二羧酸双酰胺衍生物、其用途、基于其的药物组合物和用于生产二羧酸双酰胺衍生物的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及新型生物活性化合物，具体地涉及二羧酸双酰胺衍生物或其药用盐， 其能够与金属离子形成复合物（络合物，complex)或螯合金属离子。本发明还涉及所述 化合物作为用于预防和/或治疗心血管疾病、病毒疾病、肿瘤疾病、神经变性疾病和炎性疾 病、糖尿病、与年龄有关的疾病、由微生物毒素引起的疾病、酒精中毒、酒精性肝硬化、贫血、 迟发性皮肤卟啉病和过渡金属盐中毒的药剂（试剂，agent)的用途。
【背景技术】
[0002] 金属离子在细胞与整个机体的功能化以及在病理学的发展中均非常重要。
[0003] 存在有已知的药物，它们的活性通过它们螯合金属离子的能力来确定。在本上下 文中，当前正在研究无毒化合物，其能够以高效率和高选择性螯合金属离子并且其适于生 物医学应用。
[0004] 在不同种类的化合物中已经发现了具有螯合能力的化合物，诸如单-和二硫醇、 二硫化物、偶氮化合物、亚硝基芳香族化合物、聚氨基羧酸衍生物、缩氨基硫脲、吡哆醛异烟 腙、喹啉、金刚烷、邻苯三酚（pyrogal1〇1)、邻菲咯啉、硫代焦磷酸盐等。此外，在其它天然化 合物中也发现了它们，诸如例如肌肽、菲汀、果胶。具有多种在复合物形成反应中能够充当 电子供体的官能团的化合物最令人感兴趣。因此，此类化合物可以允当特定地与金属离子 或金属基团相互作用的配体。
[0005] 当今广泛已知的复合物形成剂是聚氨基羧酸衍生物（例如EDTA)、D-青霉胺和多 环化合物，它们已经被成功地应用在重金属中毒疗法中。在一些铁过量病况和血色素沉着 症中，将去铁胺用作铁螯合剂。另外，螯合剂在与高钙水平病况（例如，关节病、动脉粥样硬 化和肾结石）有关的病理治疗中可以是有用的。还已知的是，螯合疗法预防胆固醇蓄积并 且恢复其在血液中的水平，降低血压，允许避免血管成形术，抑制某些心脏药物的不良副作 用，从胆固醇斑块中除去钙，溶解血栓并恢复血管弹性，恢复正常心律不齐，防止衰老，恢复 心脏肌肉力量并且改善心功能，增加细胞内钾浓度，调节矿物质代谢，有用于治疗阿耳茨海 默氏病，预防癌症，改善记忆，并且具有多种其它积极效果。但是，目前在螯合疗法中使用的 强螯合剂通常具有毒性效应，其本身主要表现为小肠的粘膜损伤和肾功能异常。在一些情 况下，快速给予大量的已知螯合剂可能损害肌肉应激性和血液凝固。另外，强螯合剂能够 与宝贵的生物元素（Na、K、Ca、Mg和Ca)相互作用并且能够改变最为重要的金属酶的活性 [ZeleninΚ·Ν·''Chelatorsinmedicine,''SorosEducationalJournal, 2001,v. 7,No. 1, pp.45-50]。
[0006] 在本上下文中，目前正在研究的新型高效螯合剂具有足以实现在体内的生物效应 的螯合能力并且无副作用。
[0007] 诸如HIV、人乳头瘤病毒、疱疹、肝炎等病毒性疾病的螯合疗法的理念是特别实际 的。
[0008] 病毒蛋白的结构中的锌结合位点（所谓的"锌指"）被认为是潜在的目标。
[0009] 当今，已经发现多种化合物影响这些病毒的重要蛋白质的"锌指"结构。
[0010]AndreasJ.K.的 文 章Bioorganic&Medicinal chemistry, 2003,V. 11，ρρ· 4599-4613公开了一种惯用名Bananin的金刚烧衍生物，其是一 种锌离子螯合剂。该化合物被假定为化学适用于除去HIV蛋白NCp7的锌。偶氮二甲酰胺 是一种应该表现出上述的作用机制的偶氮衍生物，其目前处于针对进行性AIDS的I/II期 临床试验中。
[0011]文章RiceW.G.，SchaefferC.A.，HartenB.，Nature, 1993,V. 4,ρρ· 473-475 公开 了 3-亚硝基苯甲酰胺，其能够从HIV蛋白NCp7中除去锌，抑制HIV的复制并且压制其在体 外和体内的致病性。
[0012] 人乳头瘤病毒蛋白E6的"锌指样位点也被选择为靶标。这种病毒是宫颈癌的 病因学中的潜在介体（介导物，mediator)。
[0013]文章BeerheideW.，BernardH. -U.，TanY. -J.，GanesanA.J.，NationalCancer Institute, 1999,v. 91，No. 14,pp. 1211-1220描述了氮杂化合物、以及二硫化物和亚硝基芳 族衍生物的体外研究。4, 4'-二硫代二吗啉型化合物已被证明引起锌离子的释放。因此， 观察到了病毒蛋白的结构的变化以及与人乳头瘤病毒的生物学和病理学有关的其功能的 削弱。但是，该化合物的临床试验尚未完成，并且它们的有效性仅能在体外研究的基础上判 定。
[0014] 以上所指出的化合物被假定为针对宫颈癌、尖锐湿疣和潜伏性生殖器乳头状 瘤病毒感染的药物开发的潜在目标。丙型肝炎病毒是人类最常见的病原体之一。丙型 肝炎的现代治疗几乎仅基于干扰素及其与核苷类似物利巴韦林的组合的使用[Kozlov M.V.，PolyakovK.M·，IvanovA.V·，Biochemistry, 2006,V. 71，No. 9,ρρ· 1253-12594]。应 该注意的是，该治疗不是很有效。
[0015] 关于针对丙型肝炎病毒的治疗剂的开发，靶标之一是具有锌位点的NS3-丝氨酸 蛋白酶，该锌位点对于维持其结构稳定性是重要的[AndreaUrbani,RenzoBazzo,Maria ChiaraNardi,DanielOscarCicero,RaffaeleDeFrancesco,J.Biol.Chem. , 1998,v. 273 ，No. 30,pp. 18760-18769]。一些文献资料报道，通过使用具有锌去除能力的化合物来抑制或 改变其活性是一种有前途的控制丙型肝炎病毒疾病的策略。
[0016] 文章TimothyL.Tellinghuisen,MatthewS.Paulson,CharlesM.Rice,J.Virol ogy，2006,v. 80,No. 15,pp. 7450-7458教导了，相对于NS2/3自动裂解评估的金属螯合剂 (EDTA和1，10-菲咯啉）是有效的蛋白酶抑制剂。此外，有资料称，在这种情况下，1，10-菲 咯啉的效果与锌的螯合完全相关。
[0017] 文章SperandioD.，GangloffA.R.，LitvakJ.GoldsmithR.，Bioorg.Med.Chem. Lett.，2002,v. 12,No. 21，3129-3133公开了二苯并咪唑化合物的筛选，目的在于探索丙型 肝炎病毒NS3/NS4A丝氨酸蛋白酶的抑制剂，并且提到该筛选还产生了相应强大的Zn2+-依 赖性抑制剂的识别。
[0018] 在丙型肝炎的治疗的新型方法开发中的另一种吸引人的靶标可以是丙型 肝炎病毒RNA依赖性RNA聚合酶（病毒蛋白NS5B)，其包含锌结合位点[Timothy L.Tellinghuisen,MatthewS.Paulson,CharlesM.Rice,J.Virology, 2006,v. 80,No. 15 ，ρ·7450-7458]。
[0019] 目前已知的丙型肝炎病毒RNA依赖性RNA聚合酶的抑制剂可以常规地分为两个主 要类别：核苷衍生物和各种非核苷抑制剂[MariaBretner,Actabiochemicapolonica, 20 05, v. 52,No. 1，p. 57-70]。此外，已经发现，连苯三酚衍生物抑制所指示的酶的活性。值得注 意的是，邻苯三酚衍生物的抑制机制被假定为基于镁离子的螯合作用，该镁离子参与磷酰 基转移步骤中的催化作用[KozlovΜ·V.，PolyakovΚ·M.，IvanovA.V.，Biochemistry, 200 6, v. 71,No. 9,pp. 1253-12594] 〇
[0020] 由疱疹病毒引起的疾病的广泛传播。因此，已知有多种人类疱疹病毒，诸如单 纯疱疹病毒1和2(HSV-1和HSV-2)、细胞巨化病毒（CMV)、水痘带状疱疹病毒和埃-巴 二氏病毒（Epstein-Barrvirus)。它们对中枢神经系统的破坏性行为引起疾病，诸如 脑炎和脑膜炎。对锌螯合化合物（例如二亚乙基三氨基五乙酸）在体内对人巨细胞 病毒复制的影响的研究存在巨大的兴趣[KanekiyoM.，ItohN.，ManoM.，Antiviral Res. , 2000,v. 47,p. 207-214] 〇
[0021] 但是，还值得注意的是，类似于上述的病毒，疱疹病毒包含具有"锌指样部 分的蛋白质。该"锌指"结构的化学修饰（化学改性，chemicalmodification)可以 导致锌的释放以及病毒蛋白的功能改变[YanChen,ChristineM.Livingston,Stacy D.Carrington-Lawrence，J.ofVirology, 2007,v. 81，No. 16,p. 8742-8751] 〇
[0022] 该"锌指"结构可以作为新一代抗病毒治疗的靶点。已经发现了一些这样的化合 物。但是，当今它们的效率仅参基于体外研究进行判定。
[0023] 上述信息暗示了金属离子对于细胞和作为整体的生物体的正常运作的重要性以 及对于病理的发展的重要性。一些化合物螯合金属离子的能力界定了开发有效于治疗各种 疾病（包括病毒性疾病）的研究策略。
[0024] 文章MeganWhitnall，JonathanHoward,PremPonka,"Aclassofiron chelatorswithawidespectrumofpotentantitumoractivitythatovercomes resistancetochemotherapeutics"，PNAS, 2006,v. 103,No. 40,p. 14901-14906 公开了有 效的铁螯合剂，其表现出类似于已知细胞抑制剂的活性的高增殖和抗癌活性，并且其有潜 力进行临床试验。
[0025]KikK. ,SzmigieroL. ,"Dexrazoxane(ICRF-187)-acardioprotectant andmodulatorofsomeanticancerdrugs"，PostepyHigMedDosw Online, 2006,v. 60,p. 584-590报道，一些铁螯合剂由于其心脏保护作用而可以在抗癌治疗 中用作"辅助剂（helper)"。
[0026] 铜离子的螯合作用抑制血管生成并且减慢肿瘤的生长[Yu Yu,JackyWong,David B.Loveioy,"Chelatorsatthecancercoalface:DesferrioxaminetoTriapineand Beyond"，Clin.CancerRes.，2006,v. 12,p. 6876-6883] 〇
[0027] 锌螯合剂氯碘轻喹通过结合Zn2+而引起人类癌细胞的凋亡[HaijunYu,Yunfeng Zhou,StuartE.Lind,"Clioquinoltargetszinctolysosomesinhumancancer cells"，Biochem.J.，2009,v. 417,p. 133-139] 〇
[0028] 螯合剂在酒精中毒的治疗中被用作醛脱氢酶的抑制剂[ShianS.G.，KaoY.R.，Wu F.Y.,ffuC.ff.,"Inhibitionofinvasionandangiogenesisbyzinc-chelating agentdisulfiram"，Mol.Pharmacol·，2003,ν· 64 (5)，p.1076-84]且在酒精性肝硬 化、铁过量贫血和迟发性皮肤卟啉病的治疗中被用作醛脱氢酶的抑制剂[Schroterova L.,KaiserovaΗ. ,BaliharovaV.,"Theeffectofnewlipophilicchelatorson theactivitiesofcytosolicreductasesandP450cytochromesinvolvedin themetabolismofanthracyclineasantibiotics:studiesinvitro"，Physiol. Res. , 2004,v. 53 (6),p. 683-691] 〇
[0029]-些抗氧化剂的活性机理是螯合过渡金属离子（Fe、Cu)，这会导致减 少金属依赖性脂质过氧化作用[BabizhayevM.A.，SeguinMarie-C.，Gueynej J. ,EvstigneevR.P. ,AgeyevaE.A. ,ZheltuchinaG.A. ,Karnosine(-alanyl-L-h istidine)andcarcininef-alanylhistamine)actasnaturalantioxidantswith hydroxyl-radical-scavengingandlipid-peroxidaseactivities^,Biochem. J.，1994,v. 304,p.509-516]。
[0030] 抗氧化剂的使用可导致白内障分辨、消除视网膜疾病、减少糖尿病患者对胰 岛素的需求、去除皮肤色素沉着和消除中风后遗症症状。螯合在炎症性疾病（诸如骨 性关节炎和类风湿性关节炎）的治疗中也是有用的[ZeleninK.N.，"Chelatorsin medicine"，SorosEducationalJournal，2001，v. 7,No. 1，pp. 45-50] 〇
[0031] 螯合剂可以作为用于运输和易于从有机体提取砷、汞、锑、钴、锌、铬和镍的螯合剂 而在药剂中使用[ZholninA.V·，"Complexcompounds"，Chelyabinsk:ChGMA，2000,ρ· 28] 〇
[0032]已知肉毒毒素是通过螯合锌离子而被抑制[Anne C.，Blommaert A. , "Thio-derivededisulfidesaspotentinhibitorsofbotulinum neurotoxinB:implicationsofzincinteraction^ ,Bioorg.Med. Chem.，2003,v. 11 (2