噁唑烷酮类化合物及其合成方法与医药应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及嗯挫烧酬类化合物，并提供了该类化合物的合成方法及其在抗血栓方 面的应用。
【背景技术】 阳00引凝血因子Xa位于外源性凝血途径和内源性凝血途径的交叉位置，可催化凝血酶 原转化为凝血酶，抑制其活性可W有效的抑制凝血酶的产生和血栓的形成，所W凝血因子 Xa是目前抗凝血药物研究的重要祀点。Xa因子抑制剂是一类新型的抗凝剂，临床上用于治 疗血栓栓塞等屯、脑血管疾病。随着全球第一个口服Xa因子抑制剂利伐沙班的上市，嗯挫烧 酬类Xa因子抑制剂备受关注，其优点在于生物利用度高、治疗窗宽、量效关系稳定、与食物 和药物相互作用小、临床使用方便等优点。
[0003] Xa因子结构中的S1 口袋是一个较深的狭窄裂缝，是Xa因子与底物特异性结合口 袋，底部有天冬氨酸残基（Aspl89)和酪氨酸残基（Tyr228)，其中Aspl89的簇基可与碱性基 团结合。利伐沙班结构中含有强的亲脂性氯嚷吩片段，能与Tyr228的芳香环相互作用，改 善药物的脂溶性，提高口服生物利用度。在寻找新的嗯挫烧酬类药物时，我们利用生物电子 等排原理对利伐沙班进行结构改造：设想用含面素和不含面素的亲脂性芳香基结构取代利 伐沙班的氯嚷吩片段，期望通过芳香基保证药物的脂溶性和口服生物利用度；同时增加碱 性基团，加强嗯挫烧酬类药物与S1 口袋Aspl89簇基的结合，增强药效。根据运一设想设计 并合成了 一系列嗯挫烧酬类化合物。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一系列新的具有抗凝作用的嗯挫烧酬类化合物。 阳〇化]本发明的另一目的在于提供运一系列化合物的合成方法。
[0006] 本发明的进一步目的在于提供上述化合物在血栓症治疗中的应用。
[0007] 为解决上述问题，本发明提供如下技术方案：
[0008] 通式（I)嗯挫烧酬类化合物：
[0009]
[0010] 其中Ri代表硝基或氨基，R2代表氨、面素、硝基、氯基、径基、C1~Ce烷基、C1~C6 烷氧基、。~Ce面代烷基、C1~Ce面代烷氧基、无取代或单取代或双取代的氨基、簇基、幾 基及其衍生物；
[0011] 上述R2在通式（I)的苯环上可W是单位取代、双位取代或多位取代，双位取代或 多位取代的Rz可W同时或分别是氨、面素、硝基、氛基、径基、C1~Ce烷基、C1~Ce烷氧基、 。~Ce面代烷基、Cl~Ce面代烷氧基、无取代或单取代或双取代的氨基、簇基、幾基及其衍 生物。
[0012] 通式（II)嗯挫烧酬类化合物：
[0013]
[0014] 其中R2的定义同上，R3代表了取代或无取代的烷基、杂环、芳香环或芳烷基，取代 基可W是面素、硝基、烷基、烷氧基、面代烷基、面代烷氧基、氯基、径基、无取代或单取代或 双取代的氨基、簇基、幾基及其衍生物。
[0015] 根据本发明，优选的通式（I)和通式（II)的化合物包括：
[0016] Ii:做-4-(4-巧-(((4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基）苯基） 吗嘟-3-酬
[0017] 12:(巧-4-(4-巧-(((2-氣-4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）吗嘟-3-酬
[0018] 13:(巧-4-(4-巧-(((3-氣-4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）吗嘟-3-酬
[0019] 14:(巧-4-(4-巧-(((2,4-二硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基）苯 基）吗嘟-3-酬 柳2〇]Is:做-4-(4-巧-(((4-氨基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基）苯基）吗嘟-3-酬
[0021]Is:(巧-4-(4-巧-(((4-氨基-2-氣苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）吗嘟-3-酬
[0022] 1?:(巧-4-(4-巧-(((4-氨基-3-氣苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）吗嘟-3-酬
[0023]II1: (S)-2-氯-N-(4-(2-氯乙酷胺基）苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代吗 嘟-4-基）苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）乙酷胺 1^0024]化:（S) -2-氯-N- (4- (2-氯乙酷胺基）-2-氣苯基）-N-((2-氧代-3- (4- (3-氧代 吗嘟-4-基）苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）乙酷胺 1^0025]II3: (S) -2-氯-N- (4- (2-氯乙酷胺基）-3-氣苯基）-N-((2-氧代-3- (4- (3-氧代 吗嘟-4-基）苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）乙酷胺
[0026]II4: (S)-N-(4-苯甲酯胺基苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代吗嘟-4-基）苯 基）嗯挫嘟-5-基）甲基）苯甲酯胺
[0027]IIs:做-N-(4-苯甲酯胺基-2-氣苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代吗嘟-4-基） 苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）苯甲酯胺 阳0測 lie:做-N-(4-苯甲酯胺基-3-氣苯基）-N-((2-氧代-3-(4-(3-氧代吗嘟-4-基） 苯基）嗯挫嘟-5-基）甲基）苯甲酯胺
[0029] 通式（I)化合物的合成方法一：化合物la和通式扣在碱存在条件下发生取代反 应；反应的摩尔比为la:扣=1 : 1~10 ;所用溶剂为乙酸乙醋、乙腊、DMS0、DMF、丙酬、 四氨巧喃、二氧六环、甲苯、正下醇、异丙醇、乙二醇、水的一种或多种；la与溶剂的质量体 积比为1 : 5~50 ;所用碱包括氨化钢、甲醇钢、乙醇钢、叔下醇钢、叔下醇裡、氨氧化钟、氨 氧化裡、氨氧化钢、碳酸钟、碳酸钢、碳酸氨钟、碳酸氨钢、憐酸钟、憐酸氨二钟；反应溫度为 25 ~15(TC;
[0030]
阳0川其中，R2定义同上，Y代表面素。
[0032] 上述合成方法可加入少量舰化亚铜做催化剂。
[0033]通式（I)化合物的合成方法二：由通式（I)化合物的合成方法一所得的通式Ic在 还原铁粉及氯化锭的条件下进行还原反应；反应的摩尔比为Ic:Fe:氯化锭=1 : 3~ 15 : 1~5 ;所用溶剂为乙醇：水=1~10 : 1 ;Ic与溶剂的质量体积比为1 : 20~50 ; 反应溫度为50~150°C;
[0034]
阳0对其中，R2定义同上。
[0036] 通式（II)的化合物的合成方法：由通式（I)化合物的合成方法二所得的通式 Ila，其与通式Ilb在碱性条件下进行取代反应；反应的摩尔比为Ila:IIb=l: 1~10; 所用溶剂包括二氯甲烧、二氧六环、甲苯、DMF、DMS0、四氨巧喃、乙腊、化晚；Ila与溶剂的质 量体积比为1 : 5~50;所用碱包括Ξ乙胺、化晚、氨化钢、氨氧化钟、氨氧化裡、氨氧化钢、 碳酸钟、碳酸钢、碳酸氨钟、碳酸氨钢；反应溫度为-10~120°C;
[0037]
阳〇3引其中，R2、R3和Y的定义同上。[0039]
[0040] 化合物对人凝血因子Xa的体外抑制实验：
[0041] 本发明对合成的13个嗯挫烧酬类化合物进行药理活性筛选。具体实验方案可参 见（金丽媛，凝血因子Xa抑制剂的计算机辅助设计和药理活性研究，硕±论文，天津医科大 学，天津，2009)。 柳42] 1.实验材料
[0043] 1. 1药物和试剂 W44] 对照品利伐沙班，化合物Ii、12、13、心Is、le、17、化、化、化、&、&、He均由中 国药科大学药物化学教研室提供。人凝血因子Xa(FXa)酶联免疫分析试剂盒，武汉华美生 物科技有限公司，产品编号CSB-E1269化。其他试剂均为分析纯。
[0045] 1. 2主要仪器
[0046] 酶标分析仪：Bio-Rad公司，型号：iMark。
[0047] 2.试验方法
[0048] 2. 1标准品的制备：临用前15min用样品稀释液将标准品稀释至1ml，反复颠倒 震摇使其充分溶解，其浓度为20ng/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释至10ng/ml，5ng/ml， 2. 5ng/ml，1. 25ng/ml，0. 625ng/ml，0. 312ng/ml，样品稀释液为标准浓度Ong/ml。
[0049] 2. 2样品的制备：取Img对照品利伐沙班加0. 5mlDMSO溶解，并用水稀释10倍至 200μg/ml。将嗯挫烧酬类系列样品分别W0. 5mlDMS0溶解，并用水稀释10倍至200μg/ ml。分别取对照品利伐沙班和嗯挫烧酬类系列样品200μ1与5ng/ml标准酶溶液200μ1 混合，25°C溫育lOmin。
[0050] 2. 3工作液的配制：A工作液、B工作液和洗板液均按试剂盒说明书配制。
[0051] 2. 4加样测值：
[0052] 2. 4. 1 在 96 孔酶联板上分别加入 100μ1 的 20ng/ml，lOng/ml，5ng/ml，2. 5ng/ml， 1. 25ng/ml，0. 625ng/ml，0. 312ng/ml，0ng/ml的标准酶溶液各两例，也分别加入100μ1溫 育后的样品溶液各Ξ例，覆膜37°C解育120min。
[0053] 2. 4. 2弃去液体，甩干。每孔加A工作液100μ1，覆膜37°C解育60min。
[0054] 2. 4. 3弃去液体，甩干，用400μ1洗板液浸泡2min，共洗板3次，甩干。
[0055] 2. 4. 4每孔加B工作液100μ1，覆膜37°C解育60min。
[0056] 2. 4. 5弃去液体，甩干，用400μ1洗板液浸泡2min，共洗板5次，甩干。
[0057] 2. 4. 6依序每孔加入底物溶液90μ1，37°C避光显色30min。
[0058]2. 4. 7依序每孔加入终止溶液50μ1，终止反应。终止液的加入顺序要与底物溶液 的加入顺序一致。
[0059] 2. 4. 8用酶标仪在450nm处依次测量各孔的光密度0D值。 W60] 3.实验结果：
[0061] 如表1所示，标准酶量为5ng/ml时，与对照品利伐沙班相比，化合物I,表现出比 利伐沙班更好的FXa抑制作用，化合物14和II3的体外FXa抑制作用与对照品利伐沙班相 当，其他化合物的体外FXa抑制作用较利伐沙班差。
[0062] 表1 :化合物对FXa因子的抑制作用（标准酶5ng/ml)
[0063]
具体实施方案 柳64] 实施例1 :做-4-(4-巧-(((4-硝基苯基）氨基）甲基）-2-氧代嗯挫嘟-3-基） 苯基）吗嘟-3-酬化） 阳0化]将（S)-4-(4-(5-(氨基甲基）-2-氧代嗯挫烧-3-基）苯基）吗嘟-3-酬盐酸盐 (la) (2g，6. 12mmol)、对氣硝基苯（1. 73g，12. 23mmol)、碳酸钟（2. 54g，18. 36mmol)、乙酸乙 醋（40ml)加入到反应瓶中，加热至回流，揽拌24h后，反应混合液过滤，滤饼用水洗涂，得 滤饼。滤液分出有机层，有机层用饱和食盐水洗涂（30mlX3)，无水硫酸钢干燥，过滤，滤液 硅胶柱层析（乙酸乙醋：石油酸，40 : 1)得黄色固体，合并两部分固体即得产品（1.90g， 75. 4%)，mp190 ~192°C。
[0066] 其结构鉴定数据如下：
[0067] ESI-MS(m/z) ：435. 10[M+23]"
[0068]iH-NMR(300MHz，CDCI3)δ:8.03 (d，J= 9.0Hz，2H，Ar-H) ,7.49 (d，J= 8. 9Hz， 2H，Ar-H)，7. 28(d，J= 8. 8Hz，2H，Ar-H)，6. 56(d，J= 9. 0Hz，2H，Ar-H)，4. 82(s，lH，CH)， 4. 28 (s，2H，OCH2CO)，3. 92 ~4.