5
[0041] 步骤3.悬浮聚合反应
[0042] 将步骤2中配好的油相溶液加到步骤I中装有已配制水相的压力反应蓋中，在 7(TC反应20h，反应结束后放料，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂抽提 干净，得到产品.编号为W-2 [004引 实施例3
[0044] 步骤1.水相的配制
[0045] 按重量份计，在压力反应蓋内加入100份纯水，2份径甲基纤维素，揽拌均匀。
[004引步骤2.油相的配制
[0047] 将W下比例的油相组分在烧杯中混合，揽拌均匀；
[0048] 组分 重量份 苯乙婦 100 二乙帰苯 100 甲基丙婦酸二甲氨基石醋 10 1-乙氧基-3-H氣甲基-1，3-了二帰 0. 5 1-甲氧基-3-H甲基娃氧基-1,3-下二帰0.5 溶剂油 10 过氧化苯甲酯 3
[0049] 步骤3.悬浮聚合反应
[0050] 将步骤2烧杯中配好的油相溶液加到步骤1中装有已配制水相的压力反应蓋中， 在115 °C反应化，反应结束后放料，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂 抽提干净，得到产品.编号为W-3
[00川对比例1
[0052] 步骤2中甲基丙締酸二甲氨基乙醋重量份为0,其它同实施例1。所得产品编号为 W-4
[00閲对比例2
[0054] 步骤2中1-乙氧基-3-S氣甲基-1,3-下二締重量份为0,其它同实施例1。所 得产品编号为W-5 [00财对比例3
[0056] 步骤2中1-甲氧基-3-S甲基娃氧基-1,3-下二締重量份为0,其它同实施例1。 所得产品编号为W-6
[0057] 实施例4
[0058] 准确称取预处理后的实施例1-3和对比例1-3制得的吸附剂各5g，置于250mL具 塞磨口S角瓶中，精密加人IOOmL提取原液，将S角瓶在室溫下振荡化，充分吸附后，过滤， 取滤液使用LC-IOAD高效液相色谱仪测定普那霉素的浓度，计算普那霉素收率，见表1 :
[0059] 表I:本专利制得的吸附剂收率一览表
【主权项】
1. 一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 步骤1.水相的配制 按重量份计，在压力反应釜中内加入100份纯水0. 5-2份有机化学分散剂，搅拌均匀； 所述化学分散剂选自聚乙烯醇、明胶或羟甲基纤维素； 步骤2.油相的配制 按重量份计，将100份苯乙稀、30-100份二乙烯基苯、3_10份甲基丙稀酸二甲氨基乙 酯，0.05-0. 05份1-乙氧基-3-三氟甲基-1，3-丁二烯，0.05-0. 05份1-甲氧基-3-三甲 基硅氧基-1，3- 丁二烯混合，再加入0. 5-3份过氧化物引发剂、10-40份致孔剂，搅拌均匀； 步骤3.悬浮聚合反应 将步骤2烧杯中配好的油相溶液加到步骤1中装有已配制水相的压力反应釜中，在 70-115Γ反应8-20h，反应结束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后将致孔剂抽提干净，得到 广品。
【专利摘要】发明了一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法：在反应釜中，打入纯水，加入一定量的分散剂，引发剂，苯乙烯/交联剂单体/甲基丙烯酸二甲氨基乙酯，以及1-乙氧基-3-三氟甲基-1，3-丁二烯，1-甲氧基-3-三甲基硅氧基-1，3-丁二烯，致孔剂等，升温至反应温度，待反应结束.烘干，抽提致孔剂，烘干收袋.本发明在聚合中引入少量甲基丙烯酸二甲氨基乙酯作为共聚单体，以提高树脂与含有氨基糖苷结构的普那霉素的相容性，从而提高了普那霉素的收率。
【IPC分类】C08F2/20, C08F220/34, C08F236/14, C08F212/08, C08F236/16, C08J9/28, B01J20/30, B01J20/26, C08F212/36
【公开号】CN105294910
【申请号】CN201510846262
【发明人】王琪宇, 马骏
【申请人】王金明
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月30日