一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于微生物培养基技术领域，涉及一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，具体为一种加速真菌培养速度的改进型马铃薯葡萄糖培养基的制备方法。
【背景技术】
[0002]PDA培养基是马铃薯葡萄糖培养基的简称，即Potato Dextrose Agar Medium，是一种固体的半合成培养基。马铃薯葡萄糖培养基是一种运用十分广泛的培养基，适宜培养酵母菌、霉菌及蘑菇等真菌。在食品安全国家标准GB4789.15- 2010中，马铃薯葡萄糖培养基可用于检测食品中的酵母菌含量。
[0003]PDA培养基使用广泛，历史深远，关于PDA培养基改进的研究较少。传统PDA培养基的制作方法是:称取200g马铃薯，洗净去皮切成0.5cm3小块，加水1000mL煮沸lOmin，用双层纱布过滤，补足水分至1000mL，根据实验需要加葡萄糖20g和琼脂15-20g，溶化后再分装灭菌待用。传统的做法存在着原料浪费严重、操作较为繁琐与耗时长、不同批次培养基之间差别较大等问题。
[0004]丁浩等通过对PDA培养基在制作方法上进行改进，舍弃耗时长的马铃薯煮沸再过滤的方式，而采用马铃薯打浆的方式，达到简便工序，节省原料，提高PDA培养基质量，并切实提高该培养基酵母检出率的目的，旨在探索缩短培养基制作时间，提高培养基质量和酵母检出率。现有技术方案主要是缩短了培养基制作时间，但并未涉及PDA培养基培养真菌的速度问题。
【发明内容】
[0005]本发明旨在通过对马铃薯原料进行化学试剂预处理，使以该马铃薯为主要原料所制作的PDA培养基在真菌培养中的培养速度明显加快，有效改进培养效率。
[0006]本发明具体通过以下技术方案实现:
一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，具体包括以下步骤:
1)取新鲜马铃薯，在25±1°C，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯96 h~108 h ；
2)打开容器，通气30min以上；
3)称取处理好的马铃薯，切成小块，加水煮沸lOmin；
4)用双层纱布过滤，补足水至步骤(3)加水量，分别加入萄糖和琼脂，待完全熔化后灭菌。
[0007]进一步，本发明步骤(3)中将马铃薯切成0.5 cm3小块。
[0008]进一步，本发明步骤(3)中马铃薯块与所加水的的质量体积比为1:5 g/mL。
[0009]进一步，本发明步骤(4)中萄糖和琼脂的添加量与马铃薯块的质量比分别为10:1和 40:3-10:Ιο
[0010]本发明的有益效果为:本发明技术方案可以有效加快PDA培养基对真菌的培养速度，能够广泛用于食品发酵工业、食用菌行业和相关微生物领域，缩短真菌培养时间，明显提升培养效率。
【附图说明】
[0011]图1是本发明实施例青霉培养效果图；
图2是本发明实施例毛霉培养效果图；
图3是本发明实施例黑曲霉培养效果图。
【具体实施方式】
[0012]下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
[0013]本发明通过对马铃薯原料进行化学试剂预处理，以提高以该马铃薯为主要原料所制作的PDA培养基在真菌培养中的培养速度，具体通过以下过程完成。
[0014]取新鲜马铃薯洗净，在25±1°C，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯96 h~108 h，打开容器，通气30min以上，称取处理好的马铃薯，去皮后切成0.5 cm3小块，加水煮沸lOmin，马铃薯块与所加水的的质量体积比为1:5 g/mL ;用双层纱布过滤，补足水至原加水量，分别加入萄糖和琼脂，萄糖和琼脂的添加量与马铃薯块的质量比分别为10:1和40:3~10:1，待完全熔化后灭菌。
[0015]实施例1
一种改良马铃薯葡萄糖培养基，通过以下方法制备得到。
[0016]取新鲜马铃薯洗净，在25±1°C，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯96 h~108 h，打开容器，通气30min以上，称取处理好的马铃薯去皮后切成0.5cm3小块200g，加水lOOOmL煮沸lOmin，用双层纱布过滤，补足水分至lOOOmL，分别加葡萄糖20g和琼脂17.5g，待完全熔化后灭菌备用。
[0017]实施例2
一种改良马铃薯葡萄糖培养基，通过以下方法制备得到。
[0018]取新鲜马铃薯洗净，在25±1°C，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯块96 h~108 h，打开容器，通气30min以上，称取处理好的马铃薯去皮后切成0.5 cm3小块200g，加水1000mL煮沸lOmin，用双层纱布过滤，补足水分至1000mL，分别加葡萄糖20g和琼脂15g，待完全熔化后灭菌备用。
[0019]实施例3
一种改良马铃薯葡萄糖培养基，通过以下方法制备得到。
[0020]取新鲜马铃薯洗净，在25±1°C，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯块96 h~108 h，打开容器，通气30min以上，称取处理好的马铃薯去皮后切成
0.5 cm3小块200g，加水1000mL煮沸lOmin，用双层纱布过滤，补足水分至1000mL，分别加葡萄糖20g和琼脂20g，待完全熔化后灭菌备用。
[0021]实施例4 以实施例1制备所得PDA培养基接种青霉、毛霉、黑曲霉三种不同类型真菌，恒温培养l-3d，依据真菌菌落分布情况确定培养效果，以常规马铃薯葡萄糖培养基为对照。
[0022]常规马铃薯葡萄糖培养基通过以下方法制备:称取200g马铃薯，洗净去皮切成
0.5cm3小块，加水lOOOmL煮沸lOmin，用双层纱布过滤，补足水分至lOOOmL，根据实验需要加葡萄糖20g和琼脂15-20g，溶化后再分装灭菌待用。
[0023]实验结果如图1~3所示，实施例1培养基即处理组真菌菌落分布情况明显优于对照组，说明本发明PDA培养基可以明显的提高真菌培养中的培养速度，具有显著的意义。
【主权项】
1.一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)取新鲜马铃薯，在25±1°C，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯96 h~108 h ； 2)打开容器，通气30min以上； 3)称取处理好的马铃薯，切成小块，加水煮沸lOmin； 4)用双层纱布过滤，补足水至步骤(3)加水量，分别加入萄糖和琼脂，待完全熔化后灭菌。2.根据权利要求1所述的一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，其特征在于，步骤(3)中将马铃薯切成0.5 cm3小块。3.根据权利要求1所述的一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，其特征在于，步骤(3)中马铃薯块与所加水的的质量体积比为1:5 g/mL。4.根据权利要求1所述的一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，其特征在于，步骤(4)中萄糖和琼脂的添加量与马铃薯块的质量比分别为10:1和40:3~10:1。
【专利摘要】本发明公开了一种改良马铃薯葡萄糖培养基的制备方法，取新鲜马铃薯洗净，在25±1℃，相对湿度85%，避光条件下，在密闭容器内用溴乙烷浸泡马铃薯块96？h~108？h，打开容器，通气30min以上，称取处理好的马铃薯切块加水煮沸10min，用双层纱布过滤，补足水至原加水量，分别加入萄糖和琼脂，待完全熔化后灭菌。本发明方法简单实用，可明显加快PDA培养基对真菌的培养速度，具有广泛的推广实用价值。
【IPC分类】C12N1/14
【公开号】CN105296361
【申请号】CN201510658236
【发明人】杨薇红, 童斌, 张小华, 操庆国, 宋金耀, 吕兴萍, 陈赓
【申请人】江苏农林职业技术学院
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年10月14日